交叉配血试验的国际标准化

17/21交叉配血试验的国际标准化第一部分标准化定义 2第二部分差异性原因 3第三部分异抗体检测 5第四部分反应评估标准 7第五部分预先处理要求 10第六部分试剂标准化 13第七部分自动化系统一致性 14第八部分国际标准化进展 17

第一部分标准化定义关键词关键要点主题名称：国际标准化机构

1.国际标准化组织(ISO)是一个全球性的独立非政府组织，负责制定国际标准。

2.ISO通过其技术委员会(TC)制定标准，这些委员会由来自不同国家和行业领域的专家组成。

3.ISO标准以自愿采用为原则，为全球工业、商业和政府提供指导。

主题名称：血液银行和输血服务标准化

标准化定义

交叉配血试验的国际标准化是指，按照国际公认的标准和规范，对交叉配血试验的各个方面进行统一和规范，以确保其结果的可比性和可靠性。标准化的目标是提高交叉配血试验的准确性和效率，降低人为差错和不一致性的风险。

国际标准化涉及交叉配血试验的以下几个主要方面：

*试剂和材料：标准化试剂和材料，包括抗红细胞血清、试剂红细胞、培养基和培养皿等，以确保其质量和性能一致。

*方法学：标准化交叉配血试验的方法，包括抗血清的滴定、抗原和抗体的反应条件、培养时间和检测方法等，以确保结果准确可靠。

*解释标准：标准化交叉配血反应的解释标准，包括阴性和阳性的判定标准、弱反应和混凝反应的处理原则等，以确保结果一致性和可比性。

*自动化和技术升级：引入自动化仪器和技术，以提高交叉配血试验的效率和准确性，减少人为差错。

*质量控制和审核：建立严格的质量控制程序，包括试剂验证、人员培训、结果审核和持续改进措施等，以确保交叉配血试验的质量和可追溯性。

国际标准化的重要意义在于：

*提高准确性：统一的标准化方法和试剂，消除了人为差错和不一致性，提高了交叉配血试验的准确性和可信度。

*降低风险：标准化可以降低输血相关的不良事件风险，例如输血反应和溶血。

*提高效率：自动化仪器和标准化流程可以提高交叉配血试验的效率，缩短周转时间。

*促进协作：标准化促进了不同实验室之间的协作和信息交流，提高了交叉配血试验的整体质量水平。

*法规合规：遵守国际标准，可以确保交叉配血试验符合法规要求和最佳实践指南。

国际交叉配血试验标准化的主要组织包括国际输血学会（ISBT）、美国血液银行协会（AABB）和欧洲输血学会（EBMT）等。这些组织制定并定期更新国际认可的标准和指南，以指导交叉配血试验的实践。第二部分差异性原因关键词关键要点【血型差异的遗传基础】

1.ABO和Rh血型系统是由特定基因编码的，这些基因决定了红细胞表面抗原的存在或不存在。

2.遗传模式遵循孟德尔定律，个体的血型由其父母的血型共同决定。

3.稀有的血型可能由于基因突变或罕见等位基因的表达所致。

【抗原免疫原性的差异】

差异性原因

血清差异性：

*特异性抗体：血清中存在针对受试血液中不存在的特定抗原的抗体。

*规则抗体：针对常见抗原（如A、B、D）的抗体，在不同个体间表达水平不同。

*非特异性凝集：血清中的非抗体物质（如冷凝集素）与红细胞表面非抗原性分子相互作用导致凝集。

红细胞差异性：

*弱抗原：受试血液中存在抗原表达水平较弱，导致抗体检测灵敏度降低。

*抗原丢失：受试红细胞表面抗原丢失或减少，导致抗体反应减弱。

*红细胞变形：受试红细胞形态异常或可变形性差，影响抗原抗体反应。

技术差异性：

*试剂差异：使用不同制造商或批次的抗清或红细胞试剂可能导致反应差异。

*反应条件：孵育温度、时间和离心力等反应条件的变化可能影响结果。

*操作员因素：不同操作员的经验和技术熟练程度可能导致反应差异。

非抗原抗体相互作用：

*交叉反应：抗体可以与与预期抗原相关但结构相似的其他抗原反应。

*抗体干扰：血清中存在针对非预期抗原的抗体，干扰预期抗原抗体反应。

其他因素：

*病理生理状态：疾病或药物治疗可能影响血液抗原和抗体的表达和反应性。

*年龄：新生儿和老年人血液抗原抗体表达可能与成年人不同。

*种族差异：不同种族人群的血液抗原和抗体分布存在差异。

*免疫抑制：免疫抑制状态可能会降低体内抗体产生，导致交叉配血反应减弱。

确保交叉配血准确性的措施：

*使用灵敏度和特异性高的试剂。

*标准化反应条件，包括孵育温度、时间和离心力。

*确保操作员经过适当培训并具有熟练度。

*进行适当的质量控制措施，以监测试剂性能和操作员表现。

*考虑非抗原抗体相互作用和潜在的差异性原因。

*在必要时进行额外的测试（如亚组分检测）以解决差异性问题。第三部分异抗体检测关键词关键要点红细胞抗体的分类：

1.根据红细胞表面抗原的特性，红细胞抗体可分为同种异体抗体和自身抗体。

2.同种异体抗体针对非自身红细胞抗原，常见于输血反应和新生儿溶血症。

3.自身抗体针对自身红细胞抗原，常导致自身免疫性溶血性贫血。

红细胞抗体检测的原则：

异抗体检测

在交叉配血试验中，异抗体检测是至关重要的组成部分，用于检测受血者血清中存在针对供血者红细胞抗原的抗体。这些抗体被称为异抗体，若输注不兼容的血型，将导致严重输血反应。

检测方法

异抗体检测通常采用间接抗人球蛋白试验（IAT）进行。该试验涉及以下步骤：

1.血清稀释：受血者血清被稀释成一系列浓度，以提高灵敏度和特异性。

2.与供血者红细胞孵育：稀释后的血清与供血者红细胞孵育，允许抗体与红细胞表面抗原结合。

3.洗涤：孵育后，红细胞被洗涤以去除未结合的抗体。

4.加入抗人球蛋白（AHG）：洗涤后的红细胞与AHG孵育，AHG是一种抗体，与人球蛋白Fc区结合，形成“桥梁”，使红细胞聚集。

5.读数：聚集的红细胞表明存在异抗体。聚集的程度与抗体浓度相关。

抗原检测

为了确定异抗体的特异性，可以通过抗原检测来识别红细胞表面上特定的抗原。这通常是通过使用已知抗原的抗体凝集法或凝胶卡技术进行的。通过与已知抗原反应，可以确定异抗体的类型和亚型。

临床意义

异抗体检测在输血医学中具有重要意义，因为它有助于：

*预防输血反应：检测异抗体可以防止输注不兼容的血型，从而降低输血反应的风险。

*识别罕见血型：一些异抗体针对罕见血型，异抗体检测可以帮助识别这些患者并确保输注相容的血型。

*诊断溶血性贫血：异抗体可以导致溶血性贫血，异抗体检测可以帮助诊断这个病症并指导治疗。

标准化

异抗体检测的国际标准化对于确保输血安全的可靠性和一致性至关重要。标准化包括：

*试剂规格：抗原的标准化、AHG的标准化。

*检测方案：检测方法的标准化、孵育时间和温度的标准化。

*结果解释：标准化解读聚集反应的程度和临床意义。

国际标准化通过减少差异并提高质量，有助于提高交叉配血试验的准确性和可靠性。第四部分反应评估标准关键词关键要点抗原抗体反应

-红细胞抗原与相应的抗体发生特异性结合，导致红细胞凝集。

-凝集反应的强度与抗原抗体反应的强度成正比。

-红细胞表面抗原的表达量、抗体的亲和力和效力都会影响反应强度。

凝集反应的宏观表现

-凝集反应在透明胶体介质中可形成肉眼可见的凝块。

-凝块的大小和形状随凝集程度的差异而变化。

-凝集反应中，抗原和抗体比例的平衡性也会影响宏观表现。

凝集反应的动力学

-凝集反应是一个动力学过程，受温度、pH值、离子强度等因素影响。

-反应速度与抗原抗体浓度、温度和搅拌程度等因素相关。

-反应的平衡点决定了最终的凝集程度。

凝集反应的抗体特异性

-抗体只能与特定的抗原发生凝集反应，具有高度的抗原特异性。

-抗原决定簇的数量和结构也会影响凝集反应的特异性。

-交叉反应是指抗体与多个抗原发生反应的现象。

凝集反应的敏感性和特异性

-凝集反应的敏感性是指检测抗原或抗体的最低浓度。

-凝集反应的特异性是指反应的抗原抗体专一性。

-提高凝集反应的敏感性和特异性，对于交叉配血试验的准确性至关重要。

凝集反应的应用

-交叉配血试验：用于确定供血者的红细胞与受血者的血浆是否相容。

-血液分型：通过凝集反应检测红细胞上的抗原，确定血型。

-自身免疫性疾病诊断：检测患者血液中是否存在针对自身抗原的抗体。反应评估标准

交叉配血试验的反应评估标准旨在客观地判断受者血清或血浆与供者红细胞之间的免疫反应。目前，国际标准化推荐采用以下反应评估标准：

溶血反应：

*0分：无溶血

*1分：微弱溶血：肉眼可见少量游离血红蛋白，但宏观上没有明显溶血。

*2分：中等溶血：肉眼可见明显溶血，但仍有大量红细胞完整。

*3分：强溶血：肉眼可见几乎完全溶血，仅剩少量红细胞残骸。

凝集反应：

*0分：无凝集

*1分：微弱凝集：镜检可见少量凝集的红细胞，但红细胞悬浮液仍均匀。

*2分：中等凝集：镜检可见明显凝集的红细胞，红细胞悬浮液不再均匀。

*3分：强凝集：镜检可见红细胞严重凝集，红细胞悬浮液形成团块。

评估方法：

反应评估通常在孵育后37℃1小时和4℃过夜后进行，并记录溶血和凝集反应的评分。

判定标准：

*相容：溶血反应为0分，凝集反应为0-1分。

*不相容：溶血反应为2-3分，或凝集反应为2-3分。

*弱反应：溶血反应为1分，凝集反应为0-1分，或溶血反应为0分，凝集反应为2分。弱反应需要进一步调查，以确定是否具有临床意义。

注意事项：

*反应评估应由经过培训和合格的技术人员进行。

*评估结果应根据所用的反应评估标准进行解释。

*弱反应应谨慎解释，并考虑其他临床信息。

*反应评估可能会受到预激抗体、冷凝集素、补体的干扰，因此需要考虑这些因素。

*随着技术的进步，交叉配血试验的反应评估标准可能会得到更新和修改。第五部分预先处理要求关键词关键要点主题名称：采集和储存

1.采血：在遵守相关国家或国际法规和标准的情况下，从健康无菌的供体手臂静脉中收集抗凝血液。

2.储存：全血样本应在2°C至8°C的条件下储存，不超过5天。离心后，血浆或血清样本应在-20°C或以下的条件下储存，不超过6个月。

主题名称：离心和血浆制备

预先处理要求

在进行交叉配血试验之前，对受血者和供血者的样本进行适当的预处理至关重要。这些要求旨在确保结果的准确性和可靠性。

受血者样本

采集和储存：受血者样本当日新鲜采集。全血样本应保存在含抗凝剂的容器中，如EDTA或柠檬酸钠。血清或血浆样本可冷藏保存。

分离血清或血浆：采血后立即离心全血样品，收集血清或血浆，并在使用前进行测试。

洗涤：为了去除抗凝剂、补体和非特异性物质，建议洗涤红细胞。常用的方法包括：

*盐水洗涤：将红细胞悬浮于生理盐水（0.9%NaCl）中，离心，弃去上清液并重复几次。

*塑料试剂盒：使用专用的塑料试剂盒，其中含有洗涤缓冲液，可自动化洗涤过程。

浓缩：洗涤后，红细胞悬浮液可能需要浓缩。这可以通过以下方法实现：

*离心：以高转速离心红细胞悬浮液，将红细胞沉淀在管底。

*微柱：将红细胞悬浮液通过微柱过滤，去除多余的血浆和洗涤液。

供血者样本

供血者选择：交叉配血试验仅对预期输血的供血者进行。供血者应经过严格的筛选，并符合输血标准。

样本体积：供血者样本的量应足以进行必要的测试。通常需要5-10mLEDTA全血。

储存：全血样本应保存在含抗凝剂的容器中，并在使用前冷藏。

抗体筛选：应通过标准的抗体筛选检测供血者的血清或血浆中的不规则抗体。

三步交叉配血试验

第1步：血清对红细胞试验（IRT）

*将受血者血清与供血者红细胞反应，评估受血者血清中是否含有针对供血者红细胞抗原的抗体。

*血清浓度应为20-30%，反应时间为15分钟。

*反应结果使用显微镜检查，寻找凝集、溶血或反应增强等迹象。

第2步：血浆对红细胞试验（IPT）

*将受血者血浆与供血者红细胞反应，评估受血者血浆中是否含有针对供血者红细胞抗原的补体结合抗体。

*血浆浓度应为20-30%，反应时间为30-60分钟。

*反应结果使用显微镜检查，寻找凝集、溶血或反应增强等迹象。

第3步：红细胞对血清试验（IRT-AHG）

*将供血者红细胞与受血者血清和抗人球蛋白（AHG）反应，评估受血者血清中是否含有针对供血者红细胞抗原的非补体结合抗体。

*血清浓度应为20-30%，反应时间为30-60分钟。

*反应结果使用显微镜检查，寻找凝集、溶血或反应增强等迹象。

结果解读

交叉配血试验结果应由合格的输血专业人员进行解读。阳性结果表明受血者血清中存在针对供血者红细胞抗原的抗体，因此不兼容。阴性结果表明不存在抗体，因此供血者与受血者兼容。

注意事项

*所有预处理步骤都应在受控环境中进行，以避免样品污染。

*应使用经过验证的试剂和设备。

*操作员应接受过适当的培训并定期进行能力评估。

*交叉配血试验结果应与供血者和受血者的病史、体检和实验室检查结果相结合进行解读。第六部分试剂标准化试剂标准化

要确保交叉配血试验结果的可靠性，至关重要的一步是标准化所使用的试剂。这包括：

1.抗血清的标准化

抗血清效价的测定

抗血清效价是指抗血清在特定条件下溶解标准细胞悬液的稀释度。效价的高低反映了抗血清的效力。测定时，将已知效价的抗血清与标准细胞悬液按不同的稀释度混合，孵育后观察溶血反应。根据溶血的程度，推算出未知抗血清的效价。

抗血清专一性的测定

抗血清专一性是指抗血清只与特定抗原发生反应的能力。专一性好的抗血清可以避免交叉反应，提高交叉配血试验的准确性。测定时，将抗血清分别与不同抗原类型的细胞悬液混合，观察是否有溶血反应。

2.补体的标准化

补体效力的测定

补体效力是指补体溶解标准细胞悬液的稀释度。效力的强弱反映了补体的活性。测定时，将已知效力的补体与标准细胞悬液按不同的稀释度混合，孵育后观察溶血反应。根据溶血的程度，推算出未知补体的效力。

3.细胞悬液的标准化

细胞悬液浓度的测定

交叉配血试验中，细胞悬液的浓度至关重要。浓度过高或过低都会影响试验结果。测定时，使用血细胞计数板在显微镜下计数细胞数量，并根据公式计算细胞浓度。

细胞悬液活力测定

细胞活力是指细胞的存活率和完整性。活力的降低会影响交叉配血试验的结果。测定时，使用台盼蓝染料染色细胞，观察细胞的形态和受染情况，以此判断细胞活力。

4.其他试剂的标准化

抗人球蛋白血清

抗人球蛋白血清用于交叉配血试验中增强溶血反应。标准化时，测定抗人球蛋白血清的效价和专一性。

生理盐水

生理盐水用于细胞悬液的稀释和清洗。标准化时，检测生理盐水的渗透压和pH值。

滴度板和离心机

滴度板和离心机等仪器设备的性能直接影响交叉配血试验的结果。因此，必须定期对这些仪器进行校正和维护。

通过严格的试剂标准化，可以确保交叉配血试验结果的准确性和可靠性，从而最大程度地保障输血安全。第七部分自动化系统一致性关键词关键要点自动化系统一致性

1.标准化自动化设备和试剂，确保不同血库和实验室之间测试结果的一致性。

2.采用通用数据格式和通信协议，实现自动化系统之间的无缝集成和数据共享。

3.建立质量控制和校准程序，定期验证自动化系统性能，确保结果准确可靠。

标准化测试方法

1.统一交叉配血试验程序，包括反应时间、温度和试剂用量，避免操作差异带来的影响。

2.采用标准化解读标准，减少主观因素对结果的干扰，提高结果可比性。

3.建立外部质量评估计划，定期对不同实验室的交叉配血试验结果进行评估和对比。自动化系统一致性

交叉配血试验自动化系统在确保输血安全性方面发挥着至关重要的作用。然而，由于不同的系统使用不同的测试方法和算法，因此需要实现自动化系统之间的一致性，以确保准确可靠的结果。

国际标准化组织（ISO）15189标准

ISO15189标准是实验室质量和能力要求的国际认可标准，其中包括对交叉配血试验自动化系统的具体要求。该标准规定了自动化系统应满足的一致性标准，包括：

*重复性：系统在相同条件下对同一份样本重复进行试验时，应产生一致的结果。

*可比性：来自不同自动化系统的结果应具有可比性，以确保患者的安全和兼容性。

*准确性：系统产生的结果应准确反映实际的血液兼容性。

一致性评估

为了确保自动化系统的可比性和准确性，必须进行严格的一致性评估。该评估通常包括以下步骤：

*平行测试：将同一份样本在不同的自动化系统上进行测试，并将结果进行比较。

*方法比较研究：使用标准样本对不同的自动化系统进行评估，以比较其方法和算法的准确性。

*环试：参与者使用相同的样本和协议在自己的自动化系统上进行交叉配血试验，并提交结果进行比较。

一致性要求

根据ISO15189标准，自动化系统必须满足以下一致性要求：

*血细胞比容：系统应能够准确测量血细胞比容，其结果应与手动方法或参考仪器一致。

*试剂效价：系统应能够准确确定试剂效价，其结果应与手动方法或参考仪器一致。

*交叉配血试验结果：系统产生的交叉配血试验结果应与手动方法或参考仪器一致。

*可重复性：系统应在相同条件下对同一份样本进行重复试验时，产生一致的结果。

*可比性：来自不同自动化系统的交叉配血试验结果应具有可比性。

一致性维护

为了维持自动化系统的一致性，必须实施以下措施：

*定期维护和校准：系统应根据制造商的说明定期进行维护和校准。

*质量控制：应定期使用质量控制样本对系统进行监测，以确保其性能符合预期的规范。

*人员培训：系统操作人员应接受适当的培训，以确保他们正确使用和维护系统。

*数据分析：应定期分析系统产生的数据，以识别趋势和偏离标准情况。

结论

自动化系统一致性对于确保交叉配血试验的准确性和可靠性至关重要。通过实施ISO15189标准中规定的要求和维护措施，可以实现自动化系统之间的一致性，从而提高输血安全性和患者的福祉。第八部分国际标准化进展关键词关键要点【单克隆抗体特异性的国际标准化】：

1.WHO建立了单克隆抗体特异性的国际标准，促进不同制造商产品之间的可比性。

2.国际标准化确保了特异性检测结果的准确性和一致性，提高了交叉配血试验的安全性。

3.标准化减少了制造商之间的差异，简化了单克隆抗体的采购和使用。

【交叉配血试剂盒标准化】：

国际标准化进展

1.国际生物标准物质（IBRS）

自1967年以来，世界卫生组织（WHO）已建立了一系列IBRS，用于交叉配血试验的标准化。这些物质包括：

*红细胞抗原对照品：用于确定红细胞抗原的存在和表型。

*血清抗体对照品：用于确定血清抗体的存在和特异性。

*预吸附细胞和血清：用于消除干扰性物质，提高交叉配血试验的敏感性和特异性。

这些IBRS的建立促进了交叉配血试验技术的标准化和全球认可，确保了不同实验室之间结果的可比性。

2.国际标准化血型试剂（IRBC）

为了进一步提高交叉配血试验的标准化，国际血型委员会（ISS）制备了一系列IRBC。这些试剂具有明确定义的抗原表型，可用于：

*评估商业血型试剂的质量控制。

*确定新的红细胞抗原和抗体。

*进行患者血清的抗体识别。

IRBC的建立消除了血型试剂间变异的影响，提高了交叉配血试验的准确性和可靠性。

3.标准化检测方法

除了标准物质外，ISS还建立了标准化检测方法，以确保交叉配血试验的统一执行。这些方法包括：

*胶凝管法：利用离心力使红细胞和血清形成凝胶，观察是否存在凝集。

*盖玻片法：在盖玻片上混合红细胞和血清，观察是否存在凝集。

*微柱法：将红细胞和血清悬浮在微柱中，观察是否存在凝集。

这些方法的标准化提高了交叉配血试验的敏感性和特异性，减少了人为错误和可变性的影响。

4.国际质量控制计划

为了持续监测和改进交叉配血试验的质量，ISS建立了国际质量控制计划。该计划包括：

*分发IBRS和IRBC进行实验室间比较。

*组织研讨会和培训课程，提高实验室人员的技术水平。

*收集和分析反馈，识别改进领域。

该计划促进了不同实验室之间的质量控制，提高了交叉配血试验的整体标准。

5.全球数据库

ISS还维护着全球红细胞抗原和抗体的数据库，提供有关已识别抗原和抗体的综合信息。该数据库用于：

*确定新抗原和抗体。

*追踪抗原和抗体的分布和频率。

*为患者的血型鉴定位提供参考。

该数据库促进了全球对红细胞抗原和抗体的知识共享，有助于提高交叉配血试验的准确性。

国际标准化的意义

交叉配血试验的国际标准化具有以下重要意义：

*确保输血安全：通过标准化检测方法，可以