《医学微生物学》实验教学大纲

《医学微生物学》实验教学大纲一、课程编号：14050041 适用专业：临床医学课程类别：学科专业基础必修开课学期：3实验学时：20二、开课实验室：形态学实验室三、实验教材及参考书教材：黄庆红主编，《形态实验学》，第1版，世界图书出版公司，2010.9参考书目：[1]邬国军，戴橄，谭宇蓉主编，《实验医学微生物学》，中南大学出版社，2006[2]任同明、付升旗主编，《人体解剖实验学》，第一版，世界图书出版公司，2006.6[3]倪语星主编，《微生物学和微生物学检验实验指导》，人民卫生出版社，1997[4]刘运德，楼永良主编，《微生物学检验》，人民卫生出版社，1998四、实验教学目的和要求医学微生物学是研究与医学有关的病原微生物的生物学性状、感染与免疫机理、特异性诊断与防治的学科。医学微生物学是临床医学专业的专业基础课和桥梁学科，本课程的任务是通过对本课程的学习使学生初步掌握临床常见的病原微生物的基本特征、致病特性，机体对病原微生物感染的免疫以及临床的有效诊断方法和防治措施，为后续专业基础课、临床课打下理论和实践基础。实验教学可以让学生加深和巩固对课堂内容的理解和体会；在掌握系统理论知识的基础上，理解并掌握医学微生物学的基本操作技术，树立无菌观念。掌握实验室常用的消毒灭菌方法，掌握常见病原微生物的生物学性状、分离培养、鉴定及常用血清学检查方法。树立科学思维的意识，培养独立思考、独立操作和独立解决问题的能力，为今后免疫性疾病、传染性疾病的诊治和研究打下坚实的基础。具体要求：1.为提高实验课教学效果，学生每次实验前必须认真预习。了解实验原理、材料与方法、注意事项以及预期的实验结果。2.加强基础训练，每次实验过程中应注意基本技术、基本操作的正确性。坚持实验的严肃性、严格性和严谨性。3.示教实验和录像实验要仔细观察。4.自行操作项目要认真、仔细、准确。5.为提高科学思维和分析总结能力，每次实验结束后必须认真、如实地记录结果，进行分析，得出结论，完成实验报告。6.联系临床应用，提高学习积极性，加强学生的动手能力，进一步提高实验教学质量。五、考核形式要求《医学微生物学》是一门实践性较强的学科，实验操作技能在本课程中十分重要。在期末进行实验操作考试，按百分制记分，实验成绩按20%记入该课程总成绩，实验报告及平时成绩按10%计入该课程总成绩。六、实验项目及要求（一）实验项目名称序号实验项目名称实验类型实验学时每组人数实验要求1细菌形态学检查综合420必修2手指皮肤的细菌学检查设计420必修3脓汁标本细菌学检查综合220必修4粪便标本细菌学检查综合220必修5弧菌属、厌氧性细菌、白喉棒状杆菌、螺旋体综合420必修6分枝杆菌属、病毒学、真菌学、实验考核综合420必修（二）目的要求及实验内容1.细菌形态学检查目的要求：掌握显微镜油浸镜的使用与保护法；掌握细菌的三种基本形态和四种特殊结构及与医学的关系；掌握细菌片制片技术；革兰氏染色法的原理、步骤、结果、临床意义。实验内容：1.实验室规则；2.油镜的使用（1）原理（2）使用方法（3）保护法；3.用油镜观察细菌的基本形态、特殊结构(操作)；4.革兰氏染色法(操作)2.手指皮肤的细菌学检查目的要求：了解细菌的接种法，熟悉细菌培养基的种类及细菌的培养方法；掌握细菌在培养基中的生长现象；熟悉微生物在自然界及人体的分布，进一步树立无菌观念；掌握常用的消毒灭菌法；掌握药敏试验及其临床意义。实验内容：1.细菌培养基的种类、用途、制备程序(示教)；2.接种环、针的有关知识，接种程序，接种方法(示教)；3.细菌的培养方法(示教)；4.细菌在培养基中的生长现象的观察（操作）；5.空气中细菌的检查（操作）；6.咽喉部细菌的检查（操作）；7.手指皮肤消毒前后的细菌的检查（操作）；8.煮沸消毒试验(示教)；9.紫外线杀菌试验（示教）；10.药敏试验(示教)；11.常用消毒灭菌器的介绍(示教)3.脓汁标本细菌学检查目的要求：掌握常见化脓性细菌的形态、染色特点和培养特征；熟悉葡萄球菌的色素，金葡菌、甲、乙型溶血性链球菌的溶血现象；掌握血浆凝固酶试验、ASO试验的临床意义；熟悉脓汁标本中致病性葡萄球菌的分离与鉴定。实验内容：1.常见化脓性细菌形态的观察(示教)；2.葡萄球菌、链球菌培养物的观察(示教)；3.ASO试验(胶乳法操作)；4.脓汁标本的细菌学检验程序及致病性葡萄球菌的分离与鉴定（含标本涂片、革兰氏染色、血浆凝固酶试验等)4.粪便标本细菌学检查目的要求：熟悉肠道杆菌形态与常用的生化反应；熟悉肥达反应的方法、掌握其原理、结果判断、临床意义；掌握粪便中致病性肠道杆菌的分离与鉴定。实验内容：1.肠道杆菌形态观察(示教)；2.肠道杆菌培养物与生化反应结果的观察(示教)；3.肥达反应的方法、原理、结果判断(示教)；4.粪便标本的细菌检验程序及致病性肠道杆菌的分离与鉴定（含SS培养基、EMB培养基生长现象；KIA中生长现象；玻片凝集等）5.弧菌属、厌氧性细菌、白喉棒状杆菌、螺旋体目的要求：掌握弧菌、厌氧菌、白喉杆菌、炭疽杆菌、螺旋体的形态、染色、培养等生物学特性；实验内容：1.弧菌、厌氧菌、白喉杆菌培养物的观察（示教）；2.弧菌、厌氧菌、白喉杆菌、炭疽杆菌、梅毒螺旋体、钩体的形态观察(操作)；3.口腔中奋森氏螺旋体的检查（革兰氏染色法）(操作)6.分枝杆菌属、病毒学、真菌学、实验考核目的要求：掌握分枝杆菌的形态、染色、培养等生物学特性；掌握抗酸染色法的原理、操作方法及临床意义；掌握病原性真菌的形态；熟悉病原性真菌的培养与观察；掌握浅部真菌检查法、墨汁负染色法技术；了解病毒的动物接种、鸡胚接种、PCR技术在病毒性疾病诊断中的应用，实验内容：1.分枝杆菌培养物的观察（示教）；2.抗酸染色法(Acid-faststain)(操作)；3.病原性真菌的培养与观察（示教）；4.浅部真菌检查法(操作)；5.深部真菌——新型隐球菌墨汁负染色法(操作)；6.病毒的动物接种（示教）；7.鸡胚接种（示教）；8.PCR技术在病毒性疾病诊断中的应用（示教）七、基本设备与器材配置序号仪器名称数量序号仪器名称数量1LD4-2低速水平离心机12BCM-1000生物净化工作台13DNP-781电热恒温培养箱14海尔冰箱15DHW-600三用电热恒温水箱16DYY-4电泳仪17DG3022A酶联免疫检测仪18DNX-9620电脑洗板机19奥林巴斯荧光显微镜1101000W电炉111TX-27-3型台式高压蒸汽消毒器112CH-MO45-T生物显微镜313棉质擦镜纸2张14无水酒精10ml15香柏油0.1ml16500ml/瓶生理盐水10ml17500ml/瓶乙酸乙酯1ml1810ml一次性塑料试管1支19水弧菌1株20白色葡萄球菌1株21革兰染色液结晶紫、95%酒精、卢戈碘液、稀释复红各0.2ml22250g/瓶营养琼脂培养基45g23无菌牙签1根24250g/瓶来苏消毒液5ml25细菌形态结构片球菌、杆菌、弧菌、鞭毛、芽孢、荚膜各1片26试管架1个27酒精灯1个28打火机1支29接种环1支3012mm载玻片1片31500ml/瓶络合碘0.1ml32家兔1只33药敏纸片1片34500ml/瓶巴士消毒液10ml35医用棉签1根36过滤器1只37一次性塑胶手套1双3815ml/支玻璃试管1支39直径6cm、4cm、9cm培养皿各1只40人血浆0.1ml41金色葡萄球菌1株42人血清0.1ml43ASO试剂盒1盒44沙门氏伤寒杆菌1株45250g/瓶克氏双糖铁培养基5g46志贺氏痢疾杆菌1株47250g/瓶乳糖5g48埃希氏大肠杆菌1株49250g/瓶葡萄糖5g5010ml/瓶甲型副伤寒“H”抗原10ml5110ml/瓶乙型副伤寒“H”抗原10ml52250g/瓶EMS培养基10g5310ml/瓶沙门氏菌“O”抗原10ml54250g/瓶SS培养基10g5510ml/瓶伤寒杆菌“H”抗原10ml56兔血清1ml57500ml/瓶对甲基氨基酚二甲苯50ml58厌氧培养箱1台5915ml/支玻璃试管1支60牙签1根61破伤风杆菌、产气荚膜杆菌、肉毒杆菌、水弧杆菌、棒状杆菌菌种各1株62破伤风杆菌、产气荚膜杆菌、肉毒杆菌、棒状杆菌染色形态片各1片631400g/包脱脂牛奶1包64250g/瓶凡士林165