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REF_Ref71567503\r\h[32]。在0~0.045mg/mL范围内,其颜色的深浅与多糖含量成正比。按照2.3.2方法绘制标准曲线,以葡萄糖浓度C(mg/mL)对吸光度值A进行线性回归,得标准曲线回归方程y=13.884x+0.0745,相关系数R2=0.9991。标准曲线如图1。结果表明,葡萄糖浓度在0-0.045g/mL范围内,线性关系良好。 图SEQ图\*ARABIC1葡萄糖标准曲线Fig.1Standardcurveofglucose3.2单因素试验3.2.1料液比对枇杷叶多糖得率影响图SEQ图\*ARABIC2料液比对枇杷叶多糖得率影响Fig.2Effectofsolid-liquidratioontheyieldofloquatleafpolysaccharide料液比对枇杷叶多糖得率影响如图2所示,在超声功率为400W、浸提时间120min、浸提温度为60℃条件下,分别采用料液比为1:10g/mL、1:15g/mL、1:20g/mL、1:25g/mL、1:30g/mL做单因素实验。随着料液比的增大,多糖得率逐渐增大;当料液比增大到1:20g/ml多糖得率达到最大值4.46mg/g;当料液比继续增大,枇杷叶多糖得率逐渐降低。由此可得,最佳料液比为1:20g/mL。故选取1:15g/mL、1:20g/mL、1:25g/mL的料液比做正交实验。3.2.2浸提时间对枇杷叶多糖得率影响图SEQ图\*ARABIC3浸提时间对枇杷叶多糖得率的影响Fig.3theeffectofextractiontimeontheyieldofloquatleafpolysaccharide浸提时间对枇杷叶多糖得率影响如图3所示,在超声功率为400W、料液比为1:20g/mL、浸提温度为60℃条件下,分别采用90min、120min、150min、180min、210min的浸提时间做因素实验。随着浸提时间的延长,枇杷叶多糖得率逐渐增大;当浸提时间增大到120min时枇杷叶多糖得率最大值6.89mg/g:浸提时间继续延长,枇杷叶多糖得率逐渐降低。由此可知,最佳浸提时间为120min。故选取90min、120min、150min的浸提时间做正交实验。3.2.3超声功率对多糖得率的影响的结果分析图SEQ图\*ARABIC4超声功率对枇杷叶多糖得率影响Fig.4Influenceofultrasonicpowerontheyieldofloquatleafpolysaccharide超声功率对枇杷叶多糖得率影响如图4所示,在料液比1:20g/mL、浸提温度60℃、浸提时间为120min条件下,分别采用300W、350W、400W、450W、500W的超声功率做单因素实验。随着超声功率的增大,枇杷叶多糖得率逐渐增大;当超声功率增大到400W时枇杷叶多糖得率最大值5.43mg/g;超声功率继续增大,枇杷叶多糖得率逐渐减小。由此可知,最佳超声功率为400W。故选取350W、400W、450W的超声功率做正交实验。3.2.4浸提温度对枇杷叶多糖得率影响的结果分析图SEQ图\*ARABIC5浸提温度对枇杷叶多糖得率的影响 Fig.5Effectofextractiontemperatureontheyieldofloquatleafpolysaccharide浸提温度对枇杷叶多糖得率的影响如图五所示,在超声功率400W、浸提时间120min、料液比1:20g/mL条件下,分别采用20℃、30℃、40℃、50℃、60℃的温度做单因素实验。随着浸提温度的增大,枇杷叶多糖得率逐渐增大;当温度升高到50℃时枇杷叶多糖得率最大值4.69mg/g;浸提温度继续增大,枇杷叶多糖得率逐渐减小。由此可知,最佳浸提温度为50℃。选取40℃、50℃、60℃的温度做单因素实验。3.3正交试验在单因素试验的基础上,选取超声功率、浸提时间、料液比、浸提温度四个影响枇杷叶多糖得率的因素为自变量,选取40℃、50℃、60℃为提取温度水平,90min、120min、150min为浸提时间水平,350W、400W、450W为超声功率水平,1:15g/mL、1:20g/mL、1:25g/mL为料液比水平,根据正交试验设计原理,进行4因素3水平L9(34)的正交分析试验,所选因素及其水平见表1。水平因素A浸提温度(℃)B浸提时间(min)C超声功率(W)D料液比(g/mL)水平140903501:15水平2501204001:20水平3601504501:25表一正交试验因素及水平Table1orthogonalexperimentalfactorsandlevels对实验结果进行极差分析可知,料液比、浸提温度、浸提时间、超声功率对枇杷叶多糖得率影响作用大小,其顺序为:A>D>B>C,即浸提温度对枇杷叶多糖得率影响最大,料液比和浸提时间次之,超声功率对枇杷叶多糖得率影响最小。由正交实验结果可知提取枇把叶多糖得率最佳工艺组合:A3B3C3D2,即在料水比为1:20g/mL、浸提温度为60℃、浸提时间为150min、超声功率为450W时,枇杷叶中的水溶性多糖得率最大为7.06mg/g,但该正交试验中无此组合,故以此组合做验证实验以验证实验的正确性。结果显示,枇杷叶多糖得率较高,实验结果正确。正交试验设计及结果如表二所示。因素A浸提温度(℃)B浸提时间(min)C超声功率(W)D料液比(g/mL)实验结果(mg/g)试验111112.23实验212223.32试验313333.72实验421232.77试验522312.44实验623123.66试验731323.99实验832134.16试验933213.53均值13.0902.9973.3502.733均值22.9573.3073.2073.657均值33.8933.6373.3833.550极差0.9360.6400.1760.942表二正交试验设计及结果Table
2
orthogonal
experimental
design
and
results4结论枇杷叶在我国分布广泛,原料容易获取,其中含有黄酮、熊果酸、多糖化合物等多种生物活性物质,可以作为许多休闲小食品、保健类产品、饮品等。多糖化合物具有抗辐射、抗氧化、抗肿瘤、免疫作用等,可以作为治疗此类病症药物的天然原料,此类药物的研发是人类的一大福音,同时亦是对原料的有效利用,减少浪费。本实验通过查相关文献,获悉影响枇杷叶中多糖得率相关因素,并选取其中影响较大因素:超声功率、浸提温度、浸提时间、料液比等四个因素。依次进行单因素实验,优化出最佳提取温度50℃,最佳浸提时间120min,最佳超声功率400W,最佳料液比1:20g/mL。并据此,选提取温度40℃、50℃、60℃;浸提时间90min、120min、150min;超声功率350W、400W、450W;料液比1:15g/mL、1:20g/mL、1:25g/mL,做正交试验,由正交试验得最佳提取工艺条件为:A3B3C3D2,即料水比为1:20g/mL、浸提温度为60℃、浸提时间为150min、超声功率为450W。由于正交试验中并无此组合,故以此组合做验证试验,根据验证试验结果显示,该
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