第三节 显色反应及测定条件的选择

第三节显色反应及测定条件的选择第1页，课件共13页，创作于2023年2月

第三节显色反应及测量条件选择1、影响显色反应的因素显色剂发生显色反应的要求：（1）选择性好：一种显色剂只与一种被测组分显色。（2）灵敏度高。（3）有色化合物组成恒定，性质稳定。（4）若显色剂本身有色，应与生成的有色化合物颜色差别大。（5）重现性好。

第二章分光光度计第2页，课件共13页，创作于2023年2月

第三节显色反应及测量条件选择1、影响显色反应的因素显色剂分类：（1）无机显色剂：灵敏度、选择性不高；（2）有机显色剂：颜色鲜明，选择性，灵敏度高，种类多，应用广。

第二章分光光度计第3页，课件共13页，创作于2023年2月

第三节显色反应及测量条件选择1、影响显色反应的因素影响显色反应因素：（1）用量：总原则遵循显色反应尽量完全，一般需要加入过量显色剂；（2）酸度：显色剂大多数是有机弱酸，酸度变化，显色剂的颜色也会发生变化。（3）温度：显色反应一般在室温条件下进行，有时需要加热以促进显色反应。

第二章分光光度计第4页，课件共13页，创作于2023年2月

第三节显色反应及测量条件选择1、影响显色反应的因素影响显色反应因素：（4）显色时间：显色时间即显色反应完成所需时间；稳定时间：显色后物质保持稳定时间。（5）溶剂：溶剂类型不同，生成的显色物质不同，物质颜色也不同。

第二章分光光度计第5页，课件共13页，创作于2023年2月第6页，课件共13页，创作于2023年2月

第三节显色反应及测量条件选择2、共存离子干扰及消除方法（1）干扰原因①共存离子本身有颜色；②共存离子与显色剂或被测组分反应，使显色剂和被测组分降低，结果偏低；③共存离子与显色剂生成有色化合物或沉淀，结果偏高；④虽然生成无色化合物，但大量消耗显色剂，干扰测定。

第二章分光光度计第7页，课件共13页，创作于2023年2月

第三节显色反应及测量条件选择2、共存离子干扰及消除方法（2）消除方法①控制酸度，只使被测离子显色，干扰离子不显色；②加入掩蔽剂（注意使用的掩蔽剂的pH值）；③改变干扰离子价态；④选择适当波长：吸光度最大，干扰最小。⑤选择合适的参比溶液。⑥分离干扰离子：电解法、沉淀法、溶剂萃取法、离子交换法分离干扰离子

第二章分光光度计第8页，课件共13页，创作于2023年2月

第三节显色反应及测量条件选择3、测量条件选择（1）选择合适的测定波长：

利用光谱扫描，兼顾“吸光度最大，干扰最小”的选择，选择物质的最大吸收波长

作为测定波长。

第二章分光光度计第9页，课件共13页，创作于2023年2月怎样选择合适波长通过测定被测物质对不同波长的光的吸收强度（吸光度），以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，得出该物质在测定波长范围的吸收曲线，在吸收曲线中，通常选用最大吸收波长进行物质含量的测定。第10页，课件共13页，创作于2023年2月

第三节显色反应及测量条件选择3、测量条件选择（2）吸光度范围

吸光度应控制在0.2-0.8之间，以保证较高的准确度。

控制方法可采用：

①改变取样量，稀释、改变或控制待测溶液浓度；

②选择不同厚度的吸收池，以调节吸光度A的大小。

第二章分光光度计第11页，课件共13页，创作于2023年2月

第三节显色反应及测量条件选择3、测量条件选择（3）参比溶液的选择

选择合适的参比溶液调节仪器零点，消除溶剂、试剂对入射光的吸收，造成误差。

溶剂参比：共存组分对测定波长的光无吸收，只是溶剂对测定波长的光有吸收。

试剂参比：显色剂或其它试剂对测定波长的光有吸收，应使用试剂参比，与试样做平行操作，以消除试剂干扰。

第二章分光光度计第12页，课件共13页，创作于2023年2月

第三节显色反应及测量条件选择3、测量条件选择（3）参比溶液的选择

试样参比：如果试