铜川市人民医院：慢性乙型肝炎的检测与诊断

慢性乙型肝炎的检测与诊断铜川市人民医院张碧莹2023/10/1401病毒性疾病病程的诊断与评价02慢性乙型肝炎概览03慢性乙肝的检测检验医学慢性乙型肝炎的临床诊断总结0405病毒性疾病病程的诊断与评病毒性疾病病程的诊断与评价

病毒性疾病病程的诊断与评价

0101病毒性疾病病程的诊断与评价

感染与免疫状态的评价，这是实验室的任务。在对感染性疾病复杂的诊断性试验之前，应先评价感染的常用参数。发热、血沉增高和淋巴细胞相对增多，是病毒感染的典型表现。病毒感染所引发的直接或间接的结果是疾病的诊断与预后，临床医生的任务。通常利用实验室参数分析器官功能。病毒性疾病病程的诊断与评价病毒性实验室诊断的主要技术

检测病毒性传染病光学显微镜和电子显微镜病毒的细菌培养（鸡胚、实验动物）用特定的抗体作病毒结构成分的检测分子生物学诊断

用特定抗原检测病毒诱导的免疫应答体液免疫反应的测定细胞免疫反应的测定实验动物抗体产生实验病毒性疾病病程的诊断与评病毒性疾病病程的诊断与评价

慢性乙型肝炎概览

慢性乙型肝炎病原学02乙型肝炎病毒（Dane颗粒）结构模式L蛋白M蛋白S蛋白C蛋白02病原学

乙肝病毒（HBV）蛋白质的基因组成HBV四个开放读码框包括S区、C区、P区、X区均可能发生突变，导致乙肝病毒生物学改变，进而干扰临床的检测与治疗。S基因编码表面蛋白，经蛋白水解裂酶裂解为小蛋白的HBsAg，是病毒外壳主要的表面蛋白质C基因编码病毒的核心蛋白，表现为一个更长的蛋白（及HBeAg），由于折叠的方式不同，具有不同的免疫原性，是HBcAg.产物的非直接标志物。P基因编码在病毒颗粒中出现的DNA聚合酶X基因可能在HBV相关的原发性肝细胞癌中扮演重要角色。03病原学当HBV侵入肝细胞后，形成共价闭合环状DNA(cccDNA)；cccDNA半衰期较长，难以从体内彻底清除，对慢性感染起重要作用。HBV至少有9个基因型（A~I），我国以B型和C型为主。HBV基因型与疾病进展和干扰素治疗应答有关，与C基因型感染者相比，B基因型感染者较少进展为慢性肝炎、肝硬化和HCC。其中HBsAg膜外区的“a”决定簇

是突变的热区。目前HBsAg检测试剂盒主要检测“a”决定簇的AA141-145表位，其突变后，检测试剂无法识别HBsAg，临床上会出现HBsAg检测结果为阴性（隐匿型乙型肝炎）病原学2、免疫组化法显示：（1）、早在发病前几周在肝细胞浆内和细胞核内可分别检测出HBsAg和HBcAg.。（2）在潜伏期：HBV-DNA、HBsAg、HBeAg和抗HBc-IgM会在血清中相继出现阳性。（3）、在发病期（40-60天），HBsAg浓度达峰值.（4）、大约5%病例在发病期HBsAg为阴性，在此情况下，急性病例只能靠检测高浓度的HBc-IgM滴度来确诊（5）、5%-10%的成年人和90%的新生儿在感染后没有能力清除病毒，成为慢性肝炎的携带者。02慢性乙型肝炎概览

全球约有2400万人携带HBV慢性乙肝（CHB）是全球第十大死因2014年全国1—29岁人群乙型肝炎血清流行病学调查结果显示，1-4岁、5-14岁、15-29岁人群流行率分别为0.32%、0.94%、4.38%（中国CDC）中国乙型肝炎呈慢性化的主要原因是感染多始于幼龄，已母婴垂直传播为主。病毒性疾病病程的诊断与评病毒性疾病病程的诊断与评价

慢性乙型肝炎概览

慢性乙肝的检测0303慢性乙肝的检测1、主要为实验室检查，以及影像学检查、病理检查实验室检查（主要是血清学指标）乙肝病毒感染的不同血清学指标的诊断意义

是否感染过？（诊断既往）病毒存在与否（诊断疗效）病毒存在状态（复制水平）有无传染性（与HBV-DNA结合）有无免疫力（是否产生抗—HBs）HBsAg抗—HBsHBeAg抗—HBc抗—HBc

XMutationofS&Pre-SS基因“a”决定簇

G145R

变异，与抗-HBs的亲和力降低S基因变异可导致隐匿性HBV感染(occultHBVinfection)，表现为血清HBsAg阴性，但仍可有HBV低水平复制(血清HBVDNA常<104拷贝/ml)献血员人群，隐匿性HBV感染的检出率可达0.19%14慢性乙型肝炎的检测HBV-DNA基因型和变异检测1、HBV-DNA定量检测，主要用于判断慢性HBV感染的病毒复制水平，可用于抗病毒治疗适应证的选择和疗效的判断。2、HBV基因分型和耐药突变株的检测。基因型特异性引物聚合酶链反应（PCR）：敏感的检测HBV-DNA基因序列测定法：用于检测HBV的变异、检测或排除感染的来源、测定HBV的基因型和血清型线性探针反向杂交法：检测血清非典型性HBV感染的方法

生物化学方法、ALT、AST、ALP、TBA、GGT、血清白蛋白和球蛋白等1.2HBsAg检测中存在的问题最大的问题是“假阴性”其原因由于商品化的试验系统都是应用针对HBsAg“a决定簇”的单克隆抗体，在这个区域出现点突变就会出现临界数值或阴性结果。HBsAg的含量低于检测下限。如感染的“窗口”期，急性期后或恢复期，自限性感染末期的携带者等。。HCV、HDV的重叠感染可能对HBV感染或HBsAg的表达有抑制作用。测定方法所用抗体对HBV不同基因型检测的敏感性不同钩状效应标本存放时间长，反复冻融。假阳性的问题B、假阳性的问题1、内源性干扰因素：类风湿因子、补体、治疗性抗体，溶菌酶、合并其他病毒感染，自身免疫性疾病、血透。2、外源性干扰因素：溶血，细菌污染，凝固不全，操作不当（临近孔污染、加错样）等。发病后的HBsAg发病后的HBsAg发病后的HBsAg通常不是一直阳性，并且在1-4月内可被灵敏的方法检测出来。大约5%的急性乙肝和一小部分慢性乙肝感染中，HBsAg可检测不出，是属HBsAg阴性乙肝。可用抗HBc-IgM和HBV-DNA。HBsAg的持续时间，HBsAg持续六个月以上，（如见于90%的新生儿和10%的成人感染），病毒不能近期被清除，即为急性乙肝或慢性HBsAg携带状况。检测中的少见模式

检测中的少见模式一、HBsAg与抗-HBs同时阳性接种乙肝疫苗后，虽有正常的抗-HBs应答，但仍能感染“a决定簇”变异的免疫逃逸毒株，与-HBs并存前后感染不同亚型的HBV，一种产生抗体，另一种没有。由于S基因变异，其编码的HBsAg抗原性改变，原型抗--HBs不能清除HBsAg抗-HBs滴度低，不能清除HBsAg，形成免疫复合物。少数关节炎和乙肝肾的慢性乙肝患者可出现。血清转换的时刻（自然或药物治疗）例如，干扰素治疗即能抑制病毒复制，又能调节宿主免疫，在治疗中发生HBsAg向抗-HBs的转换检测中的少见模式二、HBeAg与抗--HBe同时阳性治疗过程中会发生HBeAg向抗—HBe的血清转换机体同时或先后感染了HBV的不同亚型所致三、抗-HBc阳性，其