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文档简介
第二节植物克隆1/33资料:早在1958年,科学家Steward等人就从胡萝卜块根诱导培养细胞取得了再生植株(克隆)。植物克隆技术基础:植物组织培养2/33植物体每个生活细胞都含有遗传上全能性,含有发育成完整植株潜能。植物细胞全能性为何胡萝卜根培养细胞能培养成一个完整胡萝卜植株?生物体每一个细胞都包含有该物种所特有全套遗传物质,都有发育成为完整个体所必需全部基因。
为何?1、概念:2、原因:植物克隆理论基础是:
植物细胞全能性以下相关细胞全能性含义,正确是:A、每个生物体内全部细胞都含有相同功效B、生物体内任何一个细胞能够完成该个体全部功效
C、生物体每一个活细胞都含有发育成完整个体潜能D、生物体每个细胞都经过产生、分裂、生长、衰老、
死亡全过程C3/33拟南芥烟草番茄小麦玉米水稻是不是全部植物细胞都有全能性?不一样植物细胞全能性一样吗?4/333、植物细胞全能性表达(1)受精卵全能性最高(2)植物细胞全能性﹥动物细胞(3)不一样植物或同一植物不一样基因型个体,细胞全能性表示程度不一样。受精卵生殖细胞体细胞>>5/33为何有些植物在屡次继代培养后,会丧失细胞全能性表示能力?培养物胚胎发生和器官形成能力下降原因:
1.遗传物质不可逆改变:
染色体畸变、细胞核变异或非整倍体产生等
2.生长发育条件改变:激素平衡打破或对外源生长物质敏感性下降
植物克隆成功所需条件是什么?1.探讨特定植物细胞全能性表示条件(激素配比)2.选择性能优良、细胞全能型表示充分基因型6/33为何体内细胞没有表现出全能性,而是分化成为不一样组织或器官呢?
基因在特定时间和空间条件下选择性表示结果。
在个体发育不一样时期,生物体不一样部位细胞表示基因不一样,合成蛋白质也不一样,从而形成了不一样组织和器官。怎样将植物细胞培养成一个完整植株呢?7/338/339/331.培养过程:2.培养程序:二、植物组织培养程序植物生长调整剂:PH值:(1)配制培养基(半固体、灭菌)无机营养成份:有机营养成份:(2)切取小组织块(外植体、消毒)(3)培养(固体培养基),取得愈伤组织(4)诱导愈伤组织,再生出新植株水、矿质元素(全部)①碳源:蔗糖②含N物质:氨基酸、维生素③琼脂:0.7%—1%,起支持作用激动素、细胞分裂素、生长素5.0-6.010/33(外植体)诱导出芽和根植物组织培养普通程序脱分化愈伤组织:一个相对没有分化活薄壁细胞团组成新生组织。
(细胞排列疏松、无规则)再分化脱分化:已经高度分化植物细胞,经过诱导重新恢复了分裂能力,产生愈伤组织过程,又称去分化。再分化:脱分化产生愈伤组织经培养,重新分化根或芽等器官过程。11/333、培养条件:前提:离体状态条件:(1)营养物质(2)植物生长调整剂(3)适宜外界环境条件(如:无菌环境、一定温度、空气、适合PH、适时光照等)12/33理论基础:植物克隆技术基础:植物组织培养植物器官培养植物细胞全能性主要技术:植物细胞培养植物细胞工程原生质体培养13/331.器官培养:
指以植物根、茎、叶、花、果等器官为外植体离体无菌培养。三、细胞培养和器官培养
指以单个游离细胞为外植体离体无菌培养。2.细胞培养:14/33植物细胞培养主要几个技术:1、组织培养2、悬浮细胞培养3、原生质体培养4、单倍体培养
经过调整营养物质和生长调整剂适当配比,诱导愈伤组织分化出芽和根分生组织而再生出新植株。经过液体悬浮培养使愈伤组织分散成单细胞,经适宜培养基中成份诱导,可发育成胚状体,从而形成新植株。用花药离体培养方法取得单倍体植株。用纤维素酶和果胶酶水解细胞壁,取得植物原生质体,用适当方法进行培养,取得新植株。15/33(外植体)诱导生芽生根脱分化再分化1、组织培养外植体—愈伤组织—芽和根—完整植株16/33外植体脱分化再分化胚性细胞细胞质丰富、液泡小而细胞核大2、悬浮细胞培养外植体—愈伤组织—单细胞—胚状体—完整植株17/33怎样实现细胞培养和器官培养成功?植物细胞培养和器官培养主要意义?主要经过平衡植物激素配比进行调控。3.器官发生和形态建成技术:4.意义:1.受精过程、胚胎发育过程及调控机理研究2.遗传工程操作、主要基因或影响原因研究3.培育植物新品种细胞培养和器官培养时,植物克隆结果,不一定是植物,也能够是器官,甚至是细胞群(愈伤组织)。人们要能够是植物,也能够是细胞或者是细胞代谢产物。18/33植物细胞0.5—0.6mol/L甘露醇(较高渗透压)纤维素酶、果胶酶球型原生质体为何要加较高渗透压甘露醇呢?预防原生质体吸水胀破植株原生质体培养再生新细胞壁四、原生质体培养与植物细胞工程19/33发光基因怎样培育发光树呢?四、原生质体培养与植物细胞工程20/33提取目标基因(发光基因)形成重组DNA分子重组DNA导入受体细胞(原生质体)检测植物发光是否原生质体培养21/33泡马豆(pomato)植物体细胞杂交技术20世纪60年代,科学家幻想:让一株植株地上部分结番茄,地下部分长土豆。这个幻想可能实现吗?22/33植物体细胞杂交植物细胞A(番茄)植物细胞B(土豆)原生质体A原生质体B方法?促融方法?类型?杂种植株(番茄土豆)愈伤组织杂种细胞为何可融合?去除细胞壁脱分化人工诱导原生质体融合再生出细胞壁融合原生质体再分化融合完成标志?酶解法物理:离心、振动、电刺激化学:聚乙二醇(PEG)细胞膜流动性AA、BB、AB23/33
杂交株同时含有马铃薯和番茄一些形态特征,但没有产生可坚固花、果实和真正意义上块茎,不能产生经济效益。主要原因:生物基因表示不是孤立,它们之间是相互调控、相互影响,杂交株含有两个物种遗传物质,但表示相互干扰。泡马豆(pomato)24/33白菜—甘蓝生长久短、耐热性强、易于贮藏25/33植物细胞工程:1.借助基因工程方法,将外源基因导入受体细胞2.经过细胞融合将不一样起源遗传物质重新组合3.经过显微注射将不一样起源遗传物质重新组合26/331.“白菜—甘蓝”是用植物细胞工程方法培育出来,培育过程不包括
A.基因选择表示B.同源染色体分离
C.制备原生质体D.形成愈伤组织B2.马铃薯是无性繁殖作物,体内轻易积累病毒,会造成其品质变差。当前对它进行脱毒处理最好方法是()
A.采取茎尖组织培养技术取得植株
B.采取基因工程技术培育抗虫植株
C.采取诱变育种培育抗性植物
D.采取杂交育种培育抗性植物A3.以下不能作为植物组织培养材料是:A、秋海棠叶B、马铃薯块茎C、成熟花粉D、木质部中导管细胞D27/334.以下相关植物组织培养过程中细胞脱分化说法,不正确是A、已经分化细胞失去特有结构和功效而转变成未分化细胞过程B、已经分化细胞转变为含有分生能力薄壁细胞,进而形成植物愈伤组织过程C、离体植物组织在一定条件下分化出根和芽过程D、离体植物组织在脱分化形成愈伤组织过程中必须经过相关激素诱导5.在植物器官培养过程中,能够经过适当调整植物激素百分比,
到达调控器官发育,如适量激动素和细胞分裂素配比可以诱导芽分化.()6.植物细胞工程技术就是在原生质体培养基础上原生质体融合技术。()28/334.植物体细胞杂交还未处理问题有()
A.去掉细胞壁,分离出有活力原生质体
B.将杂种细胞培育成植株
C.让杂种植物按照人们需要表现出亲代
优良性状
D.还未培育出属间杂种植物5.甲植物体细胞基因型为Aa,乙植物体细胞
基因型为Bb,去壁后用PEG将这两种植物细胞融
合,则得到杂种体细胞基因型可能为()
A.AaBbB.AAaaC.BBbbD.AABBAC29/336.在离体植物器官、组织或细胞分化形成愈伤组织过程中,以下哪一项条件是不需要()
A.消毒灭菌B.适宜温度
C.充分光照D.适宜养料和激素7.以下属于植物组织培养是()
A.花粉培养成单倍体植株
B.芽发育成枝条
C.根尖分生区发育成成熟区
D.未受精卵发育成植株CA30/3331
在再分化阶段所用培养基中,含有植物激素X和植物激素Y。逐步改变培养基中这两种植物激素浓度比,未分化细胞群改变情况以下列图所表示。据图指出两种激素不一样浓度比与形成芽、根、愈伤组织关系:1.当植物激素X与植物激素Y浓度比等于1时,
。2.
。3.
。未分化细胞群经分裂形成愈伤组织当X与Y浓度比大于1时,当X与Y浓度比小于1时,未分化细胞群分化形成芽未分化细胞群分化形成根则植物激素X名称是
。
细胞分裂素31/33下列图是植物组织培养简略表示。据此回答:(1)①表示
,它能被培养成为④根本原因是
。(2)②表示
,它与①相比分化程度
,全能性
。(3)若①是花药,则④是
,继续对其使用
处理可取得
正常植株,该过程称为
。(4)若①是胡萝卜根尖细胞,则培养成④叶片颜色是
,这说明根尖细胞
。
离体植物细胞、组织、器官①含有植物细胞全能性
愈伤组织低高单倍体植株秋水仙素纯合单倍体育种绿色含有与叶绿体形成相关基因32/33下列图表示水稻(体细胞有24条染色体)花药经过无菌操作,接入试管后,在一定条件下形成试管苗培养过程,已知水稻基因型为AaBb。据此回答以下问题:(1)在植物组织培养过程中要配制含有_____________培养基
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