DB34T∕ 2743-2016 槐米及其制品中总黄酮含量的测定 分光光度法

槐米及其制品中总黄酮含量的测定分光光度法DeterminationofFlavonesinSophorajaponicaanditsproducHYPERLINK安徽省质量技术监督局发布I本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由安徽省浓香型白酒标准化技术委员会提出并归口。本标准起草单位：安徽瑞思威尔科技有限公司、安徽古井贡酒股份有限公司。本标准起草人：陆玮、刘国英、胡帮超、查枢屏、王玉良、汤有宏、李安军、何宏魁、胡心行、周庆伍、杨恩贺。1槐米及其制品中总黄酮含量的测定分光光度法本标准规定了槐米及其制品中总黄酮含量的测定分光光度法。本标准适用于槐米、槐米提取液以及槐米发酵液等样品中总黄酮含量的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB5009.3食品安全国家标准食品中水分的测定GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。以槐米为主要原料进行提取而得到的产物。以槐米作为主要原料发酵得到的产物。HYPERLINK请去其他用本标准采用亚硝酸钠-氯化铝络合分光光度法测定槐米及其制品中的总黄酮含量。在中性或弱碱性且亚硝酸钠存在时，黄酮类化合物与铝盐生成螯合物，加入NaOH后溶液呈红橙色，在一定浓度范围内，其吸光度与黄酮类化合物的含量成正比，符合朗伯-比尔定律。5试剂与材料5.1试剂5.1.1除另有说明外，本标准所用水应符合GB/T6682的要求。5.1.2无水乙醇：分析纯。5.1.3亚硝酸钠：分析纯。25.2.1亚硝酸钠溶液(5%):称取5g亚硝酸钠，用水溶解定容至100mL;该溶液现配现用。5.2.2氯化铝溶液(10%):称取10g氯化铝，用水溶解定容至100mL。5.2.3氢氧化钠溶液(4%):称取4g氢氧化钠，用水溶解定容至100mL。5.2.4乙醇溶液(60%):量取600mL无水乙醇，用水溶解定容至1000mL。芦丁(C₂HoO16,CAS号：153-18-4),纯度≥99.0%。准确称取20mg(精确至0.1mg)芦丁标准品，用60%乙醇溶液溶解定容至100mL,此溶液中超声30min,用60%乙醇溶液定容至50使青勿传播或其他用途吸取5mL提取液于100mL烧杯中，加入30mL60%乙醇溶液，超声10min,以60%乙醇溶吸取2mL滤液，以60%乙醇溶液定容至37.3标准曲线的制作准确吸取芦丁标准溶液(5.4)0.0,0.5,0.8,1.0,1.3,1.5,1.8,2.0mL分别置于10mL比色管中，加乙醇溶液(5.2.4)至总体积为5mL,加亚硝酸钠溶液(5.2.1)0.3mL,混匀，静置8min;再加入氯化铝溶液(5.2.2)0.3mL,摇匀，静置10min;加氢氧化钠溶液(5.2.3)4.0mL,用乙醇溶液(5.2.4)定容至刻度，摇匀，静置10min。7.4试样溶液的测定吸取1.0mL待测液于10mL比色管中，加乙醇溶液(5.2.4)至5.0mL,加亚硝酸钠溶液(5.2.1)0.3mL,混匀，静置8min;再加入氯化铝溶液(5.2.2)0.3mL,摇匀，静置10min;加氢氧化钠溶液(5.2.3)4.0mL,用乙醇溶液(5.2.4)定容至刻度，摇匀，静置10min。7.5水分含量的测定按照GB5009.3规定执行。8分析结果表述8.1槐米中总黄酮的含量(以干基计)按式(1)计算：c——由标准曲线计算得出的待测样品溶液的总黄酮浓度(mg/L);0.05——槐米样品的提取液总体积，单位为升(L);H——槐米中水分的质量分数(%);8.2槐米制品中总黄酮的含量按式(2)计算：X=(c-c₀)×10×n