大肠菌群计数检验的

大肠菌群计数检验

大肠菌群是指一群在37°C培养24小时能分解乳糖产酸产气、需氧及兼E性va厌lu氧a的ti革on兰o氏nl阴y.性无芽孢杆菌。ed•w作it为h

粪As便po污se染.指S指l标id，es有f广or泛.的NE卫T生3.学5意Cl义ient

Profi食品中C大op肠yr菌i群g群h数t

系2系0以04每-210010g1（As或pmoLs）e

检Pt样y

内Lt大d.肠菌群最可能数（themost

probablenumber-简称MPN）表示。旧国家标准Evaluation

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Ltd.第一法大肠菌群MPN计数法Evaluation

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Ltd.第二法大肠菌群平板计数法Evaluation

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Ltd.第一天第1、3、5、7小组：

使用第一法（附带做第二法中，两个平板接种），E以va自lu来a水ti为on样o品nl。y.ed

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Ltd.第2、4、6小组：

使用第二法（附带做第一法中，3个试管初发酵试验），以污水为样品。第一法：检样稀释与初发酵试验

MPN：表示食品中大肠菌群数是以每100ML或克检样内大肠菌群最大可能数。一般采用9管法.一般样品25ML（克）+225ML生理盐水=1：10，从

从10-2取样1ML+9

ML生理盐水=1：1000，从10-3取样1ML，接种到3管LST中。Evaluation

only.ed1w0i-1t取h样As1pMoLs，e接.S种li到de3s管fLoSrT（.N月E桂T桂3基.硫5硫C酸l盐i盐e胰nt蛋P白rofi胨肉汤）C中op。yright

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从10-1取样1ML+9

ML生理盐水=1：100，从10-2取样

1ML，接种到3管LST中。第二法：检样稀释与平板计数检样稀释：同上。平板计数：1、每个稀释度接种Ev2a个lu无at菌io平n

o皿nl，y.每皿1mL稀ed

w释it样h

A品sp，os另e.外Sl一id个es平f皿or加.N1EmTL生3.理5

C盐li水en作t

空Profi白对照Co。pyright

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Ltd.2、及时将15—20mLVRBA（结晶紫中性红胆盐琼脂）倾注每个平皿中。3、待琼脂凝固后，再加3—4mLVRBA覆盖表层。翻转平板培养。第二天第一法

复发酵试验Evaluation

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用A用sp接os种e.环Sl从ide产s

气for的.LNSESTT肉3.汤5汤C管li中ent分P别rofi取培养Co物pyr1i环gh，t

2移00种4-于20煌1煌1

绿As乳pos糖e

胆Pty盐L肉td.汤（BGLB）管中，36℃±1℃培养48h±2h，观察产气情况。产气者，计为大肠菌群阳性管。第二法

平板菌落数的选择与证实试验平板菌落数的选择选取菌落数在15CFU～150CFU

之间的平板，分别计数平板上出现的典型和可疑大肠菌群菌落。典型菌落为紫红色，菌落周围Ev有al红ua色t的i的o胆n

盐o盐n沉ly淀.

环，菌落直径ed

w为i0t.h5Ammsmp或os更e.大Sl。ides

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Profi证实试验Copyright

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Ltd.从VRBA

平板上挑取10个不同类型的典型和可疑菌落，分别移种于BGLB

肉汤管内，36

℃±1

℃培养24

h～48

h，观察产气情况。凡BGLB

肉汤管产气，即可报告为大肠菌群阳性。（2）原理胆盐可以抑制其它细菌生长繁殖。分解乳糖产酸产气的大肠菌群，看小倒管中的气体。

溴甲酚紫，中性时呈蓝紫色，酸性时呈黄色，如果颜色不变（呈蓝紫色），说明无产酸的大肠菌群；如果颜色变黄色，E说va明l可ua能ti出on现o能nl分y解.乳糖产酸的ed

w大it肠h菌As群po。se.Slides

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Ltd.21 产气不产气杜氏发酵管产气情况Evaluation

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Ltd.Evaluation

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Ltd.第四天：大肠菌群计数报告第一法：确证大肠菌E群vaLlSuTa阳ti性on管o数nl，y.检索ed

wiMtPhNA表sp（os见e.附Sl录id）es，f报o报r告.N每ETg（3（.m5mLC）li样ent

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Ltd.品中大肠菌群的MPN值。第二法：经最后证实为大肠菌群阳性的试管比例乘以结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）中计数的平板菌落数，再乘以稀释倍数，E即va为l每uagt（iomnL）on样ly品.中大肠菌群数ed

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Profi例：10C-4o样py品ri