22《动物细胞工程》(新人教版选修3)(经典动画)课件

动物细胞工程1精选2021版课件单克隆抗体等

动物细胞工程常用的技术动物细胞培养动物细胞核移植动物细胞融合是其他动物细胞工程技术的基础。植物组织培养植物体细胞杂交回顾：植物细胞工程常用的技术手段有哪些？2精选2021版课件动物细胞工程(一).动物细胞培养(三).动物细胞融合(四).单克隆抗体(二).细胞核、胚胎移植3精选2021版课件动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液制成细胞悬液培养瓶中培养部分细胞“癌变”，无限传代动物细胞培养不能最终培养成动物体50代细胞原代培养传代培养细胞贴壁剥离、分瓶细胞株细胞细胞系动物细胞培养过程：增殖能力强，分裂旺盛，分化程度低，容易培养去掉组织间蛋白4精选2021版课件动物细胞培养过程中几个重要的概念（1）细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上（单层）。要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。5精选2021版课件（2）接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。动物细胞培养特点：贴壁生长、接触抑制：6精选2021版课件原代培养(primaryculture)定义：指将要培养的动物细胞取出后，先用胰蛋白酶等使组织分散成单个细胞，然后配制成一定浓度的细胞悬液，再将该悬液放入培养瓶中培养。过程：从动物机体中取出组织

剪碎加胰蛋白酶细胞游离制成细胞悬液将细胞接种到培养瓶内

培养（1--2天换一次培养液）

细胞贴壁生长

长成单层细胞7精选2021版课件定义：当原代培养的细胞生长停止，这时如果要使细胞继续生长，就要及时用胰蛋白酶等，使细胞从瓶壁上解离下来，然后加入新的培养液，将细胞分离稀释，并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内，这个过程称传代培养传代培养(subculture)8精选2021版课件

细胞株：从原代培养细胞群中筛选出进行传代培养的细胞，能传到40-50代，其遗传物质没有发生变化。

细胞系：传到40-50代后有部分细胞遗传物质发生了变化，带有癌变的特点，可能在培养条件下无限制的传代下去，这种传代细胞称为细胞系。细胞株和细胞系的区别：细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。9精选2021版课件细胞悬浮液培养瓶中培养50代细胞无限传代原代培养传代培养细胞株细胞系知识点小结：各个新名词之间的联系多数组织细胞固定在表面生长和分裂。随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖遗传物质改变10精选2021版课件1、无菌、无毒的环境（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）2、营养（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清、微量元素等）3、温度和PH温度36.5+0.5度，pH7.2～7.44、气体环境O2和CO2（95%空气和5%CO2）动物细胞培养条件保证细胞顺利的生长增殖离体培养的细胞对微生物和有毒物质没有防御能力能否用胃蛋白酶代替胰蛋白酶？11精选2021版课件动物细胞培养技术的应用（1）生产蛋白生物制品：病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。（4）用于检测有毒物质（3）获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮。（5）用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据（2）作为基因工程的受体细胞12精选2021版课件获得细胞细胞的全能性细胞株、细胞系植物体培养结果或细胞分泌蛋白快速繁殖、培育无病毒植株等培养目的葡萄糖、动物血清促生长因子蔗糖、植物激素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目6、植物细胞和动物细胞培养的比较13精选2021版课件14精选2021版课件卵细胞C母绵羊子宫Ａ母绵羊Ｂ母绵羊乳腺细胞细胞质细胞核细胞核移植胚胎移植早期胚胎多莉羊分娩卵裂融合后的卵细胞细胞拆合技术妊娠多莉羊的培育过程细胞核移植15精选2021版课件16精选2021版课件17精选2021版课件材料1:1970年，有两位科学家做了一个人—鼠细胞融合的实验，以证明细胞膜的流动性。那么，如何实现人—鼠细胞的融合，动物细胞融合后还有什么用途呢？人-鼠(想像图)18精选2021版课件灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜连接细胞融合，形成杂交细胞（细胞膜具有一定的流动性）19精选2021版课件主要用于制备单克隆抗体获得杂种植株用途物理、化学方法（同左）灭活的病毒物理（离心、振荡、电刺激）化学（聚乙二醇）诱导方法使细胞分散后诱导细胞融合去除细胞壁后诱导原生质体融合细胞融合的方法细胞膜的流动性细胞膜的流动性、植物细胞全能性细胞融合的原理动物细胞融合植物体细胞杂交比较项目比较项目植物、动物细胞融合的比较20精选2021版课件2、诱导动物细胞融合的方法3、动物细胞融合的用途制备单克隆抗体：仙台病毒紫外线丧失感染活性（不感染细胞）保留融合活性（诱导细胞融合）物理法化学法生物法21精选2021版课件思考：（1）请概括单克隆抗体的概念（2）根据阿根廷科学家米尔斯坦和德国科学家柯勒设计的实验方案，思考实验过程与原理？（3）为什么用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合？单克隆抗体制备过程中应用哪些细胞工程技术手段？制备过程为何要经过两次筛选？单克隆抗体提出问题：长期以来，人们为了获得抗体，采用的是把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需抗体的方法。用这种方法获得的抗体，不仅产量低，而且抗体的特异性差，纯度低，反应不够灵敏。22精选2021版课件1.概括单克隆抗体的概念单：单个细胞克隆:无性繁殖抗体:化学性质单一、特异性强23精选2021版课件单克隆抗体的制备24精选2021版课件实验目的:制备单克隆抗体.实验原理：实验材料：小白鼠实验器材：培养皿、针筒等等。实验过程：？2.根据阿根廷科学家米尔斯坦和德国科学家柯勒设计的实验方案，回答下列问题：B淋巴细胞能产生抗体，骨髓瘤细胞能无限增殖，杂交瘤细胞既能产生抗体又能无限增殖。25精选2021版课件单克隆抗体的制备抗原小鼠B淋巴细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞细胞融合，筛选细胞培养筛选，继续培养体外培养体内培养单克隆抗体26精选2021版课件3、单克隆抗体的应用（1）作为诊断试剂——最广泛应用准确、高效、简易、快速（如同位素标记单克隆抗体，可诊断肿瘤、心血管畸形等）27精选2021版课件（2）运载药物生物导弹=单克隆抗体+药物，治疗肿瘤）(“生物导弹”—单抗导向，药物为弹头)28精选2021版课件有梦想，才会有创造！已成功的动物细胞融合实例有很多，如人—小鼠、人—兔、人—鸡、鼠—兔、鸡—鼠等上百种融合细胞。甚至已成功完成了酵母菌—鸡、人—胡萝卜等细胞的融合。