微生物的实验室培养专题知识讲座

微生物试验室培养（知识点总结）1微生物的实验室培养专题知识讲座第1页复习题1、甲、乙、丙是三种微生物，下表①、②、③是用来培养微生物三种培养基。甲、乙、丙都能在③中正常生长繁殖；甲能在①中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在②中正常生长繁殖，甲、丙都不能。以下说法正确是：粉状硫10gK2HPO44gFeSO40.5g蔗糖10g（NH）2SO40.4gH2O100mLMgSO49.25gCaCI20.5g①++++-+++②+++-++++③++++++++A、甲乙丙都是异养微生物B、甲乙都是自养微生物、丙是异养微生物C、甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物D、甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物2微生物的实验室培养专题知识讲座第2页复习题2、培养基、培养皿、接种环、试验操作者双手、空气、牛奶所采取灭菌、消毒方法依次是：①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线灭菌⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法A、⑤③②①④⑥B、①②③④⑤⑥C、⑥②③④①⑤D、③④②①⑥⑤3微生物的实验室培养专题知识讲座第3页三、纯化大肠杆菌试验目标：接种大肠杆菌于培养基上，经过培养使其形成由单个细胞繁殖形成子细胞群体，即菌落。试验过程：(知识网络）配制培养基接种大肠杆菌恒温培养箱中培养（12—24h）结果分析与评价计算→称量→溶化→灭菌→倒平板调PH→分装→包扎菌种保藏平板划线稀释涂布平板未接种培养（对照组）接种培养（试验组）培养基配制成功是否？接种操作成功是否？4微生物的实验室培养专题知识讲座第4页配制培养基①在火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞；②右手拿锥形瓶，使锥形瓶瓶口快速经过火焰；③左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖。④待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置。倒平板过程总结：5微生物的实验室培养专题知识讲座第5页Q1.培养基高压蒸汽灭菌后，需冷却到____℃左右时，才能倒平板。用什么方法来预计培养基温度？_____________________________________________________________Q2.操作时锥形瓶口经过酒精灯火焰目标是：_____________________________________________Q3.将平板倒置目标是：_________________________________________________________________________________________________________________________Q4.在倒平板过程中，将培养基溅在皿盖与皿底之间部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为何？_____________________________________________________________50感觉锥形瓶温度刚才不烫手，就能够倒平板了预防瓶口微生物污染培养基既能够使培养基表面冷凝水分更加好挥发，又能够预防皿盖上水珠落入培养基，造成污染不能，因为空气中微生物可能在皿盖和皿底之间培养基上滋生。配制培养基6微生物的实验室培养专题知识讲座第6页平板划线接种原理：经过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线操作，将聚集菌种逐步稀释分散到培养基表面。7微生物的实验室培养专题知识讲座第7页平板划线接种灼烧接种环冷却划线（第一区域）蘸取菌液灼烧接种环冷却划线（第二区域）灼烧接种环冷却

划线（第三区域）灼烧接种环冷却

划线（第四区域）灼烧接种环冷却

划线（第五区域）灼烧接种环平板倒置放置培养8微生物的实验室培养专题知识讲座第8页平板划线接种第一区域第二区域第三区域第四区域第五区域9微生物的实验室培养专题知识讲座第9页Q2：每次划线前灼烧接种环目标：Q3：划线结束后灼烧接种环目标：平板划线接种答案：防止接种环上可能存在微生物污染培养基答案：杀死上次划线结束后残留菌种答案：及时杀死接种环上残留菌种，防止污染环境和操作者。Q1：第一步灼烧接种环目标：10微生物的实验室培养专题知识讲座第10页稀释涂布平板接种原理：将菌液进行一系列梯度稀释，并将不一样稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培养基上进行培养。当稀释倍数足够高时，即可取得单个细菌形成标准菌落。11微生物的实验室培养专题知识讲座第11页1、梯度稀释2、涂布平板稀释涂布平板接种12微生物的实验室培养专题知识讲座第12页结果分析与评价1、培养基制备成功标准2、接种操作成功标准假如未接种培养基在恒温箱中保温1~2天后无菌落生长，说明培养基配制是成功，不然试验失败，需重新配制。假如培养基上生长菌落颜色、性状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落特点，则说明操作是符合要求。假如培养基上出现了其它菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未到达要求，试验失败，需分析原因，再次试验。13微生物的实验室培养专题知识讲座第13页菌种保藏（了解）1、暂时保藏：适合用于频繁使用菌种。将菌种接种到固体斜面培养基，在适宜温度下培