血细胞分析仪复检标准的探讨

血细胞分析仪复检标准的探讨血细胞分析仪的工作原理三分群血细胞分析仪

当细胞快速流经小孔时，由于细胞是不良导体，小孔电阻R加大，相当于小孔的横截面积a减少，在电流恒定的情况下，出现瞬间的电压变化而产生一个电脉冲，电脉冲的数量就是流经小孔的细胞数；电脉冲的大小与细胞大小成正比，因此能进行细胞分类。血细胞分析仪的工作原理五分类血细胞分析仪在三分类血细胞计数仪的基础上，结合组织化学和免疫组化，高频传导、激光散射技术，推出了一系列的五分类现代多参数血细胞分析系统。从直方图到散点图；从无数据储存到宏大的数据库；从无质控文件到有多个质控文件，实现了真实意义的全自动。血细胞分析仪的优势：重复性好，干扰因素少，排除了人为主观因素影响，结果判断客观准确。可批量样品测定和众多项目测定同时进行。避免标本之间的污染以及标本对人的“污染”。便于进行室内及室间质量控制血细胞分析仪的不足血细胞分析仪测定原理虽有不同，但它的各种项目的阈值是人设定的，而且是固定的，可是病人血细胞变化是千姿百态，有部分细胞难以识别或认错干扰其它细胞计数，如有核红细胞可影响白细胞计数；细胞碎片、血小板聚集可影响血小板计数等。有了全自动血细胞分析仪血常规检测就可高枕无忧了吗？三分类血细胞分析仪器白细胞的直方图正常是“两峰一谷”。如果白细胞直方图失态，则提示白细胞形态学异常或隐含白血病。五分类血细胞分析仪由于采用了多种复合技术，它们显示的不是细胞体积的直方图，而是二维或三维散点图及染色后的直方图。正常的血细胞在散点图上有其固定的位置和形态，如果散点图异常，也是异常细胞提示。

直方图或散点图的实质——筛选实验血细胞分析仪的白细胞分类虽已达到了相当“完善”的程度，但血涂片染色分类仍能提供更多其它重要信息，特别是各种异常血细胞及血液寄生虫的形态学识别，这是仪器分类不能代替的。直方图或散点图的实质——筛选实验目前公认，血细胞分析仪在形态学识别上还是一种过筛检查，特别在某些病理条件下，对于红细胞系直方图的非正态分布、双峰、多峰，白细胞系直方图的高峰、缺峰，血小板直方图异常等，显微镜检查可解释异常图形和异常报警提示，而对仪器无法辨别形态的细胞，也只能通过镜检来确认。直方图或散点图的实质——筛选实验尤其是白细胞形态学分类与血细胞分析仪的白细胞分类有本质上的不同，三分群仅仅是根据细胞大小来分而己，即使先进的五分类也与形态学也有很大差异，又如中性粒细胞毒性病变、变异淋巴细胞、疟原虫等临床需要的指标无法显示；有的幼稚细胞、有核红细胞也不能区分；各参数之间有时还存在互相干扰。总之，血细胞分析仪的结果仅仅是属于过筛而己，不能完全代替人工镜检。

直方图或散点图的实质——筛选实验复检不仅能补充仪器形态学鉴别能力的不足，而且还可以直观地评估和验证血液学分析仪所报告结果的可靠性。凭借血片中细胞的分布比例，估计仪器给出的白细胞、血小板计数、血红蛋白及白细胞分类结果是否大致相符，从而纠正某些由于仪器识别能力的限制造成的误判。复检标准仪器的档次、病人的情况、临床医生的要求和检验人员的经验都影响复检率。复检率差别很大，从5%~40%参考依据不一致复检标准主张各血液学实验室根据机身的具体情况，制定本实验室的标准复检标准2005年全国血液体液学质量保证学术会议上朱忠勇教授提出下列几个应考虑复检的条件：1、仪器出现警示符号2、直方图或散点图出现异常3、仪器给出的结果相互之间出现矛盾4、仪器给出的结果与临床初诊或提示明显不符5、临床初诊或提示有白血病等血液病6、临床医生指定要镜检复检标准2005年国际室间质评指导委员会在LaboratoryHematology11期由Barnes执笔发表文章，他们在2002年春季邀请了20位专家开会讨论了血细胞分析仪复检问题，在会上一致通过了大会拟定的复检标准83条。复检标准会后这个标准在6个国家15所不同性质的综合医院、肿瘤医院、儿童医院、社区医院、私人诊所等临床实验室进行实践，他们拥有BayerADVIA120、BeckmanCoulterGenS和LH750、SysmexSE-9000AN和XE-2100血细胞分析仪，共进行了13,298例验证，经过对数据详细的分析后这些标准被精炼、整理后形成复检标准41条。复检标准一、国际血液学复检专家组推荐的41条自动CBC和DC复检规则：1.新生儿：（1）复检条件：首次检测标本；（2）复检要求：涂片镜检。2.WBC、RBC、Hb、PLT、网织红细胞（Ret）：（1）复检条件：超出线性范围；（2）复检要求：稀释标本后重新测定。3.WBC、PLT：（1）复检条件：低于实验室确认的仪器线性范围；（2）复检要求：按实验室标准操作规程（SOP）进行。复检标准4.WBC、RBC、Hb、PLT：（1）复检条件：无结果；（2）复检要求：①检查标本是否有凝块，②重测标本，③如果维持不变，用替代方法计数。5.WBC：（1）复检条件：首次结果<4.0x10e9/L或>30.0x10e9/L；（2）复检要求：涂片镜检。6.WBC：（1）复检条件：3天内Delta值超限，并<4.0x10e9/L或>30.0x10e9/L；（2）复检要求：涂片镜检。复检标准7.PLT：（1）复检条件：首次结果<100x10e9/L或>1000.0x10e9/L；（2）复检要求：涂片镜检。8.PLT：（1）复检条件：Delta值超限的任何结果；（2）复检要求：涂片镜检。9.Hb：（1）复检条件：首次结果<70g/L或>其年龄和性别参考范围上限20g/L；（2）复检要求：①涂片镜检，②确认标本是否符合要求。复检标准10.平均红细胞体积（MCV）：（1）复检条件：24h内标本的首次结果<75fl或>105fl（成人）；（2）复检要求：涂片镜检。11.MCV：（1）复检条件：24小时以上的成人标本>105fl；（2）复检要求：①涂片镜检观察大红细胞相关变化，②如无大红细胞相关变化，要求重送新鲜血标本，③如无新鲜血标本，报告中注明。12.MCV：（1）复检条件：24h内标本的Delta值超限的任何结果；（2）复检要求：确认标本是否符合要求。复检标准13.平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）：（1）复检条件：≥参考范围上限20g/L；（2）复检要求：检查标本是否有脂血、溶血、RBC凝集及球形红细胞。14.MCHC：（1）复检条件：<300g/L，同时，MCV正常或增高；（2）复检要求：寻找可能因静脉输液污染或其他标本原因。15.RDW：（1）复检条件：首次结果>22%；（2）复检要求：涂片镜检。复检标准16～22条为白细胞分类的复检规则：16.无白细胞分类计数（DC）结果或DC结果不全：（1）复检条件：无条件复检；（2）复检要求：人工分类和涂片镜检。17.中性粒细胞绝对计数（Neut＃）：（1）复检条件：首次结果<1.0x10e9/L或>20.0x10e9/L；（2）复检要求：涂片镜检。18.淋巴细胞绝对计数（Lym＃）：（1）复检条件：首次结果>5.0x10e9/L（成人）或>7.0x10e9/L（<12岁）；（2）复检要求：涂片镜检。复检标准19.单核细胞绝对计数（Mono＃）：（1）复检条件：首次结果>1.5x10e9/L（成人）或>3.0x10e9/L（<12岁）；（2）复检要求：涂片镜检。20.嗜酸粒细胞绝对计数（Eos＃）：（1）复检条件：首次结果>2.0x10e9/L；（2）复检要求：涂片镜检。21.嗜碱粒细胞绝对计数（Baso＃）：（1）复检条件：首次结果>0.5x10e9/L；（2）复检要求：涂片镜检。复检标准22.有核红细胞绝对计数（NRBC＃）：（1）复检条件：首次出现任何结果；（2）复检要求：涂片镜检。23条为网织红细胞的复检规则：23.网织红细胞绝对计数（Ret＃）：（1）复检条件：首次结果>0.10x10e9/L；（2）复检要求：涂片镜检。复检标准24～41条为可以提示的复检规则：24.怀疑性报警[不成熟粒细胞(IG)/杆状核中性粒细胞（Band）报警提示除外]：（1）复检条件：首次成人结果出现阳性报警；（2）复检要求：涂片镜检。25.怀疑性报警：（1）复检条件：首次儿童结果出现阳性报警；（2）复检要求：涂片镜检。复检标准26.WBC结果不可*报警：（1）复检条件：阳性报警；（2）复检要求：①确认标本是否符合要求并重测标本，②如出现同样报警提示，检查仪器，③如需要，进行人工分类。27.RBC碎片：（1）复检条件：阳性报警；（2）复检要求：涂片镜检。28.双形RBC：（1）复检条件：首次结果出现阳性报警；（2）复检要求：涂片镜检。复检标准29.难溶性RBC：（1）复检条件：阳性报警；（2）复检要求：①检查WBC直方/散点图，②根据实验室SOP证实Ret计数是否正确，③涂片镜检是否有异常形态的红细胞。30.PLT聚集报警：（1）复检条件：任何计数结果；（2）复检要求：①检查标本是否有凝块，②涂片镜检估计PLT数，③如PLT仍聚集，按实验室SOP进行。31.PLT报警：（1）复检条件：除PLT聚集外的PLT和MPV报警；（2）复检要求：涂片镜检。复检标准32.IG报警：（1）复检条件：首次结果出现阳性报警；（2）复检要求：涂片镜检。33.IG报警：（1）复检条件：WBC的Detal值超上限，有以前确认的阳性报警结果；（2）复检要求：涂片镜检。34.左移报警：（1）复检条件：阳性报警；（2）复检要求：按实验室SOP进行。复检标准35.不典型和（或）变异Lym：（1）复检条件：首次结果出现阳性报警；（2）复检要求：涂片镜检。36.不典型和（或）变异Lym：（1）复检条件：WBC的Detal值超上限，有以前确认的阳性报警结果；（2）复检要求：涂片镜检。37.原始细胞报警：（1）复检条件：首次结果出现阳性报警；（2）复检要求：涂片镜检。复检标准38.原始细胞报警：（1）复检条件：3～7天内WBC的Detal值通过，有以前确认的阳性报警结果；（2）复检要求：按实验室SOP进行。39.原始细胞报警：（1）复检条件：WBC的Detal值超上限，有以前确认的阳性报警结果；（2）复检要求：涂片镜检。40.NRBC报警：（1）复检条件：阳性报警；（2）复检要求：①涂片镜检，②如发现NRBC，计数NRBC，重新计算WBC结果。41.Ret：（1）复检条件：散点/直方图异常；（2）复检要求：①检查仪器状态是否正常，②如吸样有问题，重测标本，③如结果维持不变，涂片镜检。复检内容1、对照、评估血液学分析仪所给出的血液学有关参数的可靠性，必要时加以纠正2、印证直方图和散点图上的发现3、血细胞的形态学观察4、白细胞分类复检内容复检的范围应该是全面的，并非单纯显微镜下作白细胞分类计数。应该把复检作为全血细胞分析（CBC）一项很重要的质量控制措施复检的一般步骤1、检查、了解仪器是否处于正常状态，室内质控是否在允许范围之内。2、仔细阅读仪器报告的各种参数和直方图、散点图和临床提供的初诊资料，根据本室制定的标准，确定是否需要复检。复