临床常见标本的细菌学检验课件

第二十六章

临床常见标本的细菌学检验第二十六章

临床常见标本的细菌学检验2标本采集二培养方法三检验程序四检查单据一第一节临床标本采集及检验程序2标本采集二培养方法三检验程序四检查单据一第一节临床标本采3(一)检查单据随时登记姓名、性别、年龄、临床诊断以及是否已用抗生素；及时检查标本类型、来源、送检目的。3(一)检查单据4（二）标本采集无菌操作血液、脑脊液、穿刺液等注意严格无菌；粪便、肛拭子、咽拭子等注意避免杂菌污染；盛放容器原则上应置于无菌容器内；容器灭菌应采用干热、湿热或紫外线照射。4（二）标本采集5（二）标本采集采集时间和部位抗菌药物使用之间，选择合适部位；送检时间和方法采集后应当立即送检可将标本放入转运培养基中，部分标本可放4℃保存；脑膜炎和淋病奈瑟军需35~37℃保温送检。5（二）标本采集6（二）标本采集安全防护防止污染、传播和自身感染；及时检验和报告收到标本后，及时登记、检验并报告有关结果；国家规定的传染病检验结果，及时汇报并送上级部门。6（二）标本采集7（三）培养方法培养基增菌肉汤、血平板、麦康凯平板、伊红美蓝平板、巧克力平板、新耶尔森菌培养基、沙保培养基等等培养方法需氧培养厌氧培养二氧化碳培养7（三）培养方法8（三）培养方法区分污染菌和病原菌观察菌落是否在划线上加做无菌对照结合培养细菌的生长特点对照判断注意培养时间涂片染色检查8（三）培养方法（四）检验程序9标本选择采集（保存运送）观察、前处理直接涂片报告快速检验报告分离培养（需、厌氧、CO2培养）可疑菌落(必要时先做培养)涂片检查生化试验血清学鉴定药敏试验动物试验增菌(需氧、厌氧、CO2培养)报告（四）检验程序9标本选择采集（保存运送）观察、前处理直接报告10血液标本尿液标本粪便标本痰液标本脑脊液标本生殖道标本穿刺液、引流液标本脓液及分泌物标本第二节临床常见标本的细菌学检验10血液标本脑脊液标本第二节临床常见标本的细菌学检验11血液的采集采血指征发热（≧38℃）或低温（

≦36℃）；寒战、白细胞增多（>10

×109/L）、核左移；粒细胞减少、血小板减少、CRP升高；皮肤、粘膜出血、昏迷、多器官衰竭。11血液的采集采血指征12血液的采集皮肤消毒70%乙醇30s；10%聚维酮碘或1%~2%碘酊，由内向外大于3cm；穿刺后用70%乙醇脱碘；对碘过敏患者，70%乙醇脱碘60s干燥后采血。12血液的采集皮肤消毒13血液的采集采血部位（肘静脉）疑似细菌性心内膜炎：肘动脉或股动脉疑似骨髓炎或伤寒：病灶或髂前（后）上棘取骨髓1ml13血液的采集采血部位（肘静脉）14血液的采集静脉穿刺可戴手套固定静脉，严禁触碰穿刺点；取血后勿换针头，直接注入血培养瓶；轻轻颠倒混匀以防凝血；采血量成人10~20ml/瓶；儿童1~5ml/瓶。14血液的采集静脉穿刺15血液的采集采血时间和次数使用抗菌药物之前即刻采血；24h内采集2~3次，多次采血宜更换部位；入院前2周内接受抗菌药：选用中和培养瓶；间歇性寒战或发热：发病前0.5~1h采血；15血液的采集采血时间和次数16血液的采集特殊患者采血方式间歇性寒战或发热发病前0.5~1h采血；急性发热可疑菌血症10min内采集2份；接种于需氧和厌氧瓶；非急性感染可疑菌血症24h内采集2或3份；采血间隔不应小于3h；急性细菌性心内膜炎在1~2h内采集3份；若24h后阴性，再采集3份以上。16血液的采集特殊患者采血方式非急性感染可疑菌血症17血液的采集特殊患者采血方式亚急性细菌性心内膜炎24h内采集3份血；每次采血间隔大于1h；若24h后阴性；再采集2份以上血；不明原因发热24h内采集2~3份血标本；每次间隔大于1h；若24~36h培养阴性；再采集2份以上血标本。17血液的采集特殊患者采血方式不明原因发热18血液的运送采集后立即送检可短时间室温保存切勿冷藏18血液的运送采集后立即送检（四）检验程序19标本选择采集（保存运送）观察、前处理直接涂片报告快速检验报告分离培养（需、厌氧、CO2培养）可疑菌落(必要时先做培养)涂片检查生化试验血清学鉴定药敏试验动物试验增菌(需氧、厌氧、CO2培养)报告（四）检验程序19标本选择采集（保存运送）观察、前处理直接报血液标本常见的病原菌

20血液标本常见的病原菌 20血液检验的临床意义疖、痈、和脓肿继发的败血症金葡、溶血性链球菌尿路、胆道、胃肠道炎症粘膜败血症大肠埃希菌、变形杆菌、产气肠杆菌急性细菌性心内膜炎金葡、溶血性链球菌、脑膜炎奈瑟菌21血液检验的临床意义疖、痈、和脓肿继发的败血症21亚急性细菌性心内膜炎草链、肠球菌化脓性心包炎金葡、溶血性链球菌、肺链血液检验的临床意义22肝硬化败血症金葡、铜绿烧伤后败血症金葡、铜绿亚急性细菌性心内膜炎血液检验的临床意义2223血液标本尿液标本粪便标本痰液标本第二节临床常见标本的细菌学检验23血液标本第二节临床常见标本的细菌学检验24尿液的采集采集指征尿频、尿急、尿痛、排尿困难、耻骨上压痛肉眼脓尿或血尿不明原因发热，无局部感染留置导尿管的患者出现发热膀胱排空功能受损，有尿潴留24尿液的采集采集指征25尿液的采集采集原则用药前采集尿液在膀胱至少停留4h25尿液的采集采集原则26尿液的采集采集容器不与尿液发生反应的惰性材料广口、容积≧50ml洁净、无菌、加盖、封闭盖子容易开启不含防腐剂和抑菌剂26尿液的采集采集容器27尿液的采集采集方法清洁中段尿最常用的尿培养标本收集方法耻骨上膀胱穿刺评估膀胱内细菌感染的“金标准”27尿液的采集采集方法28尿液的采集采集方法直接导尿、小儿收集包、留置导尿管28尿液的采集采集方法29尿液的运送采集后立即送检室温保存不超过2h4℃保存不超过8h淋病奈瑟菌培养不能冷藏29尿液的运送采集后立即送检（四）检验程序30标本选择采集（保存运送）观察、前处理直接涂片报告快速检验报告分离培养（需、厌氧、CO2培养）可疑菌落(必要时先做培养)涂片检查生化试验血清学鉴定药敏试验动物试验增菌(需氧、厌氧、CO2培养)报告（四）检验程序30标本选择采集（保存运送）观察、前处理直接报31尿液的检验菌落计数定量接种尿液培养标本根据细菌在平板上的生长情况定量报告每毫升尿液中所含有的细菌数（CFU/ml）31尿液的检验菌落计数尿液标本常见的病原菌

32尿液标本常见的病原菌 32尿液检验的临床意义（清洁中段尿）33尿液检验的临床意义（清洁中段尿）3334血液标本尿液标本粪便标本痰液标本第二节临床常见标本的细菌学检验34血液标本第二节临床常见标本的细菌学检验35粪便的采集采集指征体温>38.5℃，重症腹泻，血便、脓便；未经抗菌药物治疗的持续性腹泻；来自疫区的患者。35粪便的采集采集指征36粪便的采集采集容器（与尿液类似）不与尿液发生反应的惰性材料；广口、不宜使用纸盒；洁净、无菌、加盖、封闭，盖子容易开启；不含防腐剂和抑菌剂。36粪便的采集采集容器（与尿液类似）37

粪便的采集采集方法自然排便法采集脓血、粘液部分1~3g，液体取絮状物1~3ml；置无菌容器内送检；直肠拭子法适于排便困难或婴幼儿患者；湿润的棉拭子插入肛门，成人4~5cm，儿童2~3cm。37粪便的采集采集方法38粪便的运送立即送检，室温保存不超过2h；不能及时送检的标本可保存于4~6

℃；培养艰难梭菌的标本应保存于-20℃以下；pH7.0磷酸盐甘油或转运培养基保存不超过24h。38粪便的运送立即送检，室温保存不超过2h；39粪便的保存改良Cary-Blair培基不能运送培养志贺菌的标本；直肠活检标本容器内盛无菌蒸馏水以防沉淀；保存培养弯曲菌和弧菌的标本，需加CaCl2。39粪便的保存改良Cary-Blair培基不能运送培养志贺菌（四）检验程序40标本选择采集（保存运送）观察、前处理直接涂片报告快速检验报告分离培养（需、厌氧、CO2培养）可疑菌落(必要时先做培养)涂片检查生化试验血清学鉴定药敏试验动物试验增菌(需氧、厌氧、CO2培养)报告（四）检验程序40标本选择采集（保存运送）观察、前处理直接报粪便标本常见的病原菌

41粪便标本常见的病原菌 41粪便检验的临床意义肠道致病菌霍乱弧菌-霍乱，志贺菌-细菌性痢疾，伤寒沙门菌-伤寒；食物中毒沙门菌、弯曲菌、葡萄球菌、副溶血弧菌。42粪便检验的临床意义肠道致病菌4243血液标本尿液标本粪便标本痰液标本第二节临床常见标本的细菌学检验43血液标本第二节临床常见标本的细菌学检验44痰液的采集采集指征下呼吸道感染者可有发热、咳嗽和咳痰可伴有胸痛、气急甚至呼吸困难，肺部可闻及湿罗音；X线检查肺部有炎性浸润或胸腔积液严重可致感染性休克和呼衰。44痰液的采集采集指征45痰液的采集和运送采集方法自然咳痰法支气管镜采集法防污染毛刷采集法支气管肺泡灌洗法胃内采痰法小儿取痰法45痰液的采集和运送采集方法46痰液的采集和运送标本运送立即送检；室温保存不超过2h；作结核分枝杆菌培养的痰液可置入4℃冰箱保存。46痰液的采集和运送标本运送（四）检验程序47标本选择采集（保存运送）观察、前处理直接涂片报告快速检验报告分离培养（需、厌氧、CO2培养）可疑菌落(必要时先做培养)涂片检查生化试验血清学鉴定药敏试验动物试验增菌(需氧、厌氧、CO2培养)报告（四）检验程序47标本选择采集（保存运送）观察、前处理直接报痰液标本常见的病原菌

48痰液标本常见的病原菌 48痰液检验的临床意义急性细菌性鼻炎、鼻前庭炎、鼻腔脓肿、鼻中隔脓肿金葡、化脓性链球菌和铜绿慢性副鼻窦炎需氧菌和厌氧菌混合感染急性副鼻窦炎肺炎链球菌49急性咽炎链球菌痰液检验的临床意义急性细菌性鼻炎、鼻前庭炎、鼻腔脓肿、鼻中隔痰液检验的临床意义几乎每一份标本都是有菌的；分离出来的细菌却不一定是病原菌；有时病原菌受到抑制而检测不出来；应当加强微生物学工作者与临床医师之间的沟通。50痰液检验的临床意义5051小结（临床常见标本的细菌学检验）临床标本采集及检验程序检查单据、标本采集、培养方法、检验程序临床常见标本的细菌学检验血、尿、便、痰51小结（临床常见标本的细菌学检验）52标本采集二培养方法三检验程序四检查单据一第一节临床标本采集及检验程序52标本采集二培养方法三检验程序四检查单据一第一节临床标本53(一)检查单据随时登记姓名、性别、年龄、临床诊断以及是否已用抗生素；及时检查标本类型、来源、送检目的。53(一)检查单据54（二）标本采集无菌操作血液、脑脊液、穿刺液等注意严格无菌；粪便、肛拭子、咽拭子等注意避免杂菌污染；盛放容器原则上应置于无菌容器内；容器灭菌应采用干热、湿热或紫外线照射。54（二）标本采集55（二）标本采集采集时间和部位抗菌药物使用之间，选择合适部位；送检时间和方法采集后应当立即送检可将标本放入转运培养基中，部分标本可放4℃保存；脑膜炎和淋病奈瑟军需35~37℃保温送检。55（二）标本采集56（二）标本采集安全防护防止污染、传播和自身感染；及时检验和报告收到标本后，及时登记、检验并报告有关结果；国家规定的传染病检验结果，及时汇报并送上级部门。56（二）标本采集57（三）培养方法培养基增菌肉汤、血平板、麦康凯平板、伊红美蓝平板、巧克力平板、新耶尔森菌培养基、沙保培养基等等培养方法需氧培养厌氧培养二氧化碳培养57（三）培养方法58（三）培养方法区分污染菌和病原菌观察菌落是否在划线上加做无菌对照结合培养细菌的生长特点对照判断注意培养时间涂片染色检查58（三）培养方法（四）检验程序59标本选择采集（保存运送）观察、前处理直接涂片报告快速检验报告分离培养（需、厌氧、CO2培养）可疑菌落(必要时先做培养)涂片检查生化试验血清学鉴定药敏试验动物试验增菌(需氧、厌氧、CO2培养)报告（四）检验程序59标本选择采集（保存运送）观察、前处理直接报60血液标本尿液标本粪便标本痰液标本脑脊液标本生殖道标本穿刺液、引流液标本脓液及分泌物标本第二节临床常见标本的细菌学检验60血液标本脑脊液标本第二节临床常见标本的细菌学检验61血液的采集采血指征发热（≧38℃）或低温（

≦36℃）；寒战、白细胞增多（>10

×109/L）、核左移；粒细胞减少、血小板减少、CRP升高；皮肤、粘膜出血、昏迷、多器官衰竭。61血液的采集采血指征62血液的采集皮肤消毒70%乙醇30s；10%聚维酮碘或1%~2%碘酊，由内向外大于3cm；穿刺后用70%乙醇脱碘；对碘过敏患者，70%乙醇脱碘60s干燥后采血。62血液的采集皮肤消毒63血液的采集采血部位（肘静脉）疑似细菌性心内膜炎：肘动脉或股动脉疑似骨髓炎或伤寒：病灶或髂前（后）上棘取骨髓1ml63血液的采集采血部位（肘静脉）64血液的采集静脉穿刺可戴手套固定静脉，严禁触碰穿刺点；取血后勿换针头，直接注入血培养瓶；轻轻颠倒混匀以防凝血；采血量成人10~20ml/瓶；儿童1~5ml/瓶。64血液的采集静脉穿刺65血液的采集采血时间和次数使用抗菌药物之前即刻采血；24h内采集2~3次，多次采血宜更换部位；入院前2周内接受抗菌药：选用中和培养瓶；间歇性寒战或发热：发病前0.5~1h采血；65血液的采集采血时间和次数66血液的采集特殊患者采血方式间歇性寒战或发热发病前0.5~1h采血；急性发热可疑菌血症10min内采集2份；接种于需氧和厌氧瓶；非急性感染可疑菌血症24h内采集2或3份；采血间隔不应小于3h；急性细菌性心内膜炎在1~2h内采集3份；若24h后阴性，再采集3份以上。66血液的采集特殊患者采血方式非急性感染可疑菌血症67血液的采集特殊患者采血方式亚急性细菌性心内膜炎24h内采集3份血；每次采血间隔大于1h；若24h后阴性；再采集2份以上血；不明原因发热24h内采集2~3份血标本；每次间隔大于1h；若24~36h培养阴性；再采集2份以上血标本。67血液的采集特殊患者采血方式不明原因发热68血液的运送采集后立即送检可短时间室温保存切勿冷藏68血液的运送采集后立即送检（四）检验程序69标本选择采集（保存运送）观察、前处理直接涂片报告快速检验报告分离培养（需、厌氧、CO2培养）可疑菌落(必要时先做培养)涂片检查生化试验血清学鉴定药敏试验动物试验增菌(需氧、厌氧、CO2培养)报告（四）检验程序69标本选择采集（保存运送）观察、前处理直接报血液标本常见的病原菌

70血液标本常见的病原菌 70血液检验的临床意义疖、痈、和脓肿继发的败血症金葡、溶血性链球菌尿路、胆道、胃肠道炎症粘膜败血症大肠埃希菌、变形杆菌、产气肠杆菌急性细菌性心内膜炎金葡、溶血性链球菌、脑膜炎奈瑟菌71血液检验的临床意义疖、痈、和脓肿继发的败血症71亚急性细菌性心内膜炎草链、肠球菌化脓性心包炎金葡、溶血性链球菌、肺链血液检验的临床意义72肝硬化败血症金葡、铜绿烧伤后败血症金葡、铜绿亚急性细菌性心内膜炎血液检验的临床意义7273血液标本尿液标本粪便标本痰液标本第二节临床常见标本的细菌学检验73血液标本第二节临床常见标本的细菌学检验74尿液的采集采集指征尿频、尿急、尿痛、排尿困难、耻骨上压痛肉眼脓尿或血尿不明原因发热，无局部感染留置导尿管的患者出现发热膀胱排空功能受损，有尿潴留74尿液的采集采集指征75尿液的采集采集原则用药前采集尿液在膀胱至少停留4h75尿液的采集采集原则76尿液的采集采集容器不与尿液发生反应的惰性材料广口、容积≧50ml洁净、无菌、加盖、封闭盖子容易开启不含防腐剂和抑菌剂76尿液的采集采集容器77尿液的采集采集方法清洁中段尿最常用的尿培养标本收集方法耻骨上膀胱穿刺评估膀胱内细菌感染的“金标准”77尿液的采集采集方法78尿液的采集采集方法直接导尿、小儿收集包、留置导尿管78尿液的采集采集方法79尿液的运送采集后立即送检室温保存不超过2h4℃保存不超过8h淋病奈瑟菌培养不能冷藏79尿液的运送采集后立即送检（四）检验程序80标本选择采集（保存运送）观察、前处理直接涂片报告快速检验报告分离培养（需、厌氧、CO2培养）可疑菌落(必要时先做培养)涂片检查生化试验血清学鉴定药敏试验动物试验增菌(需氧、厌氧、CO2培养)报告（四）检验程序80标本选择采集（保存运送）观察、前处理直接报81尿液的检验菌落计数定量接种尿液培养标本根据细菌在平板上的生长情况定量报告每毫升尿液中所含有的细菌数（CFU/ml）81尿液的检验菌落计数尿液标本常见的病原菌

82尿液标本常见的病原菌 82尿液检验的临床意义（清洁中段尿）83尿液检验的临床意义（清洁中段尿）8384血液标本尿液标本粪便标本痰液标本第二节临床常见标本的细菌学检验84血液标本第二节临床常见标本的细菌学检验85粪便的采集采集指征体温>38.5℃，重症腹泻，血便、脓便；未经抗菌药物治疗的持续性腹泻；来自疫区的患者。85粪便的采集采集指征86粪便的采集采集容器（与尿液类似）不与尿液发生反应的惰性材料；广口、不宜使用纸盒；洁净、无菌、加盖、封闭，盖子容易开启；不含防腐剂和抑菌剂。86粪便的采集采集容器（与尿液类似）87

粪便的采集采集方法自然排便法采集脓血、粘液部分1~3g，液体取絮状物1~3ml；置无菌容器内送检；直肠拭子法适于排便困难或婴幼儿患者；湿润的棉拭子插入肛门，成人4~5cm，儿童2~3cm。87粪便的采集采集方法88粪便的运送立即送检，室温保存不超过2h；不能及时送检的标本可保存于4~6

℃；培养艰难梭菌的标本应保存于-20℃以下；pH7.0磷酸盐甘油或转运培养基保存不超过24h。88粪便的运送立即送检，室温保存不超过2h；89粪便的保存改良Cary-Blair培基不能运送培养志贺菌的标本；直肠活检标本容器内盛无菌蒸馏水以防沉淀；保存培养弯曲菌和弧菌的标本，需加CaCl2。89粪便的保存改良Cary-Blair培基不能运送培养志贺菌（四）检验程序90标本选择采集（保存运送）观察、前处理直接涂片报告快速检验报告分离培养（需、厌氧、CO2培养）可疑菌落(必要时先做培养)涂片检查生化试验血清学鉴定药敏试验动物试验增菌(需氧、厌氧、CO2培养)报告（四）检验程序90标本选择采集（保存运送）观察、前处理直接报粪便标本常见的病原菌

91粪便标本