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文档简介

实验三、颗粒原种的制备与转接1.了解原种常用培养基的种类2.掌握食用菌原种培养基的配制方法及消毒灭菌方法3.熟练原种的转接技术一、实验目的1、材料：母种：平菇、杏鲍菇；粮食颗粒：小麦；碳酸钙2.工具：超净工作台、酒精灯、75%酒精棉球、接种铲、三角瓶、棉花、报纸、高压灭菌锅、托盘天平、培养箱二、实验材料

原种的生产是由母种移接入原种培养基，经培养而成，原种也称二级种。生产程序是：培养基的配制→分装→灭菌→接种→适温培养。三、实验内容与方法1、常用配方

（1）小麦99%、轻质碳酸钙1%

（2）高粱80%、小米19%、轻质碳酸钙1%（一）培养基的配制2、培养基的配制（1）粮食颗粒应筛选干净；（2）清水浸泡12小时，低温季节浸泡时间长些，高温季节浸泡时间短些，但要换水数次；（3）放入水中煮约20分钟（理论值），一般以籽粒充分吸水，内部没有白芯而表皮又不破胀为度；（4）捞出，滤去多余水分，拌入轻质碳酸钙；（5）搅拌均匀、摊开、风干颗粒表面水膜。

菌种瓶一般装量上端距瓶口50毫米，可以有效减少培养期的污染和避免上部菌种的老化。

三角瓶一般装量不超过半瓶，以便在菌丝萌发之后可以通过拉抖动增快菌丝的生长速度。

（二）分装将栽培料袋放高压灭菌锅或常压灭菌锅中进行灭菌。若采用高压蒸汽灭菌，则标准为1.5kg/cm2（0.15MPa），126～128℃,1.5h～2h。如果采用常压蒸汽灭菌，则标准为100℃下8～10h。（三）灭菌一般灭过菌的培养基应放在较洁净的室内（也可放无菌室或超净工作台中）冷却至30℃左右方可接种。（四）冷却1．将已灭菌的培养料瓶移入事先消毒过的超净工作台内，紫外灭菌20～30min。2.母种管、用具及手要进行酒精消毒。（五）接种3.等培养料温降至30℃左右时，按无菌操作方法进行接种，用接种铲取菌种一块放入种瓶内培养料的孔隙边，并使菌丝紧贴在培养料上，塞上硅胶塞，贴上标签，注明菌种名称和接种日期。接种后，将种瓶置于20℃生化培养箱中培养。培养期间进行定期检查，淘汰污染种瓶。一般两周左右菌丝可长满菌种瓶。培养成的原种菌丝浓白健壮，菌丝紧贴瓶壁不干缩，生命力强，具有一定清香味，无任何杂菌污染。（六）适温培

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