双萤光素酶报告基因技术课件

双萤光素酶报告基因技术21、静念园林好，人间良可辞。22、步步寻往迹，有处特依依。23、望云惭高鸟，临木愧游鱼。24、结庐在人境，而无车马喧；问君何能尔？心远地自偏。25、人生归有道，衣食固其端。双萤光素酶报告基因技术双萤光素酶报告基因技术21、静念园林好，人间良可辞。22、步步寻往迹，有处特依依。23、望云惭高鸟，临木愧游鱼。24、结庐在人境，而无车马喧；问君何能尔？心远地自偏。25、人生归有道，衣食固其端。ReportSmartly萤光素酶报告基因技术Promega自然界的萤光发光真菌发光节虫6令发光海星发光甲壳虫象感ReportSmartly萤光素酶报告基因技术Promega自然界的萤光发光真菌发光节虫6令发光海星发光甲壳虫象感自然界的萤光自然界的萤光萤火虫报告基因的作用细胞信号转导途径启动子/增强子受体结合病毒/细胞相互作用转录因子药物诱导作用或”效果LuminescencevsFluorescence荧光FluorescenceFire萤光LuminescenceWorm萤光荧光(Bioluminescence(Fluorescence)口是化学发光(Chemilumi-nescence)口吸收来自光源的光,再发射的一种,激发能量来自化学反应另一光子口萤光发光计(Luminometer)口荧光计(Fluorometer)液闪仪(ScintilationCounter)荧光显微镜电荷耦合装置光学成像系统(CCDopiticalimagingsystem各种报告基因的优点和缺点报告基因优点萤光素酶优越的灵敏度·需要底物高信号值无内源活性灵敏度好细菌,血清等内源活性高需要底物GUS(葡糖醛酸糖·灵敏度好90%的Ecol,人/动物细胞中苷酶)植物中内源活性低有内源活性酶的扩散可引起“过度报告需要底物SEAP(分泌性碱·分泌性报告基因(不需裂·在HeLa,癌和其它细胞类型性磷酸酶)中有高的内源活性需要底物CAT(氯霉素转乙真核细胞没有背景表达·放射性的酰基酶)易于使用灵敏度底设备现成(液闪仪层析)·50h半衰期GFP(绿色荧光蛋·显微镜:亚细胞定位背景可能高白不需底物折叠“情形”可导致信号差别萤光素酶报告基因的主要优点非放射性检测快(比cAT等)灵敏度高(可比CAT检测灵敏度高100倍)半衰期短(在理想条件下,可检测到10-20摩尔的萤光素酶分子。在哺乳动物细胞中半衰期3小时,在植物细胞中半衰期35小时。而CAT在哺乳动物细胞中的半衰期约50小时)线形范围广(在10-16M(10pgL)至108M(1mg/L)范围内,光强度与萤光素酶浓度成正比般比显微镜检测的荧光更灵敏(对多孔板而言)生物萤光比荧光更稳定,因为自然界进化的酶能保护光子发射器通过基因工程可以延伸生物萤光的性能和能力萤光素酶报告基因的使用原理制备含有lc/Ruc的DNA。调节序列}提供刺激测量萤光56、书不仅是生活，而且是现在、过去和未来文化生活的源泉。——库法耶夫

57、生命不可能有两次，但许多人连一次也不善于度过。——吕凯特

58、问渠哪得清如许，为有源头活水来。——朱熹

59、我的