年产1000万支重组人干扰素α-2b原液生产车间工艺设计

包涵体，包涵体复性纯化后得到干扰素原液。由原液可制成针剂、粉剂、凝胶剂、栓剂、本次设计依据近年对重组人干扰素制备与分离纯化的相关研究，设计了年产1000万重组人干扰素（IFN）是通过基因重组技术将编码干扰素的碱基序列导入到大肠杆菌工程菌中，经过发酵、裂解破菌、变性、复性、分离纯化后得到的具有免疫调节、抗细胞分裂与广谱抗病毒的低分子糖蛋白物质。按细胞来源与氨基酸组成分为a型干扰素、β型干扰素、γ型干扰素。其中α型干扰素又有二十多种亚型，由165个氨基酸组成的干扰素α-2b分布在人体的第9号染色体的p22区上，分子量为19237Da，氨基酸序列组成中有4个半胱氨酸，其形成的两对二硫键对于干扰素的结构与生物功能起着重要作用。干扰素可以参与调节细胞抗肿瘤免疫反应，提高人体免疫功能，特别是对真菌性皮肤病有不错的疗效。现阶段国外企业主要生产的干扰素多是长效干扰素药物与具有靶向功能的干扰素药物，例如有罗氏企业生产的聚乙二醇干扰素α-2a、拜耳制药生产的重组人干扰素β-1b、德国默克的重组人干扰素β-1a、生原公司的重组人干扰素β-1a。国内长效干扰素市场基本被罗氏、拜耳、默克等外资企业所垄断，国内企业竞争集中在普通干扰素领域。主要厂家有三生制药、长生基因药业、长春生物制品研究所等。重组人干扰素α-2b是一种胞内蛋白，在生产上制备的基本思路是：利用基因重组技术将干扰素α-2b基因导入到工程菌内，通过发酵增殖、破菌、粗提、包涵体复性、蛋白纯化，得到重组人干扰素α-2b蛋白原液。重组人干扰素的生产绝大多数是通过由细胞内表达的方式来实现的，需要的基因工程菌基本采用原核生物，少数是用人源细胞或其他动物细胞作为工程细胞。最早国内外是以大肠杆菌作为工程菌来进行研究的，所以研究成果较多也较为成熟。根据研究发现表达量主要取决于质粒的设计水平、宿主菌的选择、工艺设计、基因转录与翻译水平等方面。蒲广西等人通过利用重组毕赤酵母作为载体提高了干扰素纯度，降低了生产成本[1]；陈海宁等人通过对比酿酒酵母与大肠杆菌在表达干扰素活性方面的差异得出了用酿酒酵母要优于大肠杆菌的结论[2]；丁鹏根据毕赤酵母对个别密码子具有偏好性的特点，将干扰素α-2b基因序列3'端非翻译区内的所有侧翼删除，使其降低对翻译的抑制作用提高了表达效果[3]。当前，小分子干扰素的药物半衰期短是制约干扰素药效的重要因素，所以研究长效干扰素成为了近些年来国内外干扰素研究的新趋势。除了常采用PEG进行修饰外,还有采用缓释制剂、血清白蛋白融合、构建突变体等方法制作而成的缓释药品。由于技术与成本的原因，我国国内很少有企业生产长效干扰素制剂。本课题设计年产1000万支重组人干扰素，依据我国《中华人民共和国药品管理法》与《中国药典（2015年版）》中的相关内容作为工艺设计的基本要求与原则指导。原液车间工作内容基本包括：种子复苏、种子扩大培养、发酵罐发酵、蛋白质纯化，并考虑相关辅助工艺配套设施。按《药品生产质量管理规范》要求设计。表2—1原液检定标准宿主蛋白残留量细菌内毒素残余抗生素活性紫外光谱标准不应有抗生素活性检出表2—2成品检定标准表生产中纯化水和注射用水至少满足以下标准：表2—3工艺用水卫生标准表氨其中原水质量符合国家标准GB5749-2006《生活饮用水卫生标准》，工艺用水质量符合《中国药典（2015年版）》。将IFNα-2b基因构建载体转化大肠杆菌，筛选表达率高、遗传稳定的工程菌进行菌种库的建立与保藏。生产的时候先取出保藏菌种活化复苏，将其培养传代得到二代种子液参与后续生产发酵即可。选用LB培养液作为实验室条件培养使用，所用的LB培养液基配方如下：纯化水，10g/L的蛋白胨,5g/L的酵母提取物,10g/L的NaCl，调节PH至7.0。种子液发酵与大规模发酵培养采用分批流加的方式添加物料，工业上常使用富含大量胰蛋白胨和酵母提取物的SB培养基用于发酵。配制方法为:含5.0g/L的葡萄糖，35.0g/L的蛋白胨,20.0g/L的酵母提取物，1g/L的消泡剂，5g/L的NaCl，在后续发酵中还需要添加400g/L的葡萄糖补料液提供发酵所需的糖类来源。调节PH至7.0，用纯化水配制好后灭菌。SB培养液中的酵母可以提供微量元素与生长因子，NaCl可用调节渗透压与提供无机盐离子，蛋白胨与氨基酸提供主要的氮源。大肠杆菌裂解与包涵体初提方法参考相关研究[4]。洗涤剂包括：磷酸缓冲盐溶液（10mmol/L的磷酸氢钠，2mmol/L的磷酸二氢钾，13mmol/L的NaCl，2.7mmol/L的KCl，2%的脱氧胆酸钠，调节PH至7.4，定容至1L洗涤液A（1.0mmol/L的洗涤液B（2.0mmol/L的聚乙二醇辛基苯基醚，1.2g的Tris-HCl，12.0g的尿素，调节PH至8.0，定容至100ml）。表2—4变性剂配制配方名称名称盐酸胍β-巯基乙醇Tris-HClPH配制浓度6mol/L5mmol/L50mmol/L8.0层析柱介质采用DEAE-琼脂糖凝胶FF各缓冲液配制配方如下：表2—5阴离子层析缓冲液配方缓冲液名称缓冲液名称配方名称盐酸胍用量6mol/LPH要求7.0平衡缓冲液磷酸缓冲盐溶液盐酸胍50mmol/L0.6mol/L复性缓冲液氧化型谷胱甘肽还原型谷胱甘肽磷酸缓冲盐溶液NaCl0.3mmol/L3mmol/L50mmol/L0.5mol/L7.0洗脱缓冲液磷酸缓冲盐溶液蛋氨酸精氨酸50mmol/L10mmol/L10mmol/L5.8层析介质采用丙烯葡聚糖凝胶S-100，上样后用磷酸缓冲液(PH7.0）洗脱,收集洗脱液体即重组干扰素α-2b原液。表2—6阴离子层析缓冲液配方作用络合剂蛋白保护剂缓冲体系成分0.04%乙二胺四乙酸二钠组氨酸PH7.0的磷酸盐缓冲液扩大培养扩大培养发酵罐发酵裂菌洗涤包涵体变性发酵车间精滤凝胶层析过滤阴离子交换层析阳离子交换层析原液冷藏分离纯化车间干燥灌装车间种子复苏洗瓶图2-1干扰素注射液工艺流程图在超净台台内用灭菌后的接种针挑取生长正常的菌株至300ml的LB培养液中去，37℃环境下在震荡摇床中以200r/min转速培养6h得到一代种子。将培养好的一代种子培养基混匀。按3%的接种量转移到种子液发酵罐中，37℃培养24h得到二代种子液。根据相关研究[5]，采用分批流加补料的方式来进行发酵。因为用恒速流加葡萄糖具有防止发酵后期大肠杆菌营养物质供应不足的问题，产物利用率高，产物表达量高，在工业生产中广泛应用。将二级种子培养液以7%的接种量移入到发酵罐中，发酵过程中通入的洁净空气量为30L/min；PH控制为7.0左右；发酵生长的温度保持在37℃,培养9h，升温至42℃进行诱导,在初始葡萄糖消耗后,以5.3g/(L·h)的恒定速率流加400g/L的葡萄糖补料液，发酵一天后放罐进行下一步操作。经过发酵大规模增殖的重组大肠杆菌要经过细胞破碎后重组人干扰素α-2b才能以包涵体形式游离于发酵液中存在。的比例在沉淀中加入磷酸盐缓冲液搅拌混匀，洗涤后继续在5000rpm条件下离心10min，重复步骤两次保证沉淀洗涤充分。加入磷酸盐缓冲液充分摇匀后用高速剪切均质机破碎三次即可。再12000rpm离心10min得到沉淀，分别用洗涤液A和洗涤液B按照1：50（w/v）的比例各洗涤两次，每次洗完要12000rpm离心10min，收集到粗提包涵体沉淀。将沉淀与变性液按1:10（w/v）混匀4h后离心，收集上清液以进行下一步操作。DEAE-阴离子交换层析柱使用平衡缓冲液来平衡，然后上样，用洗涤液冲洗柱子直到平衡状态后逐步减少平衡缓冲液的量并逐步增加洗涤液的量，使层析柱形成线性梯度让层析介质中的蛋白质复性。复性后的蛋白质用洗涤缓冲液来进行洗脱。收集洗脱峰并低温保存，并分别加入10mmol/L的蛋氨酸和精氨酸作为保护剂[6]防止二聚体的形成。复性后先采用CM-阳离子交换层析柱上样。全部上样完后，以流动相平衡层析柱。用洗脱液进行梯度洗脱收集洗脱峰。将上一步操作的洗脱峰直接经过丙烯葡聚糖凝胶S-100层析，收集洗脱液。全车间按发酵车间、破碎车间、分离纯化车间来进行物料衡算根据《中国药典（2015年版）》与《生物工程工厂设计概论》一些基础参考生产数据如下：种子液发酵采用的发酵罐规格为15L，取填充系数75%，接种量3%。大规模采用的发酵罐规格为200L，取填充系数75%，接种量7%。发酵离心后去上清得到的干重菌体量按照0.033kg/L计算，破碎得到包涵体的重量按占菌体干重8%计算，平均蛋白回收率取51.2%[7][8][9]。蛋白表达量按照20mg/L。蛋白比活性1.0X108IU/mg。表3—1基础工艺指标表3713种子罐采用分批流加补料的方式发酵24小时，其中15h采用恒速流加葡萄糖补料液。使用实验室摇瓶培养的重组大肠杆菌按3%的接种量接种到15L填料系数75%的种子发酵罐中去，根据工艺配方与基础工艺指标计算发酵液物料情况：4.摇瓶种子液用量:3%×11.25L=0.3375L(按0.5L配制）5.蛋白胨用量：10g/L×0.5L+35g/L×9L=320g6.酵母提取物用量：5g/L×0.5L+20g/L×9L=182.5g7.NaCl用量：10g/L×0.5L+5g/L×9L=50g8.葡萄糖用量：5g/L×9L+400g/L×3L=1245g9.消泡剂用量：0.6g/L×0.5+1g/L×9=9.3g采用分批流加补料发酵一天，其中15h采用恒速流加葡萄糖补料。根据工艺配方与基础工艺指标计算发酵液物料情况：4.发酵种子液用量:7%×150L=10.5L（按11L配制）5.蛋白胨用量：10g/L×11L+35g/L×110L=3960g6.酵母提取物用量：5g/L×11L+20g/L×110L=2255g7.NaCl用量：10g/L×11L+5g/L×110L=660g8.葡萄糖用量：5g/L×110L+400g/L×30L=12550g9.消泡剂用量：0.6g/L×11L+1g/L×110L=116.6g3.1.2.3破碎车间相关物料计算首先计算发酵完成后发酵液、磷酸盐缓冲液、洗涤液、变性剂的使用量：1.倒灌后剩余发酵液体积：150L×99%=148.5L2.发酵液菌体量：148.5L×0.033kg/L=4.9kg3.磷酸盐缓冲液用量：4.9kg×20kg/L×3=294L(按300L配制）4.洗涤液A用量：4.9kg×50kg/L×2=490L（按500L配制）5.洗涤液B用量：4.9L×50kg/L×2=490L（按500L配制）6.包涵体蛋白量：4.9kg×8%=0.392㎏根据实际情况洗涤液A与洗涤液B按500L用量配制，磷酸缓冲盐溶液按300L用量配制，变性剂按4L用量配制计算需要的各溶质的量：1.KCl用量：74.55g/mol×2.7mmol/L×300L/1000=60.3855g2.脱氧胆酸钠用量:2%×300000ml=60000g3.洗脱缓冲液NaCl用量:58.44g/mol×13mmol/L×300L/1000=22.7916g4.磷酸二氢钾用量：136.09g/mol×2mmol/L×300L/1000=81.654g5.磷酸氢钠用量：84.01g/mol×10mmol/L×300L/1000=252.03g6.聚乙二醇辛基苯基醚用量:294.4g/mol×1mmol/L×500L/1000+294.4g/mol×2mmol/L×500L/1000=441.6g7.Tris-HCl用量：2×1.2g×500000ml/100+157.6g/mol×50mmol/L×4L/1000=12031.52g8.尿素总用量6g×500000ml/100+12g×500000ml/100=90000g9.盐酸胍用量：95.53g/mol×6mol/L×4L=2292.72g10.β-琉基乙醇用量：78.13g/mol×50mmol/L×4L/1000=15.626g11.损失包涵体量：392g×3%=11.76g3.1.2.4分离纯化车间相关物料计算填料树脂高度为柱高的90%，样品上样前应至少平衡3个柱体积，上样体积不超过柱体积的30%，所有层析操作洗脱液体积最多为1柱体积，阴离子层析柱填料再生用6mmol/L盐酸胍溶液清洗3个柱床体积，再用20%乙醇（用95%乙醇稀释配制）洗3个柱床体积。阳离子层析柱与丙烯葡聚糖层析柱填料再生用0.5mmol/L的NaOH与2mmol/L的NaCl洗3个柱床体积，再用20%乙醇（95%乙醇稀释配制）洗3个柱床体积。由附录1确定阴离子交换层析柱柱体积为14.6L，平衡缓冲液总用量43.8L(按44L配制复性缓冲液总用量43.8L(按44L配制洗脱缓冲液用量14.6L（按15L配制再生液总用量87.6L（按88L配制）。层析所用的磷酸盐缓冲液配制参考《中国药典（2015年版）》，计算阴离子交换层析操作相关物料衡算：0.6mol/L×44L=666718.8g2.氧化型谷胱甘肽配制用量612.63g/mol×0.3mmol/L×44/1000=8.0867g3.还原型谷胱甘肽配制用量307.323g/mol×3mmol/L×44/1000=40.56664g4.NaCl配制总用量：58.44g/mol×0.5mol/L×15L+58.44g/mol×2mmol/L×44L/1000=443.44272g5.保护剂配制总用量：22.3815g+26.13g=48.5115g(其中蛋氨酸用量为149.21g/mol×10mmol/L×15L/1000=22.3815g精氨酸用量为174.2g/mol×10mmol/×15L/1000=26.13g)6.NaOH总用量：0.0291mol/L×39.996g/mol×44L+0.0291mol/L×39.996g/mol×44L+0.5mmol/L×39.996g/mol×44L/1000=158690.09440g7.磷酸二氢钾用量：6.8g/L×44L+6.8g/L×44L+8.34g/L×15L=202085.1g8.磷酸氢二钾用量：0.87g/L×15L=13.05g由附录1确定阳离子交换层析柱层析柱柱体积为7.4L，平衡缓冲液总用量22.2L（按23L配制），洗脱缓冲液总用量7.4L（按8L配制），再生液总用量44.4L（按46L配制）。层析所用的磷酸盐缓冲液配制参考《中国药典》，计算阴离子交换层析操作相关物料衡算：1.磷酸二氢钾用量：8.34g/L×23L+8.34g/L×8L=1601.28g2.磷酸氢二钾用量：0.87g/L×23L+0.87g/L×8L=167.04g3.NaOH用量：39.996g/mol×0.5mmol/L×23L/1000=0.459954g4.NaCl用量：58.44g/mol×2mmol/L×23L/1000=2.68824g5.20%乙醇用量：7.4L×3=22.2L(按23L配制）由附录1确定丙烯葡聚糖层析柱柱体积为3.6L，平衡缓冲液总用量10.8L（按11L配制），洗脱缓冲液总用量3.6L（按4L配制），再生液总用量21.6L（按22L配制)。层析所用的磷酸盐缓冲液配制参考《中国药典》，计算丙烯葡聚糖层析操作相关物料衡算:1.磷酸二氢钾用量：8.34g/L×11L+6.8×4L=118.94g2.磷酸氢二钾用量：0.87g/L×11L=9.57g3.NaOH用量：39.996×0.5×11L/1000+39.996g/mol×0.1mol/L×0.0291L×(4000ml/100)=4.68114g4.NaCl用量：58.44g/mol×2mmol/L×11L/1000=1.28568g分离纯化阶段经过蛋白质变性、阴离子层析柱复性、阳离子层析柱纯化、丙烯葡聚糖层析柱纯化得到最终蛋白。综上，整个分离纯化车间物料衡算如下：1.6%交联琼脂糖用量：14.6L×90%+7.4L×90%=19.8L（按20L采购）2.丙烯葡聚糖凝胶用量：3.6L×903.78L的20%乙醇用95%乙醇进行稀释则消耗95%乙醇量为20%×(44+23+11）78L-16.42L=61.58L（按62L计算）5.目标蛋白表达量为：150L×20mg/L=3000mg=3g表3-2分离纯化间物料衡算表原液车间生产的物料最终进入灌装车间进行下一阶段。注射剂规格为1ml蛋白比活性为1.0×108IU，根据《中国药典（2015年版）》其生物学活性应为标示量的80%〜150%，每l㎎蛋白质比活性应不低于1.0X108IU，以发酵一次为一批，计算注射液灌装的物料衡算。1.过滤后进入灌装车间的活性蛋白量：3×（1-0.8%）=2.976g2.每支含有干扰素蛋白质量：6000000/1.0×108=0.06mg/支3.每罐纯化后的蛋白产量：20×150=3000mg4.每罐蛋白可生产注射剂的数量：3000mg/0.06mg=50000支5.年产1000万支注射剂所需发酵次数：10000000/50000=200次6.每5万支注射剂所需EDTA的量：50000支×0.4mg/1000=20g7.每5万支注射剂所需组氨酸的量：50000支×0.3mg/1000=15g8.每5万支注射剂所需磷酸氢二钾的量：50000支×0.866mg/1000=43.3g9.每5万支注射剂所需磷酸二氢钾量：50000支×0.538mg/1000=26.9g10.每5万支注射剂所需注射用水量：5000支×1ml=5000ml表3-3生产规格600万单位注射剂配液配方投料量重组干扰素α-2b重组干扰素α-2bEDTA组氨酸磷酸氢二钾磷酸二氢钾注射用水发酵间配备两个200L发酵罐轮换生产,每批次上罐发酵时间为一天，以全年生产200天计算。生产规格为600万IU的注射剂，年产量可达到1000万支干扰素的原液车间应该配套一间破碎间和一间分离纯化间。由前述的三项生产物料衡算计算结果整理得全厂生产物料衡算表，如下所示：表3—4全车间物料衡算表物料名称单位发酵一罐所需物料年产1000万支干扰素α-2b物料发酵液总量L4底料液总量L4流加液总量L3药瓶种子液总量L蛋白胨总量kg酵母提取物总量kgNaCl总量kg葡萄糖总量kg消泡剂用量kg磷酸盐缓冲液用量L4洗涤液A用量L4洗涤液B用量L4包涵体蛋白量kg变性剂用量LKCl用量g4脱氧胆酸钠kg4磷酸二氢钾kg4磷酸氢二钾kg磷酸氢钠kg聚乙二醇辛基苯基醚kgTris-HCl3尿素kg4盐酸胍kg5β-琉基乙醇g3氧化型谷胱甘肽g3还原型谷胱甘肽g3保护剂g3蛋氨酸g3精氨酸g3NaOH总用量kg95%乙醇L3EDTA总用量g组氨酸gLL44注射用水L53生产注射剂支75L/min30L/min无菌空气42℃诱导表达发酵罐工艺流程种子罐工艺流程37℃发酵增殖无菌空气图3-1发酵车间工艺流程图根据工艺,种子罐中的总液量G为11.25L。总重量：种子罐（306.5625g+174.9375g+46.6875g+943.3125g+8.865g+11.25L×1000g/L）/1000=12.73037㎏种子罐发酵液冷液平均温度为18℃,而种子罐发酵液平均温度为37℃比热容C＝4.18kJ/kg·℃。故耗热量：w1011.0459854kJ根据工艺,发酵液总重量：G=（3937.5g+2242.5g+652.5g+12547.5+115.8g+150L×1000g/L）发酵罐/1000=169.4958㎏4.18kJ/kg·℃。故耗热量：Q＝GCw(42℃-37℃)+GCw(37℃-18℃)＝169.4958㎏×4.18kJ/kg·℃2发酵罐发酵罐×(42℃-37℃)+169.4958㎏×4.18kJ/kg·℃×(37℃-18℃)＝17003.818656kJ根据工艺纯化水制备采用反渗透工艺遂不计算纯化水耗热，已知发酵一次注射用水总耗量为1989kg，设进水平均温度为18℃,注射用水出水平均温度99℃,则Q＝GCw（99℃-18℃)=1989kg×4.18kJ/kg·℃×81℃=673435.62kJ3注射用水已知灭菌蒸汽平均温度为120℃,种子罐与发酵罐总灭菌用水为220kg，发酵罐Q=（GC(100℃-18℃)+Gλ+GC(120℃-100℃)）/95%4灭菌w灭菌灭菌g=（220kg×4.18kJ/kg·℃×82℃+220kg×2258kJ/㎏+220kg×4.23kJ/kg·℃×20℃)/95%=621872.84kJ其中水的汽化热λ=2258kJ/kg，水蒸气的比热C=4.23kJ/kg·℃,η为蒸汽发生器g效率，取η=95%（《生物工程工厂设计概论》）。总=1011.0459854kJ+17003.818656kJ+673435.62kJ+621872.84kJ=1313323.3246414kJa12Vmax=1.8m³/h+0.36m³/h=2.1sda表3-5全车间无菌空气消耗衡算表发酵罐公其他耗量每小时最大用发酵罐公其他耗量每小时最大用每天耗量年耗/单罐通气量/（L/min）称容积/L/（m³/h）量/（m³/h）/（m³/dm³/a）G纯化=44kg+44kg+15kg+23kg+8kg+11kg设制冷前试剂平均温度为18℃,制冷后试剂平均温度为4℃,即分离纯化耗冷量：Q=GCw(18℃-4℃)=149kg×4.18kJ/kg.℃×14℃=8719.48kJ1纯化Q=GC(18℃-4℃)=98kg×4.18kJ/kg·℃×14℃=5734.96kJ2破碎w总=8719.48kJ+5734.96kJ=14454.44kJsa表3-6全车间冷却消耗衡算表名称每支产品消耗名称每支产品消耗kJ每小时平均用量kJ/h每天耗量kJ/d年耗kJ/a6化水，全车间用水量最终转换成原水用量来表示。W纯化用水=44L+44L+15L+44L+23L+8L+23L+11L+4L+11L+62L=289L综上全车间每生产一支干扰素成品的注射用水耗量：W=W+W+W+W=11.25L+150L+2发酵车间种子罐发酵罐2破碎车间洗涤剂缓冲液变性W=1989L/80%=2486.25L则每支干扰素成品注射用水量:W=（W+W+W）/50000=3每支干扰素成品耗用原水量:W=5060.9/50000=0.101218L/支表3-7全车间冷却消耗衡算表每支干扰素用水量L/支每小时平均用量/（L/h）每天耗量/（L/d）年耗/注射水纯化水表4-1GUJP系列发酵罐设备参数表项目类别项目类别规格参数项目类别规格参数公称容积搅拌功率填充系数搅拌转速设计压力通气量传感器配制工作压力罐体材料不锈钢SUS316L/SUS304结构方式落地式结构搅拌形式机械压迫式消泡桨消泡方式机械压迫式消泡桨灭菌方式夹套、罐内、阀门、过滤器发酵罐采购自连云港百仑生物反应器科技有限公司的BLBIO-200SJ-UIP型自动发酵表4-2BLBIO-200SJ-UIP发酵罐设备参数表项目类别规格参数项目类别规格参数公称容积搅拌功率填充系数搅拌转速径高比底部出料传感器配制设计压力罐体材料结构方式支腿或悬挂搅拌形式三层机械直叶搅拌桨消泡方式筒体尺寸进排气口尺寸灭菌方式夹套、罐内、阀门、过滤器罐盖提升罐盖提升力姆泰克电动提升净重范围500Kg4.1.3高速剪切均质机发酵后的大肠杆菌细胞采用高压匀浆法破碎根。据工艺需要采购自上海思峻机械设备有限公司的GRS2000/4型大肠杆菌破碎高速均质机，设备相关参数如下：表4-3GRS2000/4型大肠杆菌破碎高速均质机设备参数表项目类别项目类别规格参数项目类别规格参数每小时标准流量进出口尺寸马达功率输出转速材料采购自上海宸乔生物科技有限公司的Quikst系列产品，阴离子交换层析与阳离子层析的表4-4HAP全自动层析系统参数表项目类别项目类别规格参数项目类别规格参数单泵外形尺寸（mm）双泵外形尺寸（mm）），管路直径最大操作压力使用温度环境密封保护级别接液材质表4-5Quikst型层析柱设备参数表阴离子交换层析柱项目类别规格参数项目类别规格参数阳离子交换层析柱项目类别规格参数项目类别规格参数床层体积丙烯葡聚糖层析柱项目类别规格参数项目类别规格参数柱长床层体积表4-6层析冷柜设备参数表项目类别项目类别规格参数项目类别规格参数温度范围1℃~10℃外部尺寸（mm）隔板规格（mm）散热方式风冷散热表4-7层析填料参数表阴离子交换层析柱填料阴离子交换层析柱填料项目类别离子交换类型保质期阳离子交换层析填料项目类别规格参数项目类别规格参数规格参数DEAE-琼脂糖凝胶FF项目类别层析填料蛋白质吸附容量总离子交换容量规格参数弱阴离子CMCM-琼脂糖凝胶FF丙烯葡聚糖层析填料规格参数规格参数3蛋白等物质的纯化分离项目类别层析填料球蛋白分离范围层析填料蛋白质吸附容量总离子交换容量离子交换类型工作范围弱阳离子项目类别保质期保存温度灌装间设备均采购自上海纳丰机械设备有限公司的产品。根据物料计算选择QCL60表4-8QCL60型超声波洗瓶机参数表项目类别项目类别规格参数项目类别规格参数适合规格洗瓶澄明度合格率耗水量机器重量耗气量处理量表4-9NFASMR620隧道式热风循环灭菌烘箱设备参数表项目类别项目类别规格参数项目类别规格参数适用规格具体型号灭菌最高温度输送带有效宽度洁净度表4-10NFAG-200安瓿瓶自动灌封设备参数表项目类别规格参数项目类别规格参数最大成型深度最大成型深度冲载次数包装效率灌装容量包装材料耗气量耗水量生产过程中用到的纯化水与注射用水其制备设备均采购自深圳市科瑞环保设备有限公司的产品。选用该公司的CARRYCLEANKRM-DROS-10T型纯化水系统与CARRYCLEAN表4-11CARRYCLEANKRM-DROS