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文档简介

大肠菌群测定GB

14934-94食（饮）具消毒卫生标准GB

4789.3-2010食品安全国标-食品微生物学检验大肠菌群计数2015.5.18课程目的：掌握食（饮）具中大肠菌群的卫生学意义；掌握国家标准食（饮）具中微生物学的检验方法。。概念及卫生学意义

大肠菌群：指一群能在36℃、24小时内发酵乳糖产酸产气需氧、兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。

它们主要来源于人和温血肠道，作为食品受粪便污染的指标。食品检测中大肠菌群计数是一项常规检测项目。。概念及卫生学意义由于大肠菌群在人、畜粪便中数量巨大,检测方法较为简单且检出概率高,对各种物理化学因子的抵抗力与肠道致病菌相当,所以被作为粪便污染的指示菌。作为粪便污染食品或食具的指示菌；作为肠道致病菌污染食品或食具的指示菌；。大肠菌群MPN计数法、大肠菌群平板计数法大肠杆菌测试片快速测定GB

14934-94食（饮）具消毒卫生标准GB

4789.3-2010食品微生物学检验大肠菌群计数大肠菌群检验方法大肠杆菌测试片肠出血性大肠杆菌O157:H7是一种新出现的食物传播性疾病的病因。它除引起腹泻、出血性肠炎外，还可发生溶血性尿毒综合症、血栓性血小板减少性紫癜等严重的并发症。大肠杆菌O157测试片（BO204）运用微生物测试片专有技术，做成一次性快速检验产品，一步培养15～24h就可确认，大大地简化了检测程序，广泛应用于检验部门和食品企业使用。试剂与器材10ml试管若干灭菌棉签灭菌生理盐水刻度吸管或1ml枪及枪头大肠杆菌测试片高压蒸汽灭菌锅恒温培养箱酒精灯、打火机、95%酒精，75%酒精样品处理：取样品25mL（g）放入含有225mL灭菌生理盐水的取样罐或均质杯内，制成1:10的样品匀液。接种：将大肠杆菌O157测试片（BO204）置于平坦

实验台面，揭开上层膜，用无菌枪头吸取1mL样品匀

液慢慢均匀地滴加到纸片上，然后再将上层膜缓慢盖下，静置10s使培养基凝固，最后用手轻轻地压一下，每个样品接种两片。测定方法培养方法：将上述制得测试片叠在一起放回原自封袋中，透明面朝上水平置于恒温培养箱内，堆叠片数不

超过12片。培养温度为36℃±1℃，培养15～24h。结果：对测试片进行观察，呈紫红色的菌落为大肠杆菌O157:H7；呈蓝色的菌落为其他大肠菌群。出现阳性菌落的样本，最好用其他更为可靠的方法进行验证，没有条件的至少要再取样重复检验一次。测定方法结果表要求结果采用物GB

1493理或化学消毒食（饮）具必须达到下4-94食（饮）具消毒卫生标准75%消毒喷洒桌面，点燃酒精灯无菌操作阴性对照：取1ml灭菌生理盐水滴加到纸片，每组2个湿润棉球擦拭食具，将棉球浸入10ml生理盐水试管内震荡，1min取原液1ml注入含有9mL生理盐水试管内震荡摇匀逐级稀释，配制成1:1，1:10,1:100，1:1000,1:100005个稀释度取1ml滴加到已标记纸片，静置5min，装袋置于培养箱36℃±1℃，15～2

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