共研磨技术对难溶性药物的增溶作用

共研磨技术对难溶性药物的增溶作用

近年来，联合研磨技术是一种将超细粉碎技术与包状技术或固体分散技术结合起来的新技术。青黛(NaturalIndigo)是一种良好的传统中药材,具有清热解毒、凉血定惊作用。用于瘟病、发斑、胸痛咳血、口疮、喉痹、小儿惊痫1药品、试剂与标准品LC-1500高效液相色谱仪(日本JΛSCO公司);行星式磨机(美国Fritsch公司);旋转蒸发仪(日本BūCHI公司);恒温真空干燥箱(上海一恒科学仪器设备厂)。青黛(镇江存仁堂药业,批号020801);靛玉红标准品(中国药品生物制品检定所,批号717-200204);聚维酮(PVP,规格K30,上海国药集团化学试剂有限公司);聚乙二醇(PEG,规格4000,上海国药集团化学试剂有限公司);羟丙甲纤维素(HPMC,规格E6-Lv,型号2910,黏度6cp;规格E-4M,型号2910,黏度4000cp上海卡乐康公司赠送);乙醇(色谱纯江苏汉邦科技);聚乙烯醇(PVA,规格17-88,美国COOK公司);所有试剂均采用分析纯。22.1乙醇提取称取青黛50.0g,先用水渗漉法提去水溶性成分,剩余物干燥后置圆底烧瓶中,以10倍量95%乙醇回流提取3次,4h/次,合并提取液1500ml,减压浓缩至黏稠膏状液体,70℃水浴上挥去乙醇,40℃真空干燥24h即得。2.2亲水性载体的制备将青黛醇提物(0.5g)分散于PEG4000(0.5g)中,温度70℃,自然冷却至室温,等量分为3份,分别与PVP,PVA,HPMC等亲水性载体(4g)混合均匀,选用行星式磨机超细粉碎2h,过80目筛即得。2.3vpk30的制备称取青黛醇提物(0.5g)无水乙醇复溶后,加入PVPK30(4.5g),减压浓缩至溶液呈半固体状,取出在约70℃水浴上挥去乙醇,黏稠物置真空恒温干燥箱中24h,脆化后取出,粉碎,过80目筛即得。2.4研磨eg4000将青黛醇提物(0.5g)70℃分散于PEG4000(0.5g)中,自然冷却后,置于研钵中,加入HPMC(4g)混合,强烈研磨2h后,过80目筛即得。2.5红玉红测定采用HPLC法测定。色谱条件:色谱柱HanbangC2.6含量测定法称取分散体约1.0g(含过量的靛玉红),放置于装有500ml蒸馏水的玻璃瓶中,100r/min恒速搅拌,温度(37±0.5)℃,定时取样5ml溶出液经4.5μm微孔滤膜过滤,精密吸取滤液1.0ml,甲醇定容至5.0ml,用HPLC法测定含量。33.1hplc测量的建立3.1.1进样测定精密称取25mg的对照品,配制成10μg/ml的甲醇对照品贮备液,精密吸取对照液0.1,0.5,1.5,2.5,3.5,5ml置于50ml量瓶中,加甲醇稀释成靛玉红浓度分别为0.02,0.1,0.3,0.5,0.7,1μg/ml的溶液,分别进样测定,记录峰面积。以峰面积3.1.2准确度和精密度日内精密度实验:取1μg/ml对照品溶液,日内连续测定5次,计算得峰面积日间精密度实验:取1μg/ml对照品溶液,进样1次/d,共进样5次测定,计算得峰面积3.1.3浓度为不同浓度的溶液精密量取对照品贮备液5.0,1.0,0.5ml,置10ml量瓶中,按处方比例分别加入相应量的PVP,PEG4000,HPMC(E-6lv和E-4M)以及已知含量的提取液,加甲醇定容后,振摇5min,配成高、中、低(5.0,1.0,0.5μg/ml)3种不同的浓度的溶液。分别进样测定,记录色谱图,计算得载体中的平均回收率分别为100.3%,99.8%,101.69%,100.7%,101.2%3.2配方的结构性和稳定性见图1。从图1可以看出,与普通研磨混合物比,共研磨技术和共沉淀法均能显著地提高靛玉红在去离子水中的溶解度。但二者改善难溶性药物溶出的机理有所差别。PVP共沉淀法原理是PVP在溶液中成网状结构,药物分子进入PVP分子网状骨架中而呈分子状态分散,共蒸发过程中不易形成分子结晶,使药物形成高能量的非结晶型无定形物,从而增加了药物的溶出HPMC通常有60%以上的羟基未被取代,HPMC通过羟基在分子内和分子间形成氢键,所以它具有较高的结晶性和难溶性。一般情况下药物与HPMC作用只能在纤维素表面进行,只要其结晶结构保持不变,药物就很难进入结晶结构的内部。但在超细粉碎条件下,纤维素原料在这种强烈持久的磨碎、挤压的机械力作用下,产生比氧化、水解的纤维素更具有强大反应能力的机械降解产物,分子内与分子间的氢键部分断裂靛玉红整个分子基本是由一个大的π共轭体系构成,整个分子比较稳定,它的分子内部O12与O22与相邻两侧的H之间存在着较强的氢键。氢键对于这两种分子的稳定性起着非常重要的作用。它以分子内氢键可形成一个六元环和一个七元环,降低了分子内环的张力,这些促使分子体系总能量降低,在水中的溶解度非常低从图1还可以发现,共沉淀物中的靛玉红在水中迅速溶解,随后其溶解度逐渐下降。实验中我们也观察到共沉淀物加入水中迅速形成澄清的红色溶液,但随着时间的增加,溶液逐渐浑浊,在瓶壁上附有细小的暗红色粒状物质,主要由于药物溶解瞬间以亚稳态的小颗粒分散,而随着粒子间的聚集,粒度增加而逐渐从溶液中析出,在水中的溶解度也逐渐下降,而共研物曲线随时间逐渐上升,实验中观察到共研物加入水后缓慢溶解,在70min左右完全溶解成澄清的红色溶液并保持到实验结束,现象与结果吻合。据Hasegawa等3.3不同载体的共研物对线性共研磨体的促溶作用超细共研磨物中亲水载体的取代基对药物溶出起重要影响,羟基是其中重要因素,为了考察羟基对增溶能力的影响,作者选用了具有不同羟基数目的亲水载体,分别是PVP,PVA,HPMC。根据表1,HPMC制备的共研磨物对靛玉红在去离子水中的溶出有较好的效果,而PVPK30效果较差。主要是在超细共研磨物中,羟基对药物与亲水载体的相互作用有重要影响此外,作者考察了载体的黏度对共研物促溶特性影响,选用了具有相同取代度的HPMCE-4M和E-6Lv制备超细共研磨物,进行溶解度实验,测定去离子水中靛玉红的溶解度。见图6。结果显示低黏度的E-6LV的共研物对靛玉红的促溶作用要优于高黏度的E-4M。亲水性载体的适当黏度具有阻碍分子的聚集、抑制晶核的形成以及微晶的长大等作用,但黏度较高则阻滞了药物的释放,因而LIE-PEG4000-E-4M共研物未能显示出理想的增溶效果。3.4其他因素Nozaw