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CentralLaboratoryofBiology实验六微生物液体深层培养—发酵罐的使用微生物学实验目的要求与基本原理【目的要求】1.了解微生物液体深层培养的方法和设备的使用。【基本原理】好氧微生物的生长繁殖需充足的氧。为了进行大规模的工业生产,微生物需进行液体深层培养,其氧的供给由空气系统完成,“通风搅拌”是最常用的方式。生产前,空气过滤器至罐体以及其他与罐体相通的管道、培养基都需进行彻底地灭菌。然后,控制好微生物培养所需的温度、风量、搅拌速度并接种,方可正常生产。【实验用品】1.材料:玉米粉、豆饼粉2.试剂:K2HPO4·3H2O、MgSO4·7H20、红曲霉液体菌种3.仪器:小型通风发酵罐【方法步骤】1.准备工作1)培养基的配制:玉米粉5%,豆饼粉2%,K2HPO4·3H2O0.5%,MgSO4·7H200.1%,pH自然。2)检查本系统各单件设备,确保各设备能正常运行时方可开机。3)温度、pH、转速、消泡设定值的调节【方法步骤】2.空气过滤及空气管路的消毒1)慢慢打开蒸汽阀门,排尽冷凝水。2)蒸汽通过空气过滤器进入发酵罐内。3)消毒时间一般为30分钟。4)吹干空气过滤器需20分钟左右。3.空消1)排尽夹套中的水。2)排尽蒸汽管中冷凝水,使蒸汽徐徐进入发酵罐。3)空消时间一般为30~50分钟。排尽发酵罐内的冷凝水。4.加培养基液1)将培养基原液加入发酵罐内,并加水至所配培养液总量的75~85%左右。5.实消1)排尽夹套中的水。2)夹套预热:调节电机转速至150rpm左右,进行慢速搅拌。3)发酵罐内温度达到80℃左右时,排尽蒸汽管中冷凝水,使蒸汽徐徐进入发酵罐。4)当培养液温度达到95~100℃后方可停止搅拌。5)实消时间一般为30分钟。自然冷却10分钟左右。6)通冷却水进行冷却。7)当罐内温度降至70℃以下时,慢速搅动培养基。【方法步骤】6.接种1)当发酵液温度降到接种温度时即可进行接种。2)准备合格的摇床菌种。3)在接种口四周围上酒精棉。4)点燃酒精棉,拧下接种口螺母,并将其放入预先准备的盛有酒精的培养基中。5)将装菌种
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