参七消痞方对慢性萎缩性胃炎大鼠组织病理形态及血清gh、egf的影响

参七消痞方对慢性萎缩性胃炎大鼠组织病理形态及血清gh、egf的影响

慢性萎缩性胃炎（cag）通常在临床上看到，发病率高。在我国,CAG发病率占受检人群的13.8%,16～30岁人群的发病率约为9%,51～65岁人群的发病率高达53%,且CAG具有癌变性,其癌变率约为10%,所以将疾病控制在萎缩性胃炎或之前的阶段、逆转胃黏膜萎缩性病变,对预防胃癌的发生具有很高的学术和社会价值。近年来,随着中医药对CAG的基础研究及临床治疗探索,取得了明显的成果,中药在治疗CAG方面有很好的开发前景。本实验采用综合造模法,探讨中国工程院院士董建华教授的临床经验方参七消痞方(SQ)对CAG大鼠胃黏膜病变的改善作用,及对大鼠血清生长激素(GH)、表皮生长因子(EGF)水平的影响。1材料和方法1.1材料表面1.1.1实验动物及原料SPF级Wistar大鼠150只,雌雄各半,体重160～180g,购自北京维通利华实验动物技术有限公司,许可证号SCXK(京)2006-0009。1.1.2中诺两感染胶囊试药公司N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)为日本TCI公司产品,购于北京化学试剂公司;盐酸雷尼替丁胶囊,中诺药业(石家庄)有限公司生产,批号100902256;无水乙醇,购于北京化工厂,批号20100901;摩罗丹,邯郸摩罗丹药业股份有限公司,批号:110413;叶酸,天津飞鹰制药有限公司,批号:1104007。1.2方法1.2.1湿度2.5%参考岳双冰等的方法并加以改进。大鼠按体重随机分为空白对照组(雌雄各15只)和CAG模型组(雌雄各60只),饲养于通风、光照规律的动物房里,室温22～24℃,湿度40%～70%。空白对照组每天蒸馏水10ml/kg灌胃,模型组每日饮用120μg/mlMNNG溶液,每日灌胃雷尼替丁溶液0.03g/kg,每周禁食1次,每次16h,禁食第2天灌胃50%乙醇1ml/只,当天不再灌胃雷尼替丁溶液,总共造模14周。MNNG用去离子水配成1g/L的储备液,于4℃冰箱避光保存,用前以自来水稀释为120μg/ml浓度的溶液,装入用黑胶布包裹的避光饮水瓶内供模型组大鼠每天自由饮用,每天更换。1.2.2sq模型生药灌胃第15周开始模型组剩余大鼠按体重随机分为模型组、摩罗丹组、叶酸组、SQ组。摩罗丹为中药对照组,叶酸为西药对照组。正常对照组和模型组每日灌胃蒸馏水,SQ组大鼠灌胃SQ水煎(党参、三七、丹参、半枝莲、乌药、百合、白花蛇舌草、香橼皮、莪术)9g生药/kg,其他各组给予相应的药物灌胃,灌胃体积为10ml/kg,给药8周。实验期间每周观察大鼠的体重。1.2.3gh、egf检测第22周,大鼠禁食16h,不禁水,10%水合氯醛麻醉,打开腹腔,腹主动脉取血,分离血清,-80℃保存,放免法检测GH、EGF;取胃,沿胃大弯剪开,除去胃容物,0.9%氯化钠冲洗干净,展开照相,大体观察;胃窦部横向条状取材,用10%甲醛固定,苏木精-伊红染色作病理检查。1.3统计处理方法计量资料以x¯±sx¯±s表示,采用单因素方差分析,数据采用SPSS11.5统计软件包进行统计分析。2结果2.1各组大鼠的体重变化造模期间,与空白对照组相比,模型组大鼠毛发松散,无光泽,进食、饮水量均减少,体重减轻。从第3周开始模型组大鼠与空白对照组相比,体重明显减轻(P<0.05),随着造模周数的增加,差异越来越显著,见表1。与空白对照组比较,1)P<0.05,2)P<0.01。2.2胃黏膜白、形态变异与空白对照组相比,模型组大鼠胃内容物恶臭,胃黏膜苍白,胃壁较薄,胃黏膜皱襞走向紊乱,部分区域皱襞变浅或消失,部分见出血点。SQ组对胃黏膜有明显改善作用,胃壁较厚,弹性较好,胃黏膜皱襞较多。2.3组织病理结果苏木精-伊红染色切片镜下观察:空白对照组大鼠黏膜结构正常,腺体排列紧密、整齐;模型组大鼠胃黏膜不同程度的萎缩,黏膜层变薄,固有层腺体减少,排列稀疏不规则,部分腺体扩张,有肠上皮化生,少数见异型增生,细胞核着色深染,有炎性细胞浸润,黏膜肌层增厚。SQ组与模型组相比,病理结果均有不同程度的改善,黏膜腺体数量多,排列较整齐,固有层单个核细胞数量少。SQ提高大鼠胃窦区褶皱处的胃黏膜厚度(L1)/黏膜肌层厚度(L2)(P<0.01),结果见表2。2.4各组小鼠体内egf活性的比较GH的主要生理功能是促进神经组织以外的所有其他组织生长。SQ组与模型相比,GH水平有增高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。EGF是一种多功能的生长因子,在体内体外都对多种组织细胞有强烈的促分裂作用,SQ组与模型组比较显著升高(P<0.01)。结果见表3。与空白组比较,2)P<0.01;与模型组比较,3)P<0.05,4)P<0.01。3模型大鼠cag模型的临床研究中医治疗CAG主要以个人经验为主,临床辨证证候分型多种多样,主要有肝气郁滞、脾虚失运、胃气壅滞,或为胃阴不足、脾胃虚寒、瘀血阻络、湿热内蕴等。董建华教授认为胃为水谷之海,主要功能是“传化物而不藏”,以通为用,以降为顺。胃气得降,则“五脏安定,血脉和利,精神乃居”。初病多在气,病症以胀为主;久病多伤血络,病症以痛为主。其临床经验方SQ具有益气养阴,活血消癥、清热解毒功能,临床用于CAG。本实验建立了MNNG复合多因素致大鼠CAG模型,主要病理病变出现在胃窦区褶皱处,大鼠胃黏膜萎缩,固有层腺体减少,排列不规则,间隙较大,有肠上皮化生和异型增生,动物成模率高,成模时间较短,适合用于实验研究。CAG临床诊断以黏膜固有腺体萎缩甚至消失,黏膜肌层常见增厚为其主要病理改变,有文献报道采用L1/L2值作为评价指标。本实验观察了大鼠胃窦区褶皱处的L1/L2,观测位置固定,病理改变明显,测量数值稳定可靠,结果客观。实验结果显示大鼠14周制成CAG模型,停止造模8周,模型组大鼠胃萎缩病变无明显恢复;停止造模给药8周,SQ能提高大鼠胃窦区褶皱处的L1/L2,显示有良好的治疗胃萎缩性胃炎作用。本实验选择临床常用的中药摩罗丹和西药叶酸作为阳性药对照。摩罗丹是国家中药保护品种,临床明确定位于CAG,具有修复胃黏膜,双向调节胃肠道运动的作用,增强免疫功能等。叶酸是一种水溶性B族维生素,对细胞的分裂生长及核酸、氨基酸、蛋白质的合成起着重要的作用,可用于辅助治疗CAG。实验结果可见中药摩罗丹和西药叶酸对CAG大鼠GH、EGF水平都有显著的调节作用。SQ在一定程度上能通过