微生物曲霉菌属课件

四、曲霉菌属

曲霉菌属（Aspcrgillus）是丝孢目丛梗科的真菌。

分布：广泛，有些菌种可在食品、储粮和动物饲料中生长。

危害：引起粮食等的霉坏，而且还产生霉素，对人畜健康造成很大威胁。概况概况菌丝分支分隔，接触培养基的菌丝分化出足细胞，其上生出直立的分生孢子柄，顶端膨大成球形顶囊，在顶囊处以辐射方式生出杆状小梗（一排或两排），顶端产生一连串分生孢子。

分生孢子柄、顶囊、小梗和分生孢子合成孢子头，可用于产生淀粉酶、蛋白酶和磷酸二酯酶等，也是酿造工业中的常见菌种。分生孢子为单细胞，有黑、黄、白、绿等多种不同颜色，是鉴别不同菌种的依据。米曲霉、酱油曲霉是常用发酵菌种。黄曲霉、烟曲霉菌是常见禽畜致病菌。黄曲霉菌也是地球的早期生命。概况黄曲霉菌

分布广泛，常生长于花生仁及玉米、花生饼、棉籽饼和秸秆等饲料上，还可以在各种食物及肉类制品上生长繁殖，并产生黄曲霉素散入各基质中，引起人畜中毒。黄曲霉毒素是由黄曲霉和寄生曲霉产生的杂环化合物，它的代谢产物主要有B1、B2、G1、G2、M1和M2等类型。显微镜下的黄曲霉黄曲霉菌1.形态特征分生孢子梗多从基质部生出，长度小于1mm,壁厚无色粗糙。顶囊早起较长，晚期呈烧瓶形或近似球形，直径10~65mm。顶囊上产生小梗（单层或双层），小梗顶端着生分生孢子，孢子呈球形、近似橘形。2.培养特征可以培养于沙氏培养基、2%麦芽糖及7.5%氯化钠琼脂培养基上。生长温度为28~30°C，相对湿度在80%以上。菌落生长较快。呈扁平状，也有褶皱呈脑回状。最初带黄色，后变黄绿色，老龄菌落呈暗色，反面带褐色或无色。成份：蛋白胨、水、琼脂、葡萄糖或麦芽糖制法：将上述物质称好，放入水中煮沸溶解分装包扎，高压后凝固备用。用途：作分离培养霉菌用。注意：1接种临床新鲜标本可先加1-2滴70%酒精让干后再接种于含12．5%氯霉素沙氏斜面培养基上。

实验室条件下接种黄曲霉菌3.致病性黄曲霉菌的致病性主要是其所产生的毒素。在各类黄曲霉毒素中，黄曲霉毒素Ｂ1的毒性最大，其次是M1、G1、M2、B2和G2。因此，许多国家规定了黄曲霉毒素在食品中的极限值，即食品中的黄曲霉毒素含量不允许超过此值。黄曲霉菌的毒性极强，远远高于氰化物、砷化物和有机农药的毒性，其中以B1毒性最大。当人摄入量大时，可发生急性中毒，出现急性肝炎、出血性坏死、肝细胞脂肪变性和胆管增生。当微量持续摄人，可造成慢性中毒，生长障碍，引起纤维性病变，致使纤维组织增生。AFT的致癌力也居首位，是目前已知最强致癌物之一。B1毒性分类黄曲霉毒素是一种强烈的肝脏毒，可使牛、猪、马、鸡、鸭、绵羊等多种动物发生霉菌毒素中毒。4.感染途径散布在空气中的分生孢子在有利的条件下菌丝本身也可伸长增殖。菌丝形成隔壁即可产生两个独立的细胞。此外称做子囊孢子的有性孢子也具有增殖的能力。可引起以肺为主的多个脏器的非坏死性肉芽肿性病变。在病变部位可见大量的嗜中性粒细胞浸润，其中可见呈Y字型分歧的有隔壁的菌丝。分为化学方法（薄层层析）、生物学方法和免疫学方法三大类。

5.微生物学诊断1、生物学方法

1）抑菌试验黄曲霉菌有抑制某些微生物生长的作用，故用其抑菌作用来测定黄曲霉菌的存在和含量。已经发现巨大芽胞杆菌和短芽胞杆菌对AFT最敏感。通过平皿中抑菌圈大小来衡量黄曲霉菌含量。

2）荧光测定法根据黄曲霉菌在紫外光照射下可发出荧光的原理，将待检菌株接种于培养基中，28—30~C培养48～72小时，产生的毒素便浸入培养基中，在紫外灯光下照射培养基会呈现出特异的荧光。此法操作简便。对AFT最低检出量为5pg／ml。·3）大白鼠试验法黄曲霉菌对大白鼠毒性最早出现损害的是肝脏，其受损范围广，而幼鼠最敏感，雄性幼鼠比雌性幼鼠敏感性更高，用100－150g大白鼠作急性中毒试验，一般3—4天死亡。4）鸡胚试验5）鸭雏试验鸭雏对黄曲霉菌非常敏感，致死性强，一般用一次剂量后72小时内死亡。

6）斑点试验本法用于检测真菌毒素致突变试验的一种有意义的方法。主要利用沙门氏菌/微粒体突变性来检测某些样品种AFT的存在与含量。

A先将鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型变种的菌悬液，与一定量肝组织匀浆混合作倾注平板。

B待凝固后，再将一定量被检物(含AFT)加在平板中央待黄曲霉菌往外围琼脂中扩散时，围绕中心点将出现密布的回复突变的菌落。本法作为一种生物学检验法广泛应用于开发安全、有用的化学物质和检测食品或农产品中黄曲霉菌。2．免疫学方法

黄曲霉菌是分子量为312～346的二氢呋喃香豆素的衍生物，无免疫原性，不能引起抗体的产生，故必须与大分子化学基团或蛋白质偶联，成为完全抗原，方能引起免疫动物的抗体形成，然后利用血清学方法检测AFT由于黄曲霉菌的量一般都较低，因此，检测方法主要是敏感性较高的放射免疫测定法(RIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)。烟曲霉菌可使鸡鸭鹅鸽及鹦鹉发生曲霉菌病或霉菌性肺炎。也可在发霉的饲料中产生毒素，一起家畜中毒。是曲霉菌属中致病性最强。烟曲霉菌烟曲霉菌分生子孢头1.形态特征孢子为圆形，呈蓝绿色，直径2.5~3.5um,呈连珠状排列。分生孢子柄长250~300um，分布在有隔板的纵横交织的气声菌丝上。2.培养基特征在沙氏培养基上初形成白色、圆形、绒毛状菌落，最后变成深绿色或者灰绿色。3.致病性

可使鸡鸭鹅等曲霉菌病或霉菌性肺炎，在幼禽多呈急性经过；哺乳动物及人也可感染。在感染组织的过程中，还可产生