安捷伦液相色谱仪使用注意事项 液相色谱操作规程

第第页安捷伦液相色谱仪使用注意事项液相色谱操作规程安捷伦液相色谱仪拥有充分您期望的性能、牢靠性和稳定性，让您的分析、仪器和试验室效率迈上一个新台阶，为您供应信念十足的日常分析结果，是试验室常用的一款仪

安捷伦液相色谱仪拥有充分您期望的性能、牢靠性和稳定性，让您的分析、仪器和试验室效率迈上一个新台阶，为您供应信念十足的日常分析结果，是试验室常用的一款仪器，用户在使用过程中有一些需要注意的问题，下面我们将分别列出，供参考。

安捷伦液相色谱仪使用注意事项：

1、色谱柱使用前认真阅读色谱柱附带的说明书，注意适用范围，如pH值范围、流动相类型等；必需使用保护柱；色谱柱长时间不用时，柱内应充分溶剂，两端封死保存。

2、流动相使用前必需过滤，不要使用多日存放的蒸馏水（易长菌）

3、溶剂瓶中的沙芯过滤头简单碎裂，在更换流动相时注意保护，当发觉过滤头变脏或长菌时，不可用超声洗涤，可用35%稀硝酸溶液浸泡后再洗涤。

4、检测器的灯有使用寿命限制，一般在正式进样分析前30min左右开启D灯或W灯，分析结束，立刻关灯。

5、仪器运行时，泵头必需用10%异丙醇水溶液虹吸冲洗，不能干枯。

6、注意各流动相所剩溶液的容积设定，若设定的容积低于最低限会自动停泵。

7、对于手动进样器当使用缓冲溶液时要用水冲洗进样口同时搬动进样阀数次每次数毫升

8、若使用含盐流动相，开机时必需先用10%甲醇水溶液冲洗20分钟以上再换上含盐流动相。

9、使用双泵时，A、B、C、D四相中，若所用流动相中有含盐流动相，则A、D（进液口位于混合器下方）放置含盐流动相，B、C（进液口位于混合器上方）放置不含盐流动相。

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色谱仪是一种用来进行色谱分别分析的装置，凭借其独特的分别本领以及精准度较高的分析本领，在食品安全、工业生产、医疗制药等领域都有较为广泛运用，在我们生产生活的各种领域发挥侧紧要的作用。

色谱仪的种类有很多，其中气相色谱和液相色谱是较为常见的两种色谱技术，今日我们就气相色谱和液相色谱的异同做个简单的讲解。

两者的差异

1.流动相区分

正如名字中所提及的，气相色谱的流动相为惰性气体，流动相与组分无亲合作用力，只与固定相有相互作用；而液相色谱的流动项为液体，与组分间有亲合作用。

2.色谱柱长度的区分

气相色谱由于载气的相对分析量较低，分子间隙大，故粘度低，流动性好，组分在气相中流动速度快，因此可以加添柱长，以提高柱效，色谱柱长度也在几米到几十米不等；液相色谱的色谱柱通常在几十到几百毫米。

3.分析样品的选择

气相色谱一般选择相对分子质量较小、低沸点、易挥发、热稳定性强的样品；液相色谱一般用于分析高沸点、难挥发、热稳定性差、分子质量较大的液体化合物。

4检测限制

气相色谱使用时需要将样品在气化室气化，需要较高的检测温度，并且接受的是尖头进样针，液相色谱则不需要对样品气化，常温即可检测，同时接受的是平头进样针。

两者的共同点

气相色谱和液相色谱的基本原理相像，本质上，都是利用“相像相溶”原理，利用色谱柱进行分别。同时在质谱联用领域，两者都可以成为质谱联用仪很好的分别项使用。

液相色谱仪适合于分别、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质，因而广泛为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中针对这种精密而又运用广泛的科学仪器，昨天我们讲解了其常见的柱压问题及解决方法，今日我们来聊一聊基线。HPLC常见的基线问题紧要有基线漂移以及基线噪音。

基线漂移

线漂移基线漂移是色谱工普遍碰到的问题。一般说来，机器刚起动时，基线简单漂移，大约要30min的平衡时间，假如用了缓冲溶液、缓冲盐，或者在低波长下（220nm）平衡时间相对会比较长，仍旧发觉基线漂移，原因可能有以下几种：

1、柱温波动

掌控好柱子和流动相的温度，检查是否有打开的窗户或空调对着柱温箱。

2、流通池被污染或有气体

用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池（尽量断开柱子）。如有需要，可以用1N的硝酸（不要用盐酸）。

3、紫外灯能量不足

更换新的紫外灯

4、流动相污染、变质或由低品质溶剂配成。检查流动相的构成，使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂。

基线噪音

对于紫外检测器,氘灯光源打开后要预热30min以上,基线才能稳定。噪声是指与被测物无关的检测器输出信号的随机扰动变化,分短期噪声和长期噪声两种。

基线噪音（规定的）

产生基线噪音的原因有：在流动相、检测器或泵中有空气；漏液；流动相混合不完全；温度影响（柱温过高,检测器未加热）；在同一条线上有其他电子设备；泵振动。

了避开基线噪音,在正式进样之前,需要对流动相脱气；冲洗系统以除去检测器或泵中的空气；检查管路接头是否松动；泵是否漏液；是否有盐析出和不正常的噪音,如有必要,更换泵密封；用手摇动使溶剂混合均匀或使用低粘度的溶剂削减差异或加上热交换器；有其他电子设备时断开LC、检测器和记录仪,检查干扰是否来自于外部,加以更正；泵振动时在系统中加入脉冲阻尼器。

基线噪音（不规定的）

（1）漏液：检查接头是否松动,泵是否漏液,是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要,更换密封,检查流通池是否漏液。

（2）流动相污染、变质或由低质溶剂配成：检查流动相的构成。

（3）流动相各溶剂不相溶：选择互溶的流动相。

（4）检测器/记录仪电子元件的问题：断开检测器和记录仪的电源,检查并更正。

（5）系统内有气泡：用强极性溶液清洗系统；检测器内有气泡,清洗检测器,在检测器后面安装背景压力调整器。

（6）流