猪流行性腹泻免疫净化技术规程编制说明

PAGEPAGE1团体标准《猪流行性腹泻免疫净化技术规程》（征求意见稿）编制说明一、项目来源根据《广西标准化协会关于下达2024年第三批团体标准制修订项目计划的通知》（桂标协［2024］25号）精神，团体标准《猪流行性腹泻免疫净化技术规程》由广西兽医协会提出，广西壮族自治区动物疫病预防控制中心、广西农垦永新畜牧集团西江有限公司、广西农垦永新畜牧集团有限公司良圻原种猪场、广西农垦永新畜牧集团新利牧业有限公司、广西农垦永新畜牧集团金光有限公司共同起草，项目编号为2024-0308。二、项目背景及目的意义猪流行性腹泻（PED）是由猪流行性腹泻病毒(porcineepidemicdiartheavirus,PEDV)引起以腹泻、呕吐、脱水为主要特征的一种高度接触性肠道传染病。该病首次于20世纪70年代初在英国暴发。随后10年间，在亚洲、美洲、欧洲等范围内广泛流行，给生猪养殖造成巨大经济损失。我国于1976年首次报道了猪流行性腹泻，并迅速扩散到诸多省份。该病的流行无明显季节性，一年四季均可暴发，无地域性；发病表现为呕吐、水样粪便，在仔猪阶段病死率达80%以上。据报道广西区多地方不同程度感染PEDV，且感染全年存在，目前由PEDV等引起的仔猪腹泻已成为危害我区猪群最为严重的疫病之一。该病无特效药治疗，疫苗免疫与生物安全管理是防控该病的主要措施。我国对PED的研究主要集中在研发高效诊断试剂盒、新型高效疫苗和新的治疗策略。我国对动物疫病净化工作历来十分重视，2012年国务院办公厅下发《国家中长期动物疫病防治规划（2012-2020年）》，提出要大力开展种畜禽场疫病净化工作，实施种畜禽场疫病净化计划。2017年，中共中央办公厅、国务院办公厅联合印发《关于创新体制机制推进农业绿色发展的意见》要求实施动物疫病净化计划，推动动物疫病防控从有效控制向逐步净化消灭转变。2021年5月1日修订实施的《中华人民共和国动物防疫法》，明确将“净化消灭”纳入动物防疫的方针和要求。2021年10月农业农村部发布了《关于推进动物疫病净化工作的意见》，提出实施动物疫病净化消灭，是动物疫病防控的重要路径，也是动物疫病防控的最终目标。按照我国动物疫病防控需要和国家中长期规划要求，我区种猪场重要疫病净化工作近年来逐步推进，取得明显成效，开展猪流行性腹泻等疫病净化事关养猪企业健康发展，事关种业振兴、畜牧业高质量发展，事关动物产品安全、公共卫生安全。本技术规程总结最新的科研成果和规模化生产实际，并在实践中验证、示范和应用，取得显著成效。把实践中行之有效的技术规范，制定成团体标准，推荐给同行学习、借鉴和实施，使科技成果转化为现实生产力，意义重大。本技术规程从生产管理、生物安全防控、免疫控制、PED管理措施、监测净化、净化效果评价、净化维持、档案记录等方面，规范规模猪场PED的免疫、防控与净化。本规程的制定及推广能够有效控制猪流行性腹泻的发生与流行、提高猪群的生产性能，促进经济效益和行业健康发展，提升种猪品质，促进畜牧业提质增效、高质量发展，保障我区养猪业可持续发展，对促进农村经济增长、巩固脱贫攻坚成果、助力乡村振兴具有重要而深远的意义。三、项目编制过程（一）成立标准编制工作组团体标准《猪流行性腹泻免疫净化技术规程》项目任务下达后，由广西壮族自治区动物疫病预防控制中心牵头成立了标准编制工作组，具体标准编制工作由起草单位相关人员配合。编制工作组制定了起草编写方案与进度安排，明确任务职责，确定工作技术路线，开展标准研制工作。（二）收集整理文献资料标准编制工作组收集了国内有关猪流行性腹泻免疫净化技术的相关文献资料。主要有：GB/T34757-2017猪流行性腹泻病毒RT-PCR检测方法GB/T36871-2018猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和猪轮状病毒多重RT-PCR检测方法SN/T1699-2017猪流行性腹泻检疫技术规范NY/T541-2016兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范NY/T544-2015猪流行性腹泻诊断技术DB45/T2352-2021猪主要病毒性腹泻防控技术规范DB45/T2731-2023生猪无疫小区生物安全管理技术规范DB22/T3273-2021猪流行性腹泻防制技术规范DB3302/T131-2021生猪病毒性腹泻病防制技术规范DB4109/T004-2019猪流行性腹泻防治技术规范DB62/T2701-2022猪流行性腹泻防控技术规范《中华人民共和国畜牧法》《中华人民共和国动物防疫法》《病死畜禽和病害畜禽产品无害化处理管理办法》《动物疫病净化场评估管理指南》《动物疫病净化场评估技术规范》（三）研讨确定标准主体内容标准编制工作组在对收集的资料进行整理研究之后，召开了标准编制会议，对标准的整体框架结构进行了研究，并对标准的关键性内容进行了初步探讨。经过研究，标准的主体内容确定为生产管理、生物安全防控、PED管理措施、监测净化、净化效果评价、净化维持、档案记录等。（四）调研、形成文本草案、征求意见稿2023年9月～12月，编制工作组深入广西各大型种猪场进行了广泛实地调研工作，查阅了大量的文献资料，结合最新的科研成果和规模化生产实际，对猪流行性腹泻的免疫、防控、净化技术进行系统总结。形成了标准的基本构架，对主要内容进行了讨论并对项目的工作进行了部署和安排。2024年1月～3月，在前期工作的基础之上，通过理清逻辑脉络，整合已有的参考资料中有关猪流行性腹泻的免疫、防控、净化技术，在广西壮族自治区动物疫病预防控制中心、广西农垦永新畜牧集团西江有限公司、广西农垦永新畜牧集团金光有限公司、广西农垦永新畜牧集团有限公司良圻原种猪场等单位多年来持续开展猪流行性腹泻免疫净化的研究基础上，按照简化、统一等原则编制完成团体标准《猪流行性腹泻免疫净化技术规程》（草案）第一稿。2024年3月～4月，标准编制工作组再次深入到区内多个种猪场进行大范围调研，通过实地调研，广泛地针对不同地区、不同种猪场开展技术对比和总结，并实际征求意见，通过收集反馈了大量意见，标准编制工作组多次召开会议，通过线上线下结合等会议形式对标准工作组讨论稿进行了反复修改和研究讨论，形成了团体标准《猪流行性腹泻免疫净化技术规程》（征求意见稿）第一稿。2024年5～8月，起草单位邀请了广西大学、广西标准技术研究院、广西壮族自治区农业农村厅兽医处、广西壮族自治区兽医研究所、广西壮族自治区动物卫生监督所、南宁海关技术中心、广西扬翔农牧有限责任公司等7个单位及专家针对团体标准《猪流行性腹泻免疫净化技术规程》（草案）进行征求意见。结合反馈意见，标准编制工作组再次组织召开会议，逐条分析意见，对标准草案进行了反复修改和研究讨论，形成了团体标准《猪流行性腹泻免疫净化技术规程》（征求意见稿）（第二稿）和编制说明。四、标准制定原则（一）实用性原则本标准是在充分收集国内外相关资料和文献、调研分析广西区内规模猪场养殖现状，结合起草单位前期研究工作取得的研究成果及积累的生产实践经验，并借鉴国内外规模猪场猪流行性腹泻免疫、防控、净化的成功经验进行总结起草的，符合生产实际，有利于规模猪场猪流行性腹泻免疫净化技术的实施与推广，具有较强的实用性和可操作性。（二）协调性原则本标准编写过程中注意了相关法律法规的协调问题，在内容上与现行法律法规、标准协调一致。（三）规范性原则本标准严格按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的要求和规定编写本标准的内容，保证标准的编写质量。（四）前瞻性原则本标准在兼顾当前区内规模猪场猪流行性腹泻免疫防控现实情况的同时，还考虑到了猪流行性腹泻净化发展的趋势和需要，在标准中体现了个别特色性、前瞻性和先进性条款，作为对猪场猪流行性腹泻免疫净化技术发展的指导。五、标准主要内容及依据来源当前，完善猪场基础硬件建设，建立和实施严格的生物安全体系，制定和落实科学的免疫程序，持之以恒抓PED的防控与净化，在部分猪场取得良好的效果。本标准的主要依据是借鉴国内先进标准和技术内容，参考国内外有关文献资料，结合广西区内外种猪场猪流行性腹泻免疫、监测、防控情况，进行实践研究，并通过实验室试验和临床验证后提出。本标准编写主要内容包括术语和定义、缩略语、生产管理、生物安全防控、免疫控制、PED管理措施、监测净化、净化效果评价、净化维持、档案记录等方面。适用于获得《动物防疫条件合格证》《种畜禽生产经营许可证》的规模猪场开展猪流行性腹泻的免疫与净化工作。其它猪场可参照执行。术语和定义“猪流行性腹泻”的界定是综合SN/T1699-2017和NY/T544-2015中对猪流行腹泻的概述和定义，通过修改简化总结提升，更简洁全面中肯；“疫病净化”和“免疫净化”的界定参考中国动物疫病预防控制中心发布的《动物疫病净化场评估技术规范》（2021版）对动物疫病净化的定义，免疫净化是通过采取免疫措施开展的一种疫病净化，是相对于非免疫净化的一种定义。来源：SN/T1699-2017猪流行性腹泻检疫技术规范来源：NY/T544-2015猪流行性腹泻诊断技术来源：《动物疫病净化场评估技术规范》（2021版）缩略语为简化书写、贴合阅读习惯，通俗易懂，参考相关国家、行业和地方标准的缩略语术式，规定了缩略语PED（猪流行性腹泻）、PEDV（猪流行性腹泻病毒）、ELISA（酶联免疫吸附试验）、RT-PCR（反转录聚合酶链式反应）。生产管理猪场建立适宜的生产管理制度并严格执行，是猪场正常运行以及疫病防控、净化的前提条件。生产管理包括引种管理、饲养管理（饲养条件）、物资管理、人员管理、运输管理、消毒管理、废弃物处置等方面，《NY/T5033无公害食品生猪饲养管理准则》中对生产管理的要求进行了明确规定，只有严格按规定执行，才能确保猪场猪流行性腹泻的免疫与净化工作能正常开展并取得成效。生物安全防控生物安全防控是猪场疫病防控的主要措辞，猪场想要实现猪流行性腹泻的净化，必须建立高等级的生物安全防控措施，包括硬件设施和软件措施。详细要求参照《DB 45/T2731生猪无疫小区生物安全管理技术规范》的规定执行。主要包括选址布局、基础设施条件、生产管理、疫病防控条件、无害化处理等方面。免疫控制疫苗选择：根据猪场实际选择与猪场当前 PDEV 流行毒株相匹配的 PED 商品化疫苗(灭活疫苗或弱毒疫苗)。免疫：猪场需根据自身实际建立合适的免疫程序。根据文献记载以及猪场实践验证，发现，PED的免疫净化需要从后备猪的免疫驯化开始；妊娠母猪产前至少需要免疫PED 疫苗两次以上，弱毒疫苗和灭活疫苗均需免疫；为了保持猪体内PEDV高水平抗体，有效预防PED的发生，在秋冬季节（腹泻高发季节）来临前，全群种猪开展两次PED 疫苗免疫，弱毒疫苗和灭活疫苗均需免疫。来源：李想.猪场不同流行毒株对猪流行性腹泻免疫和驯化效果的影响[D].山东农业大学,2022.来源：潘红丽,马青兰,苏胖.规模化母猪场流行性腹泻综合防控[J].现代畜牧科技,2023,(09):114-118.推荐免疫程序来源依据：2021-2022年标准编制工作组在广西农垦永新畜牧集团西江有限公司下属猪场开展猪流行性腹泻免疫监测与抗体消长规律试验，该公司下属所有种猪场均采用弱毒苗+灭活苗相结合的免疫方式防控PED，项目组通过监测猪群IgA、IgG抗体水平，优化免疫程序，最终确认出最优免疫程序为：①后备猪：133 日龄免疫 PED 弱毒疫苗 1 次；180 日龄同时免疫 PED 弱毒疫苗和灭活疫苗 1 次，并持续观察 30d，未发生腹泻，方可转群。②妊娠母猪：产前 3 周同时免疫 PED 弱毒疫苗和灭活疫苗 1 次；产前 1 周免疫 PED 灭活疫苗 1 次。③全群种猪：9～10 月份，同时免疫 PED 弱毒疫苗和灭活疫苗 1 次；间隔 30d 后免疫 PED 灭活疫苗 1 次。项目组对该公司下属猪场连续两年开展 PEDV监测，未发现PED临床病例，同时PEDV核酸检测均为阴性，说明该公司选择的疫苗和制定的免疫程序，对PEDV防控取得显著成效。将该程序向广西农垦永新畜牧集团有限公司良圻原种猪场、广西农垦永新畜牧集团金光有限公司、广西农垦永新畜牧集团新利牧业有限公司推广应用，也获得了相应猪场的认可。3、免疫控制标准：参照《动物疫病净化场评估技术规范》（2021版）对猪瘟、蓝耳、口蹄疫等一类动物疫病免疫控制标准的规定，考虑PED 疫病特点，结合猪场实践与征求专家意见，综合评定认为，猪场连续 1 年及以上无 PED 临床病例（说明猪场能有效控制PED 的发生），猪群抽检 PEDVIgG 抗体阳性率达 90％ 以上，且 PEDV 核酸抽检阴性，可视为达到PED 免疫控制标准。来源：《动物疫病净化场评估技术规范》（2021版）PED管理措施总结最新的科研成果和规模化生产实际，结合PEDV病毒特性，根据猪场多年防控PED的临床经验，总结出一套应对腹泻疫情的防控关键点，主要分为以下四个方面：1、分区管理：当猪场某个小单元发生PED 后，应立即做好分区管理，防止腹泻单元病毒扩散，快速控制疫情，缩小腹泻范围。PED 发生单元和未发生单元的清扫工具应分开，腹泻单元的工具和物资不得流出，人员不得窜栋，PED 发生单元和未发生单元之间不得互相转群。2、仔猪管理：当猪场某个小单元发生PED 后，整个发病单元猪舍应做好保温措施，上调温度 2℃，防止应受凉而加重腹泻症状。停止人工接产，减少应接触扩散病毒。3 日龄仔猪不做断尾、补铁、去势等常规操作，待仔猪健康状态稳定再进行操作。PED 对7日龄以内仔猪致病性最重，10日龄以上，没有被感染的仔猪，可正常进行断尾、补铁、去势。为快速控制疫情，减少损失，可以及时淘汰 7 日龄以下有严重腹泻、脱水虚弱等症状的无饲养价值的 腹泻仔猪。对 10 日龄以上仔猪早断奶处理，饲喂奶粉饲料（教槽料），前 3d 饮水中添加补液盐，保证舍内温度适宜和环境整洁。若 10 日龄以上早断奶仔猪出现腹泻，立即采样检测 PEDV 核酸，确诊为 PED 病猪立即隔离治疗，无治疗价值病猪淘汰处理。3、母猪管理：当猪场某个小单元发生PED 后，为了防止其他单元感染PEDV，其他单元母猪（含待产母猪）应加强管理。待产母猪进入产房前应清洗消毒，临产前用过硫酸氢钾擦拭消毒，清理体表，尤其是乳房、乳头等部位。母猪挤掉第一把奶水,然后固定乳头让仔猪吃初乳，分批哺乳。对拟早断奶母猪断奶前 5d 开始饲喂控制同期发情药物，至分娩后 21d 停止饲喂。不在产房之间移动母猪作为奶妈猪，并执行全进全出的生产模式。进行免疫时，严格执行母猪一猪一针头，仔猪一窝一针头。4、消毒管理：当猪场某个小单元发生PED 后，一定要做好环境减毒工作，即每日对猪场环境进行大消毒，包括妊娠舍内料道、粪道、走廊、办公生活区。发生过 PED 的单元，将所有生产工具、能拆卸的物件全部浸泡消毒，将角落缝隙里的粪便全部清理干净，进行全面消毒，50℃～60℃ 烘干 2 h以上（猪场经试验验证，只有确保温度50℃以上、烘干2 h以上才能完全消灭PEDV病毒，此步骤是有效控制PEDV病毒感染扩散的关键）。PED 场线内所有死亡猪只用尸体袋打包运输，防渗漏的同时确保每日对猪只转运车辆使用后的冲洗消毒。监测净化抽样：PEDV免疫抗体、核酸检测抽样的频次，数量主要参照《动物疫病净化场评估技术规范》（2021版）中关于抽样比例的设定。腹泻猪只抽样方案是参照我国每年动物疫病监测计划，每个采样点按30%假定流行率随机采样。来源：《动物疫病净化场评估技术规范》（2021版）2、样品采集及保存：血清、肠组织、肛门棉拭子样品的采集及保存方法按《NY/T541 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范》规定执行。主要是确保样品新鲜、防腐败、防渗漏。3、检测方法：经临床验证，PEDV 抗体检测按照 NY/T5446.6 （ELISA方法）进行。PEDV 核酸检测可按照 SN/T16995.3 （实时荧光RT-PCR方法）进行，或按照 DB45/T2352 附录 A （PEDV、TGEV、PDCoV、PoRV多重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法）进行均可。本标准编制工作组从2018年开始使用 DB45/T2352 附录 A （PEDV、TGEV、PDCoV、PoRV多重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法）在广西区进行PEDV等腹泻病毒流行病学调查，评估广西PEDV感染情况，结果与其他检测方法符合率高，为广西PEDV的防控提供技术支撑，可用于PEDV临床监测。来源：施开创，王睿敏，黎宗强，谢守玉，尹彦文，陆文俊，屈素洁.PEDV、TGEV、PDCoV、PRoV多重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用[J].\o"紫色刊名为"中国预防兽医学报，2019，41（6）：595-600。4、结果处置：PED 免疫抗体不合格的猪只，加强免疫，1 个月后再次检测，免疫抗体仍不合格的猪只，说明其PED 免疫抗体产生不理想，不稳定，有感染发病风险，不适合作为PED 免疫净化场种猪，应及时淘汰处理。PEDV 核酸抽检阳性的猪群应暂缓转群，并持续监测，待 PEDV 核酸转阴后，说明其不再排毒，感染风险小，可以转群。净化效果评价参照中国动物疫病预防控制中心《动物疫病净化场评估技术规范》（2021版）对相关疫病净化效果评价的规定，认为，猪场连续 2 年以上无 PED 临床病例，猪群抽检 PEDVIgG 抗体阳性率达 90% 以上，且 PEDV 核酸抽检阴性，视为达到PED 免疫净化标准。来源：《动物疫病净化场评估技术规范》（2021版）净化维持猪场想要维持 PED净化效果，必须持续严格按 NY/T5033、DB45/T2731 的规定做好猪场饲养管理、生物安全管理工作，并按照合适的免疫程序持续开展PED 免疫与疫病监测。档案记录依据《畜禽标识和养殖档案管理办法》确定，明确了畜禽养殖场应当建立养殖档案，并载明相关的内容。《动物疫病净化场评估技术规范》（2021版）也规定了相关净化措施需要做相应的档案记录，并且各种档案记录保存期不少于 3 年。来源：《动物疫病净化场评估技术规范》（2021版）六、国内外同类标准制修订情况及与法律法规、强制性标准关系经查新，目前国内未见有涉及猪场猪流行性腹泻免疫与净化技术的国家标准、行业标准、地方标准或团体标准。仅有《猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和猪轮状病毒多重RT-PCR检测方法》（GB/T36871-2018）和《猪流行性腹泻病毒RT-PCR检测方法》（GB/T34757-2017）两个关于诊断技术的国家标准，不涉及本标准的免疫净化技术；《猪流行性腹泻检疫技术规范》（SN/T1699-2017）和《猪流行性腹泻诊断技术》（NY/T544-2015）两个关于检疫诊断的行业标准，不涉及本标准的免疫净化技