balbc近交系小鼠生物学特性指标的比较

balbc近交系小鼠生物学特性指标的比较

本交系大鼠的广泛使用。清洁级实验动物目前已是我国在医学研究领域应用的主要实验动物。为探讨其生物学特性,我们针对BALB/c近交系小鼠常规的血细胞计数、临床生化指标、免疫指标、体重及脏器重量(含脏器指数),进行了详细的研究,为清洁级BALB/c近交系小鼠的应用提供基础数据。1材料和方法1.1动物清洁级BALB/c近交系小鼠,由本中心饲养(京动许字99001),每组动物雌雄各20~40只。1.2小鼠cd8+、cd3+单抗的制备PE标记的抗小鼠CD4+、CD19+单抗,FITC标记的抗小鼠CD8+、CD3+单抗,晶美生物工程有限公司;RPMI-1640,新生牛血清:本院条件处提供。羊抗小鼠酶标抗体(IgG),军事医学科学院血液研究所提供。1.3ra:细胞东南角流式细胞仪为Cytometer.FACSCalibur;软件为Softwara:CELLQuest由美国SD公司制造;酶联仪为日本Bio-Rad;血球计数仪为日本光电MEK-5126;半自动生化分析仪为荷兰VITALAB;万分之一的电子天平为西德沙多利斯电子分子天平;显微镜为日本OLYMPUS。1.4方法1.4.1血液生理指标动物空腹12~24h,上午8:00~10:00采静脉血,应用日本光电MEK-5126血球计数仪(动物芯片)及配套试剂盒检测120只比格犬的血液生理指标8项;取静脉血1滴于玻片上,常规推片,瑞氏染色镜检计数白细胞分类5项。指标如下:白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(Hgb)、血细胞压积(HCT)、红细胞平均容量(MCV)、红细胞平均血红蛋白容量(MCH)、红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)、血小板计数(PLT)、中性细胞、酸性细胞、碱性细胞、淋巴细胞、单核细胞。1.4.2血液常规生化指标动物空腹12~24h,上午8:00-11:00采静脉血,离心取血清,通过荷兰半自动生化仪(Ⅱ型),中生北控生物科技股份有限公司的试剂盒测定20项血液常规生化指标。具体指标如下:血糖(Glu)、肌酸激酶(CK)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH-L)、胆固醇(CHO)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三脂(TG)、白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)、尿素氮(BUN)、总胆红素(T.Bili)、肌酐(CRE)、尿酸(UA)、钙(Ca)、氯(Cl)、镁(Mg)、磷(P)。1.4.3低质低效液凝胶电泳杀小鼠取血清备用,再取小鼠脾脏,制备小鼠脾脏的细胞悬液,配成1×106/ml脾细胞悬液,1ml/管分装,加入抗体,常温抚育30min,加入破红细胞低渗液1ml,停留5min后离心,然后用PBS液洗涤两次,最后加入保存液,24h内上流式细胞仪检测。1.4.4血清白蛋白封闭取小鼠血清100倍稀释后包被酶标板,4℃过两夜后,用人血清白蛋白封闭酶标板,用PBS液洗涤3次,加上羊抗小鼠的酶标抗体,孵育后洗涤。最后加入酶低物溶液,490nm测定A值。1.4.5测量体重和器官指数的指标剖检小鼠20只,肉眼观察脏器无病理变化,取出各个脏器应用电子天平称重。1.5统计方法应用SPSS统计学软件的t检验对实验结果进行性别、级别之间分析比较。2结果2.1balb-c型近距离小鼠血液生理指标碱性细胞为零,RBC、Hgb、MCV、单核细胞雌雄之间差异显著(P<0.05),其它指标差异不显著(表1)。2.2balb-c型选择性下肢血生化指标CK、GLU、UA、TG雌雄之间差异显著(P<0.05),其它指标差异不显著(表2)。2.3本交系大鼠体重、器官重量和器官指数的接近脾脏雌雄之间差异显著(P<0.05),其它指标差异不显著(表3)。2.4balb-c型社区下肢免疫指数清洁级BALB/c近交系小鼠的免疫指标雌雄之间差异不显著(P<0.05)(表4)。3不同饲养环境对balb/c近交系小鼠血液学生理生化指标的影响近交系小鼠具有高度的基因纯合和遗传的均质性,在相同的环境因素作用下,表现型均一,用作实验研究,易于重复和定量比较,对各种刺激的反应一致性较好。本实验的血液细胞计数、血液生化指标、体重、脏器重量、脏器指数等常规生物学指标其结果比较均一;清洁级BALB/c近交系小鼠的血液细胞计数和血液生化指标同普通级BALB/c近交系小鼠比较差异很大。说明不同的饲养环境对近交系小鼠的血液学生理生化指标影响较大。机体的特异性免疫功能分体液免疫和细胞免疫。细胞免疫由T淋巴细胞介导的;B淋巴细胞是唯一能够产生抗体的细胞,CD19+主要表达大多数B细胞;,CD4+和CD8+是T细胞表面的糖蛋白,CD4+和CD8+作为辅助分子增强T细胞和靶细胞间的相互作用。因此,我们检测CD3+、CD4+、CD8+、CD19+以及IgG基本能够反映机体的特异性免疫功能。实验结果表明:清洁级BALB/c近交系小鼠CD4+/CD8