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文档简介

生物药物

来源:生物体或生物组织、细胞、体液等抗体类药物抗生素类药物生物药物产品的纯度要求很高，含量要达到95％甚至98％以上生物制药工艺生物制药工艺中，下游的分离纯化尤为重要，分离手段及策略便是关键。要对潜在的工艺相关杂质（如宿主细胞蛋白，宿主细胞DNA，细胞培养残留物，下游工艺的残留物等）进行纯化。Na+Na+Na+SO42-Cl-SO42-胡

斌基础医学院生物制药1013905337@亲和层析技术目录1亲和层析概念3操作方法2亲和层析原理一、亲和层析的概念亲和层析（affinitychromatography，AC）：利用待分离的物质（目的物）与其特异性配基之间特异性的亲和力而进行分离的一类特殊的层析技术。关键点：特异性配基、亲和力亲和力亲和力：生物分子间存在很多特异性的相互作用，如抗原-抗体、酶-底物或抑制剂、激素-受体，它们之间都能够专一而可逆地结合。相关概念流动相基质(载体)配体(基)固定相亲和层析的基本原理亲和的一对分子中的一方以共价键形式与不溶性载体相连作为固定相吸附剂。+当含有混合组分的目的物样品（流动相）通过此固定相时，只有和固定相分子有特异性亲和力的物质（目的物），才能被固定相吸附结合，其他没有亲和力的组分就随流动相流出。亲和层析的基本原理亲和层析的基本原理++洗脱亲和层析的基本原理改变流动相的成分，将结合的目的物洗脱下来。+二、亲和层析操作流程亲和层析一般可分为以下4个操作步骤：平衡样品上柱和清洗洗脱01020304再生国产柱层析系统（一）平衡用平衡缓冲液充分平衡柱体，直至基线平稳（二）样品上柱和冲洗样品上柱过程中，样品流速每小时低于10mL/cm2。上样体积为柱床体积的5%。样品中的目的物与配体选择性的吸附，杂质不被吸附。用上样缓冲液充分冲洗柱体，杂质被冲洗下来，形成杂质峰。（三）

洗脱选择适当洗脱条件，将吸附在配体上的目的物用洗脱缓冲液洗脱（解吸）下来，收集样品。如果目的物中含有较高的离子或者较高的盐浓度时，可采用透析的方法将之除去。（四）

再生用大量的洗脱液或较高浓度的盐溶液洗涤柱体，再用平衡缓冲液重新平衡。如严重的不可逆吸附时，使用高盐浓度的盐溶液、尿素等变性剂或加入适当的非专一性蛋白酶，使树脂恢复到初始状态。亲和层析分离过程示意图视频2小结本节课分别讲述了，在生物制药分离纯化中，亲和层析技术的概念、原理及操作流程。并以胰蛋白酶的纯化为例讲述了亲和层析技术在

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