重庆江津长寿巴县等七校2023学年高三考前抢分（三）生物试题含解析

重庆江津长寿巴县等七校2023学年高三考前抢分（三）生物试题注意事项：1．答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号、考场号和座位号填写在试题卷和答题卡上。用2B铅笔将试卷类型（B）填涂在答题卡相应位置上。将条形码粘贴在答题卡右上角"条形码粘贴处"。2．作答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目选项的答案信息点涂黑；如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案。答案不能答在试题卷上。3．非选择题必须用黑色字迹的钢笔或签字笔作答，答案必须写在答题卡各题目指定区域内相应位置上；如需改动，先划掉原来的答案，然后再写上新答案；不准使用铅笔和涂改液。不按以上要求作答无效。4．考生必须保证答题卡的整洁。考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．下列有关生物学实验及研究的叙述正确的是()①盐酸在“低温诱导染色体数目变化”和“观察植物细胞有丝分裂”中的作用相同②经健那绿染液处理，可以使活细胞中的线粒体呈蓝绿色③用溴麝香草酚蓝水溶液能鉴定乳酸菌细胞呼吸的产物④探索淀粉酶对淀粉和蔗糖作用的专一性时，可用碘液替代斐林试剂进行鉴定⑤孟德尔的豌豆杂交实验中将母本去雄的目的是防止自花传粉⑥以人的成熟红细胞为观察材料可以诊断镰刀型细胞贫血症⑦紫色洋葱鳞片叶外表皮可用作观察DNA和RNA在细胞中分布的实验材料⑧调查血友病的遗传方式，可在学校内对同学进行随机抽样调查⑨最好用淀粉酶催化淀粉的实验探究pH对酶活性的影响A．两项 B．三项 C．四项 D．五项2．鸡的性别决定方式为ZW型，鸡的芦花羽对非芦花羽为完全显性，控制该相对性状的基因（A/a）位于Z染色体上，其中存在胚胎纯合致死现象｡下列相关叙述错误的是（）A．雌鸡只存在一种基因型和一种表现型B．雄鸡存在两种基因型时对应两种表现型C．非芦花雌鸡与芦花雄鸡杂交，子代中雄∶雌=2∶1D．若亲本杂交后子代雄∶雌为1∶1，则亲本雄鸡为纯合子3．对正常二倍体生物而言，以下哪种性状肯定能稳定遗传（不考虑变异）A．优良性状 B．隐性性状 C．显性性状 D．相对性状4．下列关于真核细胞中核酸的叙述，正确的是（）A．细胞中的核酸包括脱氧核苷酸和核糖核苷酸两大类B．姐妹染色单体上具有1个亲代和1个子代DNA分子C．翻译时转运RNA分子的磷酸基团端与相应的氨基酸结合D．半保留复制合成的子代DNA保留了亲代的全部遗传信息5．元素和化合物是组成细胞的物质基础，下列叙述错误的是（）A．核糖体、ATP和染色体中含有的五碳糖不都是核糖B．细胞内的无机盐主要以离子形式存在，具有维持细胞酸碱平衡的功能C．蛋白质和DNA具有多样性的共同原因是都具有不同的空间结构D．细胞中的微量元素如Fe、Mn、Zn、Cu等含量虽然很少，但功能上不可缺少6．艾弗里等人为了弄清转化因子的本质，进行了一系列的实验，如下图是他们所做的一组实验。有关说法正确的是（）A．比较实验一和实验三的结果，可说明转化因子就是DNAB．检测实验结果发现，实验二的培养皿中只存在一种菌落C．比较实验二和实验三的结果，可看出蛋白酶没有催化作用D．根据三个实验的结果，还无法确定转化因子的本质7．用PCR方法检测转基因植株是否成功导入目的基因时，得到以下电泳图谱，其中1号为DNA标准样液（Marker），10号为蒸馏水。PCR时加入的模板DNA如图所示。据此做出分析不合理的是A．PCR产物的分子大小在250至500bp之间B．3号样品为不含目的基因的载体DNAC．9号样品对应植株不是所需的转基因植株D．10号的电泳结果能确定反应体系等对实验结果没有干扰8．（10分）我国科学家屠呦呦因发现青蒿素而获得诺贝尔奖。青蒿细胞中青蒿素的合成途径如下图实线方框内所示，酵母细胞也能够产生合成青蒿酸的中间产物FPP（如虚线方框内所示）。科学家向酵母菌导入相关基因培育产青蒿素酵母菌。下列叙述正确的是（）A．过程①需要逆转录酶催化B．培育产青蒿素酵母菌，必须导入FPP合成酶基因和ADS酶基因C．由于ERG9酶等的影响，培育的产青蒿素酵母合成的青蒿素仍可能很少D．在野生植物中提取青蒿素治疗疟疾，体现了生物多样性的间接价值二、非选择题9．（10分）浙江青田的稻鱼共生系统被联合国教科文组织列入全球重要农业文化遗产。在该生态系统中，一方而，鱼为水稻除草、除虫、翻松泥土，其排泄物可成为肥料：另一方而，水稻和杂草为鱼提供了食物来源和庇护场所，形成了稻鱼共生的生态循环系统。这不仅减少了农作物对农药化肥的依赖，也保证了农田的生态平衡。下图为稻鱼共生系统的部分结构模型，回答下列问题。（l）图中的A所示生物表示生态系统成分中的___。（2）生态系统的能量流动是指____。（3）在研究能量流动时，可通过标志重捕法调查鲤鱼的种群密度。为保证调查结果的准确，取样时应注意___，在2hm2范围内，第一次捕获标记100条，第二次捕获80条，其中有标记的5条，该种群密度是____条/hm2。（4）生态农业是利用生态系统中____和___的基本原理。使生态系统中的物质和能量被分层次多级利用。10．（14分）某XY型性别决定的植物，其花色有紫花、红花和白花，且受两对等位基因控制(相关基因用A/a、B/b表示，考虑X、Y染色体的同源区段)，A和B同时存在时为紫花，无B但有A时表现为红花，无A时表现为白花。现有两个纯合品系甲、乙，甲表现为紫花，乙表现为白花，每个品系中都有雌株雄株。某人用一株甲品系的雌株与另一株乙品系的雄株进行杂交实验，F1无论雌雄都是紫花，让F1雌雄株随机交配，统计F2的表现型及比例为紫花∶红花∶白花=9∶3∶4，且开红花的只有雄株，其他花色雌雄株都有。（不考虑其他变异）回答下列问题：（1）某同学认为这两对基因的遗传遵循基因的自由组合定律，其判断依据是________________。（2）经分析，对于A/a、B/b所在染色体的合理假设是：A/a位于_____________、B/b位于___________；根据假设，该植物自然种群中关于花色的基因型有________种。（3）现已证明A/a位于常染色体上，请根据已有的实验材料，进一步设计最简单的实验证明B/b所在染色体的假设的合理性(要求写出杂交方案、预期实验结果及结论)。杂交方案：____________________________________预期结果及结论：____________________________11．（14分）纳豆和腐乳都是豆类发酵品，用纳豆杆菌发酵大豆制作纳豆的流程原理与腐乳的制作相似。纳豆杆菌能分泌纳豆激酶等。回答下列问题（1）纳豆制作的原理是___________________________。（2）纳豆激酶能够水解血栓中水不溶性的纤维蛋白，所以具有溶解血栓的作用。纳豆杆菌的筛选和分离常用到由磷酸盐缓冲液、纤维蛋白和琼脂配制而成的乳白色的纤维蛋白培养基。从培养基营养组成的角度来看，其中的纤维蛋白的作用是__________________________。若培养基上出现_________________________，说明含有纳豆杆菌。（3）提纯纳豆激酶可用于制备药物。为提取纯化纳豆激酶，可进行下列实验：①接种具有高纤溶活性的菌落到液体发酵培养基。37℃，摇床振荡，发酵3天。②收集发酵液，离心，分层，取_____________作为提取纳豆激酶的材料。③透析法分离：将上述离心所得样品装人透析袋，置于25mmo/L磷酸盐缓冲液中透析，以便达到__________________________的目的。④凝胶色谱纯化：将透析液进行柱层析，用____________进行洗脱，试管连续收集。⑤为了确认试管收集液中是否含有纳豆激酶，还要__________________________。12．前不久，某生物公司的百白破疫苗检验不符合规定。为生产高效价疫苗和简化计划免疫程序，科学家研制出基因工程乙肝－百白破（rHB－DTP）四联疫苗，经各项检测均通过rHB－DTP四联疫苗制检规程的要求。其有效成分是乙肝病毒表面抗原、百日咳杆菌、白喉杆菌和破伤风杆菌的四种类毒素。请分析回答：（1）为获取百日咳杆菌类毒素的基因，可从百日咳杆菌的细胞中提取对应mRNA，在______的作用下合成双链cDNA片段，获得的cDNA片段与百日咳杆菌中该基因碱基序列_____（填“相同”或“不同”）。（2）由于乙肝病毒表面抗原的基因序列比较小，且序列已知，获得目的基因可采用________，然后通过PCR技术大量扩增____________，此技术的前提是已知一段____________的核苷酸序列以便合成。（3）把目的基因导入受体细胞时，科学家采用了改造后的腺病毒作为载体，写出你认为科学家选它的理由_________________________________________________。（写出2点）（4）研究发现，如果将白喉杆菌类毒素20位和24位的氨基酸改变为半胱氨酸，免疫效果更好，请写出此种技术的基本流程_____________。（5）实验证明，一定时间内间隔注射该疫苗3次效果更好，其主要原因是体内产生的_____细胞数量增多，当同种抗原再次侵入人体时二次免疫的特点是_____。

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、C【解题分析】

1.盐酸在“观察植物细胞有丝分裂”和“低温诱导植物染色体数目变化”中的作用都是对组织进行解离，使细胞分散开来；2.显色反应中所选材料本身要无色或色浅，以免对显色反应结果有遮盖；3.调查遗传病的发病率应在人群中随机调查，而调查遗传方式应在患者家系。【题目详解】①盐酸在“观察植物细胞有丝分裂”和“低温诱导植物染色体数目变化”中的作用相同，都是对组织进行解离，使细胞分散开来，①正确；②经健那绿染液处理，可以使活细胞中的线粒体呈蓝绿色，②正确；③乳酸菌细胞呼吸的产物是乳酸，溴麝香草酚蓝水溶液能鉴定二氧化碳，③错误；④碘遇淀粉变蓝色，但是不能检测蔗糖及其水解产物，所以不能用碘液代替斐林试剂，④错误；⑤孟德尔的豌豆杂交试验中将母本去雄的目的是防止自花授粉，⑤正确；⑥镰刀型细胞贫血症患者红细胞形状改变，以人的成熟红细胞为观察材料可以诊断镰刀型细胞贫血症，⑥正确；⑦紫色洋葱鳞片叶外表皮具有紫色的液泡，因此不可用作观察DNA和RNA在细胞中分布的实验材料，⑦错误；⑧调查血友病的遗传方式，应该在患者的家系中调查，⑧错误；⑨在较强酸性或碱性的条件下酶会失活，但酸会使淀粉水解，⑨错误；故选C。【题目点拨】本题借助生物实验为背景，考查学生对教材知识和实验设计的理解、分析能力。解题关键是熟悉教材相关实验的原理、选材、方法步骤和结果分析。2、B【解题分析】

鸡的性别决定方式为ZW型，性染色体组成为ZZ的为雄性，性染色体组成为ZW的为雌性。鸡的芦花羽对非芦花羽为完全显性，其中存在胚胎纯合致死现象，可能为显性纯合致死，也可能为隐性纯合致死。【题目详解】A、雌鸡的基因型为ZAW或ZaW，无论是显性纯合致死还是隐性纯合致死，雌鸡都只存在一种基因型和一种表现型，A正确；B、雄鸡的基因型为ZAZA、ZAZa、ZaZa，若为隐性纯合致死时，存在两种基因型，但只有一种表现型，B错误；C、群体中存在非芦花雌鸡时，说明纯合致死的为显性纯合子，则芦花雄鸡的基因型为ZAZa，非芦花雌鸡（ZaW）与芦花雄鸡（ZAZa）杂交，子代中ZAZa∶ZaZa∶ZAW（致死）∶ZaW=1∶1∶1∶1，所以雄∶雌=2∶1，C正确；D、无论是显性纯合子致死还是隐性纯合子致死，只要亲本雄性为杂合子，子代中必然有一种基因型的雌性会死亡，使子代雄∶雌=2∶1，所以若子代雄∶雌为1∶1，则亲本雄鸡应为纯合子，D正确。故选B。3、B【解题分析】

在杂交实验中，只有纯合体自交后代不发生性状分离，能够稳定遗传，优良性状不一定是纯合体，A错误；隐性性状都为纯合体，可以稳定遗传，B正确；显性性状不一定是纯合体，C错误；相对性状的基因型不一定是纯合子，D错误。故选：B。4、D【解题分析】

1、核酸的基本单位是核苷酸；2、DNA分子为半保留复制；新和成的DNA分子，含有原来DNA分子的一条链和一条新合成的链。DNA复制时间：有丝分裂和减数分裂间期DNA复制条件：模板（DNA的双链）、能量（ATP水解提供）、酶（解旋酶和连结酶等）、原料（游离的脱氧核苷酸）DNA复制过程：边解旋边复制。DNA复制特点：半保留复制。DNA复制结果：一条DNA复制出两条DNA。DNA复制意义：通过复制，使亲代的遗传信息传递给子代，使前后代保持一定的连续性。【题目详解】A、核苷酸是核酸的基本单位，细胞中的核酸包括脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）两大类，A错误；B、DNA分子为半保留复制，每条姐妹染色单体含有的双链DNA分子都含有亲代DNA分子的一条链和一条新合成的链，B错误；C、翻译时转运RNA分子的核糖的3'端（羟基端）与相应的氨基酸结合，C错误；D、半保留复制合成的子代DNA和亲代DNA碱基序列一致，保留了亲代的全部遗传信息，D正确。故选D。5、C【解题分析】

1、核糖体、ATP中含有的五碳糖都是核糖，染色体中含有的五碳糖是脱氧核糖。2、无机盐离子的作用有：（1）维持细胞和生物体的生命活动有重要作用；（2）维持细胞的酸碱平衡；（3）维持细胞的渗透压；（4）无机盐对维持细胞的形态和功能有重要作用等。3、蛋白质结构多样性与组成蛋白质的氨基酸的种类、数目、排列顺序及蛋白质的空间结构有关，根本原因是DNA分子多样性，多肽中乙肽键数=氨基酸数目-蛋白质结构多样性决定功能多样性。【题目详解】A、核糖体、ATP中含有的五碳糖都是核糖，染色体中含有的五碳糖是脱氧核糖，A正确；B、细胞内的无机盐主要以离子形式存在，缓冲对具有维持细胞酸碱平衡的功能，B正确；C、蛋白质具有多样的空间结构，而DNA具有特定的双螺旋结构，C错误；D、细胞中的微量元素如Fe、Mn、Cu、Zn等含量虽然很少，但不可缺少，D正确。故选C。6、B【解题分析】

肺炎双球菌转化实验包括格里菲斯的体内转化实验和艾弗里体外转化实验，其中，格里菲斯体内转化实验证明，S型细菌体内存在着某种转化因子能将R型细菌转化成S型细菌，肺炎双球菌体外转化实验能证明DNA是遗传物质。【题目详解】A、实验一和实验三中加入的RNA酶和蛋白酶都不能将S型菌的DNA分解，此时在两个培养皿中R型菌可实现转化，由于实验缺乏对照，故不能说明转化因子就是DNA，A错误；B、实验二的培养皿中由于加入了DNA酶，在DNA酶的作用下，S型菌的DNA被分解了，R型菌不能实现转化，故培养基上只存在一种菌落，B正确；C、比较实验二和实验三的结果，只能说明蛋白酶不能催化DNA的水解，但不能说明蛋白酶没有催化作用，C错误；D、根据三个实验的结果，能确定转化因子的本质是DNA，D错误。故选B。7、B【解题分析】

PCR过程中，可以通过设计特定的引物来扩增特定的DNA片段。4～9号是转基因植株，理论上应包含目的基因。9号PCR结果不包含250～500bp片段，所以不是所需转基因植株。【题目详解】A、PCR过程中，可以通过设计特定的引物来扩增特定的DNA片段。4～9号是转基因植株，理论上应包含目的基因，结合2号野生型和10号蒸馏水组的结果，推测包含目的基因的片段大小应为250～500bp，A正确；

B、3号PCR结果包含250～500bp片段，应包含目的基因，B错误；

C、9号PCR结果不包含250～500bp片段，所以不是所需转基因植株，C正确；

D、10号放入蒸馏水，可排除反应体系等对结果的干扰，由图可知，10号的电泳结果能确定反应体系等对实验结果没有干扰，D正确。

故选B。8、C【解题分析】

分析题图：图中实线方框中表示青蒿细胞中青蒿素的合成途径，青蒿素的合成需要FPP合成酶和ADS酶等。虚线方框表示酵母细胞合成FPP合成酶及固醇的过程，酵母细胞只能合成FPP合成酶，不能合成ADS酶，因此其不能合成青蒿素。【题目详解】A、过程①是FPP合成酶基因转录形成mRNA，需要RNA聚合酶，A错误；B、由图可知，酵母细胞能合成FPP合成酶，但不能合成ADS酶和CYP71AV1酶，即酵母细胞缺乏ADS酶基因和CYP71AV1酶基因．因此，要培育能产生青蒿素的酵母细胞，需要向酵母细胞中导入ADS酶基因、CYP71AV1酶基因，B错误；C、图示可知，FPP转化成固醇需要ERG9酶催化，故由于ERG9酶等的影响，培育的产青蒿素酵母合成的青蒿素仍可能很少，C正确；D、在野生植物中提取青蒿素治疗疟疾，体现了生物多样性的直接价值，D错误。故选C。二、非选择题9、分解者生态系统中能量的输入、传递、转化、散失的过程随机取样800能量多级利用物质循环再生【解题分析】

生态系统的组成成分包括生产者、消费者、分解者和非生物的物质和能量。其中分解者可以将动植物的遗体残骸和动物的排遗物分解为无机物。在各种估算种群密度的方法中都必须要取样随机，尽量减少实验误杀等。【题目详解】（1）观察图中A的作用为将水稻、稻飞虱和鲤鱼的部分物质分解为无机物，并将分解的物质返回无机环境，因此可以推测A为分解者；（2）能量流动是指生态系统中能量的输入、传递、转化、散失的过程；（3）标志重捕法属于估算种群密度的一种方法，为了减少实验误差取样时要保证随机取样；根据标志重捕法的计算原理可以推测该范围内种群的密度大约为100×80÷5÷2=800条/hm2；（4）生态农业是利用生态系统中能量多级利用和物质循环再生的基本原理。【题目点拨】该题的易错点为，标志重捕法计算种群密度时根据计算公式所得的数据为种群数量，要计算种群密度还需要比上该种群所在地方的面积。10、F2的表现型及比例为紫花：红花：白花9：3：4为9：3：3：1的变式常染色体上X染色体上或者位于X染色体和Y染色体的同源区段15或21选择甲品系的雄株与多株乙品系的雌株进行杂交，单独统计每个杂交组合中F1的表现型若子一代中出现红花雄株，则B/b只位于X染色体上；若所有杂交组合的子一代全部为紫花，则B/b位于X染色体和Y染色体的同源区段【解题分析】

A和B同时存在时为紫花，无B但有A时表现为红花，无A时表现为白花，可以判定A_B_为紫花，A_bb为红花，aaB_和aabb为白花；F2的表现型及比例为紫花∶红花∶白花=9∶3∶4，且开红花的只有雄株，其他花色雌雄株都有，在不同的性别中表现型不同，所以肯定有一对基因位于性染色上。【题目详解】（1）根据F2的表现型及比例为紫花∶红花∶白花=9∶3∶4为9∶3∶3∶1的变式，可以判定这两对基因位于两对同源染色体上，遵循基因自由组合定律。（2）根据F2中红花全为雄性，而决定红花的是b基因，所以Bb基因位于X染色体上，同时两对基因遵循自由组合定律，所Aa位于常染色体上，并且F2中出现了白花，所以F1中双亲必然含Aa；B/b基因有两种可能：位于X染色体上或者XY的同源区段，下面进行讨论：①如果位于X染色体上，由于在F2代中雄性中出现了红花，而雌性没有红花，所以B/b基因在雌雄中的基因型是XBY和XBXb，结合A的基因型，双亲基因型是AaXBY和AaXBXb，二者交配结果见表：1XBXB1XBXb1XBY1XbY1AA9紫3红2Aa1aa4白紫花∶红花∶白花=9∶3∶4，并且只有雄性才有红花，符合题意。②如果位于XY的同源区段，由于在F2代中雄性中出现了红花，而雌性没有红花，所以F1雌性基因型是XBXb，雄性基因型只能是XBYb，和Aa基因组合，雌性基因型是AaXBXb，雄性基因型是AaXBYb，二者交配结果见下表：1XBXB1XBXb1XBYb1XbYb1AA9紫3红2Aa1aa4白紫花∶红花∶白花=9∶3∶4，并且只有雄性才有红花，符合题意。所以A/a位于常染色体上、B/b位于X或者XY的同源区段上；如果B/b位于X染色体上，因此共有基因型（XBY、XbY、XBXB、XBXb、XbXb），A基因在常染色体上有基因型（AA、Aa、aa）共3种，因此基因型的种类有3×5=15种；如果位于XY的同源区段，则B/b组成的基因型有（1XBXB、XBXb、XbXb、XBYB、XbYB、XBYb、XbYb），共7种，所以组成基因型有3×7=21种。（3）根据题干中，“两个纯合品系甲、乙，甲表现为紫花，乙表现为白花，每个品系中都有雌株雄株”，如果B基因位于X染色体上，则甲的基因型是AAXBXB和AAXBY，乙的基因型aaXbY、aaXbXb、aaXBY、aaXBXB；如果B基因位于XY同源区段上，则甲的基因型是AAXBXB和AAXBYB，乙的基因型有aaXbYb、aaaXBYB和aaXbXb、aaXBXB。为判断B/b所在染色体，所以选择雄性甲株和多株雌性乙株进行交配，如果B位于X染色体上，则杂交子代基因型会出现为AaXbY，表现为雄性白色；如果B位于XY染色体的同源区段上，则杂交子一代全部为紫花。【题目点拨】本题考查了基因在染色体上的位置和自由组合的定律的知识，需要考生根据题干中F2的表现型及比例为紫花∶红花∶白花=9∶3∶4，且开红花的只有雄株这个信息判断基因在染色体上的位置，同时结合自由组合定律进行分析。11、纳豆杆菌等微生物分泌的蛋白酶能将豆类中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸充当碳源和氮源，提供能源物质（较大）溶解圈上清液去除/置换样品中分子量较小的杂质（25mmol/L）磷酸（盐）缓冲液添加适量收集液到纤维蛋白培养基上（或添加适量收集液到含有血栓的溶液里）【解题分析】

1、腐乳的制作原理：以豆腐为原料利用毛霉等微生物分泌出各种酶，促使豆腐坯中的蛋白质分解成营养价值高的氨基酸和一些风味物质。有些氨基酸本身就有一定的鲜味，腐乳在发酵过程中也促使豆腐坯中的淀粉转化成酒精和有机酸，同时还有辅料中的酒及香料也参与作用，共同生成了带有香味的酯类及其他一些风味成分，从而构成了腐乳所特有的风味。腐乳在制作过程中发酵，蛋白酶和附着在菌皮上的细菌慢慢地渗入到豆腐坯的内部，逐渐将蛋白质分解，大约经过三个月至半年的时间，松酥细腻的腐乳就做好了，滋味也变得质地细腻、鲜美适口。2、培养基的成分包括：碳源、氮源、无机盐和水，有的需要生长因子等。碳源分为无机碳源和有机碳源，无机碳源如二氧化碳，有机碳源如葡萄糖，碳源是构成生物体细胞的物质和一些代谢产物，有些是异养生物的能源物质；氮源分为无机氮源（铵盐、硝酸盐等）和有机氮源（尿素、牛肉膏等），合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物。3、血红蛋白的提取和分离：（1）样品处理：洗涤，用生理盐水洗涤，低速离心，直至上清液中没有黄色；（2）血红蛋白释放：加入蒸馏水和甲苯，细胞破碎释放血红蛋白；（3）分离：低速离心，分成4层，第三层红色透明液体为血红蛋白水溶液层，分出该层；（4）透析：放入透析袋，出去分子量较小的杂质；（5）过凝胶色谱柱收集纯蛋白。【题目详解】（1）根据题意可知，用纳豆杆菌发酵大豆制作纳豆的流程原理与腐乳的制作相似，因此纳豆制作的原理是：利用纳豆杆菌等微生物分泌的蛋白酶能将豆类中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。（2）根据培养基的成分可知，纤维蛋白既含有碳元素也含有氮元素，因此可以作为碳源和氮源使用，提供能源物质，由于纳豆杆菌能分泌纳豆激酶，纳豆激酶能够水解水不溶性的纤维蛋白，在乳白色的固体培养基上如果存在纳豆杆菌，则可以在培养基上形成较大的溶解圈。（3）纳豆激酶的化学本质属于蛋白质，因此提纯纳豆激酶的方法即提纯蛋白质的方法。实验步骤：①接种具有高纤溶活性的菌落到液体发酵培养基。37℃，摇床振荡，发酵3天。②收集发酵液，离心，分层，取上清液作为提取纳豆激酶的材料。③透析法分离：将上述离心所得样