铁皮石斛组织培养

关于铁皮石斛组织培养CompanyLogo铁皮石斛的组织培养铁皮石斛，为兰科多年生附生草本植物。生于海拔达1600米的山地半阴湿的岩石上，喜温暖湿润气候和半阴半阳的环境，不耐寒。一般均能耐－5℃的低温。石斛可分为黄草、金钗、马鞭等数十种，铁皮石斛为石斛之极品，它因表皮呈铁绿色而得名。第2页,共14页，星期六，2024年，5月CompanyLogo铁皮石斛的组织培养技术路线外植体丛生芽培养基生根发育完整植株第3页,共14页，星期六，2024年，5月CompanyLogo蔗糖：30g琼脂：6.8g初代培养基的设计诱导培养基

MS+BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖3%+琼脂6.8%【pH值5.2~5.6】MS母液：I-V50ml,5ml,5ml,5ml5ml。激素母液：BA10ml,NAA5ml第4页,共14页，星期六，2024年，5月CompanyLogo蔗糖：30g琼脂：6.8g土豆汁150ml继代培养基的设计增殖培养基

MS+BA0.5ml+NAA0.2+土豆汁10%~20%【pH值5.2~5.6】取MS母液：IV50ml,5ml,5ml,5ml,5ml;激素母液：BA5ml,NAA2ml第5页,共14页，星期六，2024年，5月CompanyLogoNAABAIAA增殖培养将建立的无菌系中的小苗转入增殖培养基中进行增殖培养。增殖培养基以MS为基本培养基，添加不同浓度的生长调节剂BA、NAA、IAA、IBA及土豆汁和香蕉汁等附加物。土豆汁香蕉汁IBA第6页,共14页，星期六，2024年，5月CompanyLogo蔗糖：30g琼脂：6.8g香蕉汁：200ml活性炭：20g生根培养基的设计生根培养基1/2MS+NAA0.2~0.5mg/L+香蕉汁20%+活性炭2.0%【pH值5.2~5.6】取MS母液：IV25ml,5ml,5ml,5ml,5ml;激素母液：NAA2~5ml第7页,共14页，星期六，2024年，5月CompanyLogoYourTexthere生根培养将丛生芽无菌操作切下单株放在生根培养基中于适宜条件下培养，约1~2周后即生根，以长成完整植株。第8页,共14页，星期六，2024年，5月CompanyLogo优选1年生铁皮石斛植株上生长健壮的茎段外植体的选择接种小芽苗多易于在苗基部形成丛生芽。苗的高度为1～2cm时,丛生芽增殖倍数最高数。生长发育健壮苗优先123第9页,共14页，星期六，2024年，5月CompanyLogo外植体的处理Text1Text2Text3摘去叶片和膜质叶鞘，剪成约2cm长带节的小段。用洗洁剂清洗后置流水下冲20~30

min。在超净工作台上用75%的酒精消30s0.1%HgCl2灭菌5min后，用无菌水冲洗5~6次，放入垫有干无菌滤纸的培养皿中，以吸去多余水分，茎段两端各切0.2~0.3cm。第10页,共14页，星期六，2024年，5月CompanyLogo接种实验一、接种准备工作1、超净工作台开紫外灯照射10-20min送风2、外植体消毒（继代培养采用已建立的无菌培养物作为材料）3、工具消毒二、接种操作1、用消毒工具、器皿，切取铁皮石斛幼茎段2cm2、接种环烧红，沾一下培养基3、镊取茎段插于培养基中4、封口、标记第11页,共14页，星期六，2024年，5月CompanyLogo各时期的培养条件茎段的诱导时间在5~11天之间培养温度23~25℃，光照强度2000lx，光照时间10h/d第12页,共14页，星期六，2024年，5月CompanyLogo参考文献[1]郑宽瑜,邓君浪,赵培快繁技术体系研究[J].云南农业科技,2009,(S2):57-59。[2]周根余,谢薇,程磊.影响铁皮石斛原球茎生长的若干因素[J].江西科学,1999,17(4):231-235.[3]叶纪沟.铁皮石斛试管苗的人工栽培研究[J].中国药业,2001,10(1):53。[4]李铭宗.铁皮石斛的生物学特性和人工栽培[J].福建热作科技,1999,24(1):29-31。[5]张明,夏鸿西,朱利泉,等.石斛组织培养研究进