中药抗肿瘤的研究进展

中药抗肿瘤的研究进展

中医认为气虚是肿瘤形成的重要原因。且从肿瘤治疗的历程来看,也表明人们渐渐认识到了“扶正”的重要性。中医药治疗由以往突出软坚散结、活血化瘀、以毒攻毒为主转变为益气养阴、调脾补肾、扶助正气为主,收到了较好疗效,人们对补益类中药的抗癌研究也广泛深入起来。现代实验研究亦证明,补益类中药除具有传统观念上的提高机体免疫力作用外,有些补益类中药还具有直接杀伤癌细胞或增强放化疗效果的作用。本文就某些具有抗癌效果的补益中药的抗癌作用研究进展作一综述。1中医补药对肿瘤的预防作用1.1抗过血作用组方对于恶性肿瘤来说,预防是一个重要环节。肿瘤的发生和正常细胞的染色体突变有密切关系。因此,应用抗突变剂降低人体正常细胞的突变率,对于肿瘤的防治有重要意义。中药抗突变的研究已有多年历史,文献报道颇多,其中对于补益中药防突变的研究占主导地位。我院邱佳信教授对健脾、补肾等百余味中药进行了抗突变研究,其采用国际通用的V79细胞突变试验,发现炒白术、肉苁蓉、地鳖虫、北沙参等20味中药有明显反突变作用。又对健脾药组成的小复方10个,补肾药组成的小复方11个,其他类组方14个反复研究发现,四君子汤作用最为突出,并证明其中甘草1味必不可少。南京中医药大学亦对传统复方桂枝甘草汤(《伤寒论》方)、益胃汤(《温病条辨》方)的拮抗环磷酰胺致突变作用进行了研究,采用小鼠骨髓细胞微核率为指标,结果表明,桂枝甘草汤组微核率明显降低,并有一定的剂量依赖性;益胃汤的作用不如桂枝甘草汤明显。以上实验证明,中医的虚证也应与染色体断裂后形成的不正常结构———微核有关,而补气养血(阴)类方药“补”的基础之一可能就在于对染色体的保护作用,免其受损或受损后易于修复。人参是最为人们熟知的补益药,从其根茎中提取的人参根总皂甙(GRS)有明显的抗DNA损伤和抗突变作用。在人外周血淋巴细胞中加入DNA损伤剂4-NQO20umol/L,再加入GRS31.2ug/ml和62.5ug/ml,对照组DNA比率仅为19.5±16.7,用药组分别为43.6±6.0和67.3±12.7,表明GRS有显著抗突变作用。1.2乳宁胶囊、养阴方和提取物有学者对养阴方和清解方防治大鼠肝脏癌变的作用进行了比较,其采用黄曲霉素B1(AFB1)致大鼠肝癌模型,动态观察了诱癌早、中、晚三期方药的抗癌作用,结果表明,两方对大鼠肝脏癌变过程中的核变异,内质网脱粒等有一定防止和阻断作用,能有效阻断或抑制癌前病变的发展,进而有效推迟和/或减少肝癌的发生,实验还证明了养阴方的作用优于清解方,更说明“扶正祛邪”的道理。在我们的实验研究中也发现,自拟补肾活血为主的乳宁冲剂对DMBA诱发的大鼠乳腺癌有明显抑制作用,且阻止癌变的作用优于其对大鼠已癌变的治疗作用。从补益中药中提取有效成分进行防癌变研究也为人们关注。刘氏等也报道了黄芪注射液对MCA碘油溶液诱发的大鼠肺癌有明显抑制作用,对照组发癌率为51.52%,黄芪组仅为16.28%,差异显著,并推测是黄芪注射液可影响细胞代谢,阻断癌变过程。尹氏对草苁蓉的甲醇提取物进行了研究,观察其对二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝脏癌前病变的影响,结果发现500mg/kg的草苁蓉甲醇提取物对DEN诱发的F344大鼠肝脏GST-P阳性灶的形成有抑制作用。1.3保肝作用的药动学研究笔者对临床治疗乳腺癌常用的补肾中药淫羊藿、鹿角片的体外抗肿瘤作用进行了研究,采用血清药理学方法,MTT检测发现,无论是对ER(+)的人乳腺癌细胞株MCF-7,还是对ER(-)的人乳腺癌细胞株MDA-MB-435s,都有显著杀伤作用。补骨脂素体外也有杀伤乳腺癌细胞EMT6的作用,体内实结果。补骨脂素还对从白血病患者体中分离的白血病细胞有直接杀伤作用,且效果显著。黑龙江肿瘤研究所从补气药黄芪中提取物黄芪多糖(APS)进行了抑瘤研究,结果表明,APS对小鼠S180、H22移植瘤,裸小鼠人的ANIP973、人HC腹水型移植瘤均有明显的抑制作用,抑瘤率分别为51%,41.7%,40%,36%;对小鼠实体瘤B16,Lewis肺癌有效抑瘤率分别为47%、32%,并发现APS无毒性、无副作用,不使荷瘤小鼠体重脾重减轻。以扶正药为主组方的扶正抗癌冲剂是针对消化道肿瘤而设计的,动物实验证明该药对小鼠EAC的生命延长率达30%(P<0.01),对小鼠S180瘤重的抑制率为25.7%(P<0.05)。比较益气养阴和补气养血对L7212白血病小鼠体中分离的白血病祖细胞(CFU-Ⅰ)和粒单系祖细胞(CFU-GM)集落形成的影响时发现,两种组方均可提高CFU-GM产生率,益气养阴方作用更强,提示两方都有促进正常造血干细胞生长作用,对控制白血病感染有意义,且益气养阴方还可降低CUF-L的集落产生,提示其对白血病细胞特别是对增殖期白血病细胞有直接抑制作用,而补气养血方此作用不明显。2中医的抗癫痫机制2.1体外方面的作用淫羊藿甙(ICA)是从传统补肾中药淫羊藿中提取的主要有效成分,是一种新型的生物反应剂和诱导分化剂,其对人急性早幼粒白血病细胞HL-60有体外诱导分化作用。并发现其诱导分化的机制可能与升高细胞内cAMP/cGMP比值有关。人参茎叶总皂甙亦有类似作用,可诱导HL-60向单核-巨噬细胞系分化。还有学者用MTT法、流式细胞仪检测细胞周期、粘附实验、运动侵袭实验等手段检测ICA对人高转移肺癌细胞株PG的作用发现,ICA直接抑瘤作用较弱,但能阻止PG细胞由G0/G1期向S期移行,与细胞周期变化相吻合,细胞内cAMP水平升高,cGMP降低,作用40min后,PG粘附率明显降低,后侵袭力下降,穿过人工基底膜的细胞显著下降。诸多方面表明,逆转了肿瘤恶性表型,使其向正常细胞分化。2.2激励肿瘤细胞凋亡自80年代“凋亡”在肿瘤界盛行以来,中药抗癌机理又有了新的理论,国内外学者对中药诱导凋亡的可行性进行了广泛探讨。目前研究较多以中药提取物为主,有莪术提取物榄香烯、大蒜油,小柴胡汤的有效成分黄芩甙元,补阳药淫羊藿的有效成份淫羊藿甙等。李氏等从形态学、DNA电泳、流式细胞仪及凋亡基因Bcl-2、c-myc表达等多方面系统研究表明,淫羊藿能体外诱导肿瘤细胞HL-60、U937凋亡,有典型的细胞凋亡形态学和生化特征且有时间和剂量依赖性,并使S期细胞减少和G0/G1期细胞增多,并可下调Bcl-2和c-myc基因的PNA和蛋白表达水平,提示这可能是淫羊藿甙诱导肿瘤细胞凋亡的机制。由淫羊藿、黄芪、丹参等组成的补肾化瘀方对体外培养的HL-60细胞无明显细胞毒作用,但可抑制HL-60细胞增殖。补肾化瘀方作用24h后,DNA电泳显示,产生清晰的DNA“梯子带”,细胞形态学也显示凋亡态,流式细胞仪检测有明显凋亡峰,说明补肾活血方可诱导HL-60凋亡。2.3lewis肺癌中多糖组分的检测癌细胞的生成和生长均受癌基因的调控,影响癌基因表达实为抗癌机制的根本。地黄为滋补肾阴的常用药,主要活性成分为地黄多糖。已有学者报道地黄多糖具有明显的肿瘤生长抑制作用,魏氏等进一步研究发现,地黄多糖中分子量为1000-2000的多糖组分,对小鼠Lewis肺癌作用更明显,并利用Northen杂交和狭线杂交的方法定量检测了小鼠Lewis肺癌组织中的c-fos、c-myc基因表达的水平,结果表明低分子量地黄多糖可明显增加c-fos的表达,减少cmyc的表达。六味地黄汤是滋阴补肾代表方,可抑制氨基甲酸乙酯诱发的小鼠肺腺瘤的发生率,并对T3所致的“阴虚”小鼠的作用更明显,Northen-blot检测P53基因,诱瘤给药组P53阳性率比单纯诱瘤组升高48.8%,阴虚诱瘤给药组比阴虚诱瘤组表达升高61%。说明六味地黄汤通过一定途径维持P53基因表达,而降低氨基甲酸乙酯对小鼠肺腺瘤诱发率,这也许是其预防肿瘤的机制之一。2.4时药防治对补经剂治疗wag具体作用的影响恶性肿瘤细胞,其生物膜结构发生了明显改变,这种变化与细胞的各种恶性行为密切相关,如果可以影响恶性肿瘤细胞膜脂类组成和代谢的改变,也将影响其恶性度。近来实验研究表明,许多补益类中药有此作用,或为其抗癌机制之一。胆固醇(HOL)和磷酯(PL)是膜脂质双分子层结构的重要成分,其含量变化反应着生物膜结构的改变,目前已知白血病、肝癌等肿瘤的细胞膜流动性大(CHOL/PL大),且随其流动性增加,其转移度也增加,人参茎叶中提取的皂甙就可改变肝癌细胞这一变化,降低CHOL/PL比值,并可降低肝癌细胞膜的Na-K-ATP酶活性,从而具有一定的抗癌作用。3中医与抗癫痫药物的联合作用3.1环磷酰胺单用作药的安全性和保护机制补益中药可减轻放化疗副作用,增强放化疗效果,这已经多年临床证实,为广大医患所认同。黄芪为临床上最常用的补气药,它不但可提高机体免疫力,减轻化疗后造血功能的抑制和造血微环境的破坏,同时还可增强环磷酰胺的抗肿瘤活性。动物实验证明黄芪加环磷酰胺合用比单用环磷酰胺,其荷瘤小鼠的平均生存时间明显延长,平均瘤重明显降低。黄芪的主要成份黄芪总黄酮还具有清除体内自由基,防止放疗所致的组织细胞损伤,使照射后组织中的MDA含量下降,SOD活性受到保护,使肺癌术中放疗的犬的肺组织充血减少,并可减轻胸膜粘连和食道粘膜糜烂。同样,紫河车对化疗药也有协同作用。补肾阳名方金匮肾气丸对机体有多种调理功能。给接种了ECA的小鼠进行60CO照射的同时灌饲金匮肾气丸药液,可显著降低骨髓有核细胞微核率(P<0.01),粒系统和红系统早期细胞衰竭状况有很好改善。同时检测腹水癌细胞微核率,金匮肾气丸组高于单纯照射组,说明金匮肾气丸仅对正常细胞起保护作用,而对癌细胞染色体不起保护作用,甚至有促进损伤、协同放疗作用。3.2mcf-7adr细胞对adm抗性的影响肿瘤化疗失败的主要原因之一为多药耐药(MDR),为解决这一难题,许多学者致力于寻找MDR逆转剂,更看好在中药领域寻找作用强而毒副作用小的有效逆转剂,这无疑对中医药协同抗癌机理的探讨又提供了一条新途径。目前研究最多、效果最好的有莪术提取物榄香烯、汉防己提取物汉防己甲素、补骨脂抽提取物3等。刘氏等从补骨脂复方开始,直到抽提出其中主要有效成份补骨脂提取物R3,对其逆转MDR作了大量细致研究,免疫化学技术和Westernblot分别对耐阿霉素人乳腺癌细胞中MCF-7adr细胞PgR(多药耐药基因mdrl所编码的P糖蛋白)过度表达,而其亲本敏感细胞MCF-7无PgR表达。1∶60补骨脂复方R1和1∶90补骨脂复方R1处理细胞2h、3h均使MCF-7adr细胞的PgR表达下降,同时降低mdrlmRNA表达,并与时间、浓度呈正相关,R1增加了细胞内药物聚集量和抗癌药细胞毒性。对补骨脂复方R1拆方研究