06-2023年中国药科大学考研微生物复试试题

06年微生物复试试题一,名词解释(3分,30分)1,芽孢某些细菌，特别是G+杆菌，生长到肯定阶段，在细胞内形成一个圆形或椭圆形的、折光性强的特别构造称为芽孢。2,外毒素,内毒素,类毒素外毒素—细菌细胞在生长生殖过程中分泌到胞外培育液中的毒性蛋白，主要由G+细菌产生。内毒素是G-细菌细胞壁成分中的脂多糖，细菌自溶或裂解后，脂多糖释放出来。类毒素一些经变性或经毒性抗原性的毒素。3,广谱抗生素抗菌，不仅能强力抑制大局部革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌、螺旋体和某些原虫4,TD-Ag 胸腺依靠性抗原——在刺激 B细胞产生抗体时需要 T细胞的关心，所以称为 TD-Ag 。〔分子量大，外表多重抗原打算簇、可诱生多类 Ig、可诱发体液和细胞免疫、课引起记忆反响。〕5,肿瘤特异性抗原 癌细胞形成与正常细胞不同的特有物质时 ,则该物质称为肿瘤特异性抗原(TSA)。是指一种肿瘤细胞特有的，不存在于正常组织细胞上的抗原。6,膜攻击复合体,T关心细胞、菌落 细胞受固体培育基外表或深层的限制故不能像在液体培育基中那样自由集中，因此生殖的菌体常聚拢在一起，形成了肉眼可见的细胞集落。9、转化〔transformation〕是某一基因型的细胞从四周介质中吸取来自另一基因型的细胞的 DNA而使它的基因型和表型发生相应变化的现象。10,8分,共40分)1,简述并图示霉菌的生活史孢子开头，经过发芽、生长成为菌丝体，再由菌丝体经过无性和有性生殖最终又产生孢子。2,配制培育基时应留意哪些根本原则?1、选择适宜的养分物质以满足微生物的养分需要2、掌握养分物质的浓度并留意各养分物的比例3、调整微生物生长所需的适宜PH4、灭菌处理并维持无菌状态。3,质粒有哪些根本特性?DNA分子，有超螺旋和开环式。质粒的根本特征：①能自主复制②不相容性③所携带基因不是细胞生长所必需的④能以宿主细胞自发消退⑤可以从一个细菌转到另一个细菌。4,机体的抗病毒免疫有哪些方面?抗病毒免疫病毒突破人体第一道防线后，干扰素和自然杀伤细胞〔NK细胞〕在其次道防线中占重要地位。病毒进入机体后，能刺激人体的巨噬细胞、淋巴细胞以及体细胞产生干扰素。干扰素具有广谱抗病毒作用，NK细胞是淋巴细胞中除T细胞、B细胞外的另一类细胞，它们占淋巴细胞总数的5-10%，一刻不停地在血循环中担当着“巡逻”任务。一旦觉察NK细胞攻击范围之内。病毒逃脱了其次道防线抵挡后，就面临第三道防线。这就是特异性体液免疫和细胞免疫。它们在对抗病毒感染中各有特定作用。特异性抗体可以中和存在于宿主细胞外的病毒。抗体与病毒结合后，病毒就不能与易感染细胞外表的相应受体结合而进入细胞，并且随后这些抗体和病毒的结合物就被吞噬细胞吞噬降解。对已进CD8CTL细胞完成去除任务。CTL细胞破坏“藏”CTLCTL细胞放出穿孔素、粒酶等生物活性物质，再后CTL细胞离开，最终病毒感染细胞裂开死亡，释出的病毒则可被特异性抗体中和消灭。攻击被病靖腥鞠赴腃TL细胞离开后，还能以同样方式屡次攻击其他感染细胞5,简述Ames试验的根本原理及方法.鼠伤寒沙门氏菌〔Salmonellatyphimurium〕的组氨酸养分缺陷型〔his－〕菌株，在含微量组氨酸的培育基中，除极少数自发回复突变的细胞外，一般只能分裂几次，形成在显微镜下才能见到的微菌落。受诱变剂作用后，大量细胞发生回复突变，自行合成组氨酸，发育成肉眼可见的菌落。某些化学物质需经代谢活化才有致变作用，在测试系统中参加哺乳动物微粒体酶①，可弥补体外试验缺乏代谢活化系统之缺乏。鉴于化学物质的致突变作用与致癌作用之间亲热相关，故此法现广泛应用于致癌物的筛选。斑点试验吸取测试菌增菌培育后的菌液0.1ml，注入溶化并保温45℃左右的上层软琼脂中，需S9活化的再加0.3ml－0.4mlS9mix，马上混匀，倾于底平板上，铺平冷凝。用灭菌尖头镊夹灭菌圆滤纸片边缘，纸片浸湿受试物溶液，或直接取固态受试物，贴放于上层培育基的外表。同时做溶剂比照和阳性比照，分别贴放于平板上相应位置。平皿倒置于37℃温箱培育48h。在纸片外围长出密集菌落圈，为阳性；菌落散布，密度与自发回变相像，为阴性。．平板掺入试验将肯定量样液和0.1ml测试菌液均参加上层软琼脂中，需代谢活化的再加0.3ml－0.4mlS9mix34个～5个剂量。选择剂量范围开头应大些，有阳性或可疑阳性结果时，再在较窄的剂量范围内确定剂量反响关系。M〕M值且有剂量-反响关系，背景正常，则判为致突变阳性。80分)1、试验证明细菌对青霉素的耐药性，如何证明耐药性是由质粒介导的？,(10分)利用溶菌酶和外表活性剂作用,破坏细胞壁中的糖肽层,同时使细胞膜崩解,此时细菌的染色体可以形成卷曲状折叠构造,附着在细胞膜碎片上,随后经过沸水浴快速作用,是蛋白快速凝固将染色体包裹,离心除去,质粒DNA存在于上清中,参加无水乙醇,在-20℃放置30min,析出.琼脂糖凝胶电泳,确定质粒DNA.取一斜面菌,培育过夜,取0.5ml到颖M9培育基,培育2h,离心,冷的灭菌生理盐水洗涤,沉淀加GaCl2制得感受态菌液,取0.1ml参加0.1ml已稀释的DNA,冰浴30min.随即放入42℃水4min,冰浴1h,参加2VM9培育液,37表达2h,适当稀释,取0.1ml涂布于含氨苄青霉素和四环素的完全固体培育基上.同时取不加DNA的菌液及DNA,在相应的平板上比照,37培育。感受态菌假设生长良好，表示质粒DNA上有耐药性基因。2、何为MHC的多态性?试简述MHC多态性与抗原提呈的关系.(10分)3用的时拉丁文)(15分)4、如何进展灭菌抗生素中的微生物检查?(15分)菌。包括①直接接种法和②膜过滤法。①取该品种正文最大规格量的供试品不少于2瓶。原料药按制剂规格项下，取最大规格量2份，分别参加足够使抗生素灭活的无菌的酶溶液，如青霉素可用青霉素酶处理，摇匀，分别等量接种于每管装有量40ml的需气菌、厌气菌，真菌培育基中，再做好阳性比照。培育。观看是否有菌生长。② 取该品种正文最大规格量的供试品不少于2瓶，原料药按制剂规格项下，取最大规格量2份，分别按0.9%灭菌NaCl溶液至少100ml或其他适宜溶剂中，摇匀，以无菌操作装入装有直径约50mm，孔径不大于0.45+0.02μm微孔滤膜的薄膜过滤器内,减压抽干后,用0.9%灭菌NaCl溶液至少100ml或其他适宜溶剂冲洗滤膜3次,取出滤膜,分成4片,分别放在需气菌、厌气菌，真菌培育基中,还有阳性和阴性比照.5、InfluentialvirusH5N1型病毒的致病性与免疫性如何?并说明如何制备其灭活疫苗?(30分)80-120nmRNA-DNA和蛋白质组成的核糖核酸，分8个片断；包膜：具脂质双层的包膜，上有血凝素〔hemagglutinin，HA〕和神经氨酸酶〔neuraminidase，NA〕等包膜子粒；负链H5N12023年复试微生物学与生物技术12道名解〔60〕和6道大题〔90〕150分〔记一个算一个〕五个拉丁文写菌名〔酿酒酵母枯草肺炎链球金黄色葡萄球还一个不会〕外毒素内毒素类毒素〔两年都考了〕外毒素—细菌细胞在生长生殖过程中分泌到胞外培育液中的毒性蛋白，主要由G+细菌产生。内毒素是G-细菌细胞壁成分中的脂多糖，细菌自溶或裂解后，脂多糖释放出来。类毒素一些经变性或经毒性抗原性的毒素。CPE〔细胞病变效应〕表位ATCC 美国标准菌种保藏所CFUcolonyformineunit ,菌落形成单位，将稀释后的肯定量的菌液通过浇注或涂布的方法，让其内的微生物单细胞一一分散在琼脂平板上，待培育后，每一活细胞就形成一个菌落。5.TSA——肿瘤特异性抗原 肿瘤细胞特有的或只存在于某种肿瘤细胞不表达的抗原。TD-Ag 胸腺依靠性抗原——在刺激 B细胞产生抗体时需要T细胞的关心，所以称为TD-Ag 〔分子量大，外表多重抗原打算簇、可诱生多类 Ig、可诱发体液和细胞免疫、课引起记忆反响。〕NA神经氨酸酶位于病毒体包膜上的糖蛋白，以疏水末端插入脂质双层，抗原性不稳定，易发生变异，与HA一起时甲型流感v分亚型的依据。主要功能：1.参与病毒释放。2.促进病毒集中〔破坏细胞膜上的受体〕。3.NA的相应抗体不能中和v的感染，但能抑制酶的水解。HA血凝素呈柱状，能与人、鸟、猪豚鼠等动物红细胞外表的受体相结合引起凝血，故而被称作血凝素。考斯克隆限制酶很多细菌用切割外来DNA的方法进展自我保护，如切割感染性噬菌体的 DNA。这些细菌产生一种能切割DNA的核酸内切酶，一旦觉察外来DNA便将其切割，因此它们有效地限制了噬菌体对细菌的感染，故这种核酸内切酶被称为限制酶。〔凡能识别并切割双螺旋DNA分子内特定核苷酸挨次的酶统称为限制酶。〕微载体培育微载体以细小的颗粒作为细胞载体，通过搅拌悬浮在培育液内，使细胞在载体外表生殖成单层的一种细胞培育技术。固定化生长态细胞所谓固定化细胞技术，就是将具有肯定生理功能的生物细胞，例如微生物细胞、植物细胞或动物细胞等，用肯定的方法将其固定，作为固体生物催化剂而加以利用的一门技术。固定化细胞与固定化酶技术一起组成了现代的固定化生物催化剂技术。10，11.12感受态细;competentcell：理化方法诱导细胞，使其处于最适摄取和容纳外来 DNA的生理状态同步生长一步生长、二次生长大肠杆菌在含乳糖和葡萄糖的培育基中，优先利用葡萄糖，并只有当葡萄糖耗尽后才开头利用乳糖，这就形成了在两个对数生长期中间的其次个延迟期，即消灭了“二次生长”现象。转基因动物 一种生物〔通常是老鼠，将外来基因转入其体内成为其基因组的一局部。引入的基因先被分别出来并设计使其携带适当片段。然后将这段基因注入 受精卵，对一只雌老鼠注射激素使其产这些卵被移植入另一个雌性体内，在那里它们发育成型。在某些卵里基因物质在随便位点与染色体整合而成为老鼠细胞的遗传物质。由这种卵发育成的动物将携带该基因从而成为转基因动物。 〔将体外构建的DNA分子通过显微注射、病毒载体转移、或转胚胎干细胞等方法注入动物细胞的受精卵或着床前的胚胎细胞，然后将此受精卵或胚胎再植入受体动物的输卵管或子宫中，使其发育成携带外源基因的转基因动物。〕大题：酵母的细胞水平分类菌落特征生活史〔图示〕细胞构造作为工程菌如何培育菌落外表潮湿、光滑，一般较粘稠，易被挑起。一般为圆形，呈乳白色或乳黄色。细胞构造：细胞壁，细胞膜，线粒体，内质网，液泡，细胞核HBV〔图示病毒构造并说明〕的形态生物学特征基因工程方法制造HBV疫苗和其致敏机理电镜下呈3种颗粒，①球状，直径约42nm，是完整的HBV颗粒；②小球形颗粒，直径约22nm，仅由HBsAg组成，不含DNA，无感染性；③管形颗粒，聚合的小球形颗粒。〔2〕核心：dsDN，3200bp，一长一短，长为+DN，短为-DN环状DNA，诱导酶产生的机制诱导物作用机制〔图示〕〔估量用基因调控答复吧〕生物技术药物的种类定义。目前我国批准上市的此类药物举例说明现代生物学进展及其与相关学科交差融和的产物，其核心是以DNA重组技术为中心的基因工程，还包括诊断、治疗的药品。主要是重组蛋白质药物〔有IFNα，白介素EP体药物〔抗EGFR人源化单抗，重组可溶性受体和黏附分子药物Anti-CD3鼠源单抗、反义寡核苷酸药物、疫苗〔乙肝疫苗，霍乱疫苗〕分子筛亲和离子交换三种层析方法定义比较具体蛋白质样品如何选择此类方法分子筛将样品混合物通过肯定孔径的凝胶固定相，由于各组分经体积的差异，使不同分子量的组分得以分别的层析方法。依据生物分子的大小来实现蛋白分别纯化。用于脱盐、分级分别及分子量的〔分别蛋白质的分子量范围广，不与溶质发生作用，凝胶可以反复使用〕亲和层析是利用生物体中大多数大分子物质具有与某些相应的分子专一性可逆结合的特性而建立的分别纯化技术。适用于成分简单且杂质含量远大于目标物的混合物中提取目标物，还可以依据其生物功能将有活性与无活性的目标物分开。 (大多使用于酶与激活剂、抑制剂、底物之间的契合，抗原和抗体之间的特异性结合，激素和激素受体之间的相互作用。 )离子交换法是利用溶液中各种带电粒子与离子交换剂之间结合力的差异进展物质分别的操作 方法。要进展吸附必需使目的物粒子具有较强的结合力，而其他粒子没有结合力或者结合力弱。区分率高、容量大、操作简洁。基因的获得方法，其特点比较〔从目的基因猎取方面答复 如PCR化学合成两种文库AA序列反推DNAshuffing等〕化学合成法PCR法依据生物体内DNA复制原理在DNA聚合酶催化和dNTP参与下，引物依靠DNA模板特异性的扩DNA。可以在体外特异性的扩增目的基因片段，并可以在设计引物时引入适宜的酶切位点和标签构造。基因文库法基因文库指某一特定生物体全部基因组的克隆集合，包括全部外显子和内含子序列。具体鸟枪法，将生物体全部基因组通过酶切分成不同的DNA片段，与载体连接构建重组子，转化宿主细胞，从而形成生物体的全部基因组DNA片段克隆。cDNA法提取生物体总mRNAmRNA作为模板，反转录酶催化合成cDNAcDNA都克隆至宿主细胞而构建cDNA文库。08年试题：具体参见帖子：“:///bbs/viewthread.php?tid=22959&extra=%3D2“:///bbs/viewthread.php?tid=22959&extra=%3D2依据以往学长的传统将微生物与生化药学的试题复述出来以供下一届参考一名词解释〔14*7=98分〕1T4噬菌体的构造填空：共五个，书上有的头部，尾领，尾鞘，尾髓，尾丝，尾板，尾刺写出酿酒酵母和金葡菌〔拉丁文〕的属名和中文名芽孢的定义和芽孢抗性的缘由DPA盐，增加耐热性。G+菌和G-菌的细胞壁构造啤酒酵母的培育方法基因文库基因文库指某一特定生物体全部基因组的克隆集合，包括全部外显子和内含子序列。抗体库技术7MHC多态性的定义及其和抗原呈提的关系8多克隆位点质粒载体中由多个限制性内切酶识别序列排列形成的序列称之为多克隆位点。10固定化细胞11、微囊化包埋法12、抗体库技术13、生物药物’生物技术药物14、插入失活效应二、二简答题〔13*4=52〕末端代谢产物阻遏的分子机制和其应用由于某种代谢途径末端产物的过量积存而引起酶合成的阻遏称为末端代谢产物阻遏。通常发生在合成代谢中，特别是在氨基酸、核苷酸和维生素的合成途径中格外常见。共酶收到全局部支途径末端产物的共同阻遏。在大肠杆菌培育基中参加精氨酸，将阻遏精氨酸合成酶系。物以合成了足量的产物，或外界参加该物质后，就停顿有关酶