试验室检测及数据分析应用

关于试验室检测及数据分析应用Serology血清学Whatisserology?什么是血清学？Whatisitfor?

血清学的意义Howtogetthebestserologicalresults?

怎样获得最佳的血清结果？Howtointerpretserology?broilersLayersandbreeders怎样分析血清学结果？－肉鸡－蛋鸡和种鸡Samplesandserumbanks

采样和血清保存第2页,共73页，2024年2月25日，星期天Whatisserology?

什么是血清学？Detectionofantibodies

抗体的检测第3页,共73页，2024年2月25日，星期天Typesofantibodies

抗体的类型IgAIgMIgEIgG第4页,共73页，2024年2月25日，星期天QualitativeTests定性试验Answerisyesorno

回答“是”或者“不是”Resultsare“positive”or“negativo”

结果为“阳性”或“阴性”RapidPlateAgglutinationtest

快速平板凝集试验AgarGelPrecipitationtest

琼脂凝胶沉淀试验第5页,共73页，2024年2月25日，星期天Semi–Quantitativetests

半定量试验Resultsexpressedintitres

结果用滴度表达Basedonserialdilution

基于连续稀释Resultsexpressed

in2x,10x(2log,10log)

结果表达为2x,10x(2log,10log)HI,Serumneutralization

HI,血清中和试验第6页,共73页，2024年2月25日，星期天Quantitativetests定量试验Resultsinabsolutenumbers

结果用绝对数表示Resultisthecolorimetricreactionofthesubstrateproportionaltothequantitiyofantibodies

结果是与抗体数量成比例的物质的比色反应ELISA

酶联免疫吸附试验第7页,共73页，2024年2月25日，星期天Sensibility敏感性Abilitytodetermineminimalquantitiesofantibodies

敏感性是指能检测到的最小抗体的数量Avoidfalsenegatives

避免假阴性Falsepositives假阳性Diseasecontrolanderradication

用于疾病控制和净化Example:SPA

举例：SPA第8页,共73页，2024年2月25日，星期天Specificity特异性Antibodiesdevelopedagainstaspecificagent

由特异性抗原产生的抗体Avoidfalsepositives

避免假阳性Falsenegatives

假阴性Example:Imnmunofluorescence

举例：免疫荧光试验第9页,共73页，2024年2月25日，星期天Ideal理想状况第10页,共73页，2024年2月25日，星期天Calculations计算Sensibility:敏感性RealPositives/(TotalnumberInfected)x100真正的阳性/(合计感染数)x100Sensibility=[98/(98+2)]x100=98%第11页,共73页，2024年2月25日，星期天Calculations计算Especificity:特异性RealNegatives/TotalnumberInfectedx100真正的阴性/合计感染数x100specificity=[80/(80+20)]x100=80%第12页,共73页，2024年2月25日，星期天Calculations计算

Sensibility=98%specificity=80%敏感性＝98％特异性＝80％第13页,共73页，2024年2月25日，星期天Aplicationinthefield现场运用Farmwith10.000birds某场10000羽鸡100%checked100％进行检测500positives出现500阳性490truepositives10falsepositives490真阳性10假阳性第14页,共73页，2024年2月25日，星期天specifictest特异性试验第15页,共73页，2024年2月25日，星期天Calculations2计算2Sensibility=80/(100)x100=80%

敏感性＝80/(100)x100=80%specificity=100/(100)x100=100%

特异性＝100/(100)x100=100%第16页,共73页，2024年2月25日，星期天specificityandSensibility

特异性和敏感性Typeofmethod

方法的类型Antigenused使用的抗原Conditionsofthetechnique

技术条件第17页,共73页，2024年2月25日，星期天Testcommonlyusedinpoultry

家禽常用的检测方法RPA-- Mycoplasma,Salmonella

AGP-- IBV,IBD,Marek,Reo

HI-- ND,IBV,EDS,Mycoplasma,Coryza

第18页,共73页，2024年2月25日，星期天Testcommonlyusedinpoultry

家禽常用的检测方法SN-- IBV,IBD,allforresearchpurposes

ELISA–nearlyallagents

第19页,共73页，2024年2月25日，星期天Serology血清学Diagnostics

诊断Monitoring

监测INTERPRETATION

分析第20页,共73页，2024年2月25日，星期天Criteriaforinterpretation

分析的标准WhatdiseasedoIwanttoverify?

我要验证什么病？Forwhatpurpose?DiagnosticsorMonitoring?

分析的目的是什么？诊断或监测？WhattypeofexploitationdoIhave?

我该采取什么方法？HowshouldIinterprettheresults

我该怎样分析结果？第21页,共73页，2024年2月25日，星期天DogmaoParadigma?USUALLYTHEHIGHERTHETITRE,THEBETTERTHEPROTECTION通常滴度越高，保护力越高第22页,共73页，2024年2月25日，星期天Basisfortheinterpretation

分析的基础PresenceofantibodiesInfectionDevelopmentoftheimmunity

存在抗体－感染－免疫力的产生AbsenceofantibodiesThereisnoinfectionTheInfectionwasveryrecentTheimmunityisinanearlystageofdevelopment没有抗体：－没有感染－最近刚感染－免疫力正在产生早期阶段第23页,共73页，2024年2月25日，星期天Interpretation:qualitativetests

分析：定性试验Negative阴性PositivoSample样品Noinfection

未感染Acutephase

急性期Lowlevelof

antibodies

抗体水平太低Re-test2weekslater

2周后重新检测Useamoresensitivetest使用更敏感的试验Vaccine疫苗live–nochallenge活苗－未攻毒killed–vaccinationfailure灭活苗－免疫失败Challengetest--verifyprotection

攻毒试验－验证保护力Takesamplesatalatermoment过一段时间再次采样第24页,共73页，2024年2月25日，星期天Interpretation:(semi-)quantitativetests分析：半定量试验Negativeorlowtitre阴性或低滴度PositivoSample样品Noinfection

未感染Acutephase

急性期Lowlevelof

antibodies

抗体水平太低Re-test2weekslater

2周后重新检测Useamoresensitivetest使用更敏感的试验Vaccine疫苗live–nochallenge活苗－未攻毒killed–vaccinationfailure灭活苗－免疫失败Challengetest--verifyprotection

攻毒试验－验证保护力Takesamplesatalatermoment过一段时间再次采样第25页,共73页，2024年2月25日，星期天Interpretation:qualitativetests

分析：定性试验NegativoPositive阳性Sample阳性Infection感染Sero-responsetotheantigen

对抗原血清学反应Confirmation确诊Useatestwithahigherspecificity

使用敏感性更高的试验Isolationoftheagent病原分离Vaccine疫苗live–fieldchallengeorvaccineresponse活毒－野毒感染或疫苗反应killed–vaccineresponse灭活苗－疫苗反应第26页,共73页，2024年2月25日，星期天Interpretation:quantitativetests

分析：定量试验NegativoHightitre高滴度Sample样品Vaccine疫苗live–fieldchallengeorvaccineresponse活毒－野毒感染或疫苗反应killed–vaccineresponse灭活苗－疫苗反应Confirmation确诊Useatestwithahigherspecificity

使用敏感性更高的试验Isolationoftheagent病原分离Infection感染Sero-responsetotheantigen

对抗原血清学反应第27页,共73页，2024年2月25日，星期天Vaccine疫苗GoodresponsetothevaccinationGoodvaccinecoverage接种后的良好反应Interpretation:(semi-)quantitativetests

分析：半定量试验LowCV低CVNarrowdistributionoftitres

狭窄的滴度分布Noinfection没有感染ChronicInfectioninthepopulation鸡群内慢性感染Samples第28页,共73页，2024年2月25日，星期天Vaccine疫苗poorresponsetothevaccination.接种免疫反应差，免疫覆盖差PoorvaccinationcoverageInterpretation:(semi-)quantitativetests

分析：半定量试验WideCVCV值大Averywiderangeoftitres滴度分布范围非常宽AcuteInfection急性感染Achronicinfectioninsomeindivduals某些个体慢性感染samplesCheckthebatch检查批号Comparewithfieldresults与临床结果比较第29页,共73页，2024年2月25日，星期天Interpretationinbroilers

对肉鸡群的分析LevelsofMaternallyDerivedAntibodies

母源抗体的水平KnowledgeaboutthesanitarystatusOutbreaks.Infectionsorchallenge

关于卫生状况的知识－疾病爆发、感染、攻毒CheckthevaccinationprogrammesFixeddates检查免疫程序固定日期第30页,共73页，2024年2月25日，星期天NormalCurve

正态曲线第31页,共73页，2024年2月25日，星期天Comparingcurves

曲线比较第32页,共73页，2024年2月25日，星期天Interpretation–chickensorlivevaccines

分析－雏鸡或活苗血清学结果外表性能分析措施第33页,共73页，2024年2月25日，星期天Lowtitre+CVgood+goodperformance

低滴度＋良好的CV＋良好的性能=continuewiththecontrolprogramme继续控制程序

第34页,共73页，2024年2月25日，星期天HighTitre+goodperformance

高滴度＋良好的性能=continuethecontrolprogrammeandKeepaneyeonthebiosecurity!继续控制程序，注意生物安全！Watchout!注意Vaccinatedflock免疫过的鸡群=Infectionwithprotection

具保护力的感染=Vaccinationwithahotstrain

用强毒接种Non-vaccinatedflock未免疫的鸡群=pastinfection

过去感染过=Infectionwithamildstrain

弱毒株感染过第35页,共73页，2024年2月25日，星期天Hightitre+narrowCV

高滴度＋窄CVOldinfectionGoodvaccinecoveragewiththeuseofastrongvaccinestrain使用了强的疫苗毒株，具有良好的疫苗覆盖性第36页,共73页，2024年2月25日，星期天Hightitre+wideCV

高滴度＋宽CVAcuteinfection急性感染Poorvaccinecoverageusingahotvaccinestrain

使用了强毒疫苗，疫苗覆盖性差。第37页,共73页，2024年2月25日，星期天Hightitre+poorperformance

高滴度＋差性能Isolateandidentifytheagent.分离鉴定病毒Improvethecontrolprogramme.改进控制程序Improvethebiosecurity改进生物安全。

=fieldinfection

Challengeanddisease野毒感染和疾病第38页,共73页，2024年2月25日，星期天Lowtitre+poorperformance

低滴度＋差性能acuteinfection–noantibodiesyet

急性感染－还未产生抗体otherproblems其它问题Retest1weeklater

1周后重新检测Lookforotherpossiblecause

寻找其它可能的问题第39页,共73页，2024年2月25日，星期天InterpretationbyAgent

按病原分析第40页,共73页，2024年2月25日，星期天Interpretationinbreedersorlayers

种鸡和蛋鸡的分析KnowledgeofthesanitarystatusOutbreaks,infectionorchallenge?卫生状况的知识－爆发、感染、攻毒CheckvaccinationprogrammesPre-fixeddates－检查免疫程序Comparisonwithproductioncurves

比较生产曲线第41页,共73页，2024年2月25日，星期天Highandlowtitres-howmuch?第42页,共73页，2024年2月25日，星期天Itisallisamatterofperspective第43页,共73页，2024年2月25日，星期天Highorlowtitres-howhigh?Howlow?抗体滴度高和低的认识Baselines基准线第44页,共73页，2024年2月25日，星期天Highorlowtitres-cuanto?滴度高或低－多少？Basededatos数据的基准线第45页,共73页，2024年2月25日，星期天Curves-IBD(Real)

IBD的抗体滴度曲线第46页,共73页，2024年2月25日，星期天Serologyoftheindividual

个体血清学Serologyofpopulations(flocks)群体血清学Samples采样数量Baseline-minimum23,ideal28

基准线－最低23份，理想28份

Monitoring-minimum15

监测－最低15份Diagnostics-between28and146

诊断－（28～146）份第47页,共73页，2024年2月25日，星期天Serum“banks”血清保存Research研究PruebascomprobatoriasImportantfordiagnostics诊断的重要性Security安全性Adequatestorageoftheserum–avoidevaporation

正确存储血清，避免蒸发第48页,共73页，2024年2月25日，星期天Collectingsamples采集样品Monitoring监测Consistence

时间安排VaccinationProgrammes

免疫程序Mineral-oilvaccines

矿物油疫苗Feed饲料Diagnostics诊断Pairedsamples双份采样SerotecaConditionsunderwhichthesamplesaretaken-

falsepositives

样品采集的环境条件（可能造成假阳性）Conditionsunderwhichthesampleshavebeentakenandthestorage第49页,共73页，2024年2月25日，星期天ELISAtitres

ELISA滴度Alotofvariationdependsontheauthorandthekit

根据不同的操作人员和试剂盒，ELISA滴度会有差异第50页,共73页，2024年2月25日，星期天ELISA-IDEXX第51页,共73页，2024年2月25日，星期天ELISA-KPL第52页,共73页，2024年2月25日，星期天ELISA-IDEXX第53页,共73页，2024年2月25日，星期天ELISA-KPL第54页,共73页，2024年2月25日，星期天ELISA-IDEXX第55页,共73页，2024年2月25