何首乌不同组分单次给药对小鼠肝毒性量-时-毒关系的影响

何首乌不同组分单次给药对小鼠肝毒性量-时-毒关系的影响

何首乌最初出现在开宝草本植物中。这是蓼科植物的几种方式，包括虎耳根、苦、甜、涩、热、肝、心、肾经。解毒、消瘀、润肠排便。1材料表面1.1gonum排汗何首乌饮片购自亳州市鲁康药材站(批号:20090430),经鉴定为蓼科植物何首乌PolygonummultiflorumThunb.的干燥块根,按2005年版《中国药典》何首乌项下检查,符合各项规定。何首乌水提组分(批号:20100326)、何首乌醇提组分(批号:20100401)均由本实验室提取制备;何首乌水提组分和醇提组分含生药量分别为2.46g·mL1.2天冬氨酸氨基转移酶试剂丙氨酸氨基转移酶(ALT)试剂,批号:20100327,天冬氨酸氨基转移酶(AST)试剂,批号:20100327,均购自南京建成生物科技有限公司。1.3实验动物昆明种小鼠,雌雄各半,健康适龄,体重18~22g,山东大学实验动物中心提供,合格证号:SCXK(鲁)20090001。1.4运行分析仪器HH-S恒温水浴锅,T-9601DDL-5低速冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂),德国贝尔560全自动生化分析仪,UV-2100紫外分光光度计,AR2130电子天平。2方法2.1不同组成的提取和制备2.1.1制何首乌水提取物2.1.2序言醇提取组分的制备2.2剂量配置依据急性毒性实验结果按含生药量计算,小鼠灌胃何首乌水提组分和醇提组分的最大耐受量(MTD)为98.4g·kg2.3不同点顺序分组取小鼠,雌雄各半,按体重和性别随机分为21组,每组10只,按不同时间点依次分为0(即正常组),何首乌水提组分0.5,1,2,4,6,8,12,24,48,72h组;何首乌醇提组分0.5,1,2,4,6,8,12,24,48,72h组。按25mL·kg2.4不同组成的独特药物对大鼠肝脏毒性的“剂量-毒性”关系的研究取小鼠,雌雄各半,按体重和性别随机分为11组,每组10只,即正常组、何首乌水提组分和醇提组分各5个剂量组。按25mL·kg2.5统计方法数据用3结果3.1不同组成的独特药物对大鼠肝脏毒性的“时间毒性”关系的研究3.1.1一般情况下3.1.2影响大鼠血清alt和ast的影响3.1.3影响大鼠器官指数的影响3.2不同组成的独特药物对大鼠肝脏毒性的“剂量-毒性”关系的研究3.2.1一般情况下3.2.2生剂量计算3.2.2.1按生药量计算,何首乌水提组分30.75,17.25,9.75,5.5,3.0g·kg3.2.2.2生药量计算,何首乌醇提组分24.5,14.25,8.5,5.25,3g·kg3.2.3影响大鼠器官指数的影响4风味木对小鼠肝毒性“时-时-毒”关系的影响何首乌作为临床滋补肝肾的常用中药,临床应用广泛,其复方制剂已广泛用于慢性肝炎、肝纤维化等方面治疗,但在临床应用中观察到何首乌可引起肝损害,甚至诱发急性肝衰竭,而对于何首乌肝脏损害的毒理学研究并不多。《本草正义》中记载“首乌,专入肝肾,补养真阴,且味固甚厚,稍兼苦涩,性则温和。”可见临床ADR报道与本草记载其益肝作用不符。因此,为了减少临床不良反应,更安全合理地使用何首乌,了解其口服毒性特点及机制,对其进行口服整体毒性研究具有重要意义。本实验对何首乌不同组分单次给药致小鼠肝毒性“量-时-毒”关系进行了观察和评价。研究结果发现:何首乌不同组分对肝脏均具有毒性。对何首乌不同组分致小鼠肝毒性“时-毒”关系研究显示:小鼠单次灌胃30.75g·kg何首乌引起肝脏损伤的理论机制可能涉及以下几个方面本实验仅对何首乌不同组分单次给药对小鼠肝毒性“量-时-毒”关系进行了初步研究,但究竟是哪一种毒性成分及其致毒机制并不十分明确。近年来常有使用何首乌及其制剂而引起药物性肝损害的临床报道,患者出现肝炎、药物性肝损害、氨基转移酶升高及黄疸,肝组织活检证实为急性肝损害,停药后肝功能可恢复正常取何首乌饮片500g,加10倍量水,加热提取3次,每次1.5h,16层纱布滤过,合并滤液,浓缩至所需浓度取何首乌饮片500g,加9倍量60%乙醇加热回流提取2次,每次66min,16层纱布滤过,合并滤液,减压回收乙醇,浓缩至所需浓度小鼠灌胃何首乌水提组分2~4h,醇提组分1~2h后多数小鼠出现怠动、安静、活动减少,部分小鼠出现腹泻、毛色不华等毒性症状。何首乌水提组分给药后0.5h,血清ALT、AST值均有不同程度的升高,与正常组比较有非常显著性差异(P<0.01);在药后4h血清ALT、AST均达到高峰,毒性持续时间均约达24h。何首乌醇提组分给药后0.5h,血清ALT、AST值均有不同程度的升高,与正常组比较有非常显著性差异(P<0.01);在药后2h血清ALT、AST均达到高峰,毒性持续时间均约达48h。结果见图1和图2。3.1.3.1何首乌水提组分给药4h后小鼠即可出现肝脏明显肿大,肝指数升高,其中4~6h肝脏指数升高较为明显;给药后小鼠胸腺、脾脏指数与给药前相比变化不明显,结果见表1。3.1.3.2何首乌醇提组分给药2h后小鼠即可出现肝脏明显肿大,肝指数升高,其中2~4h肝脏指数升高较为明显;给药后小鼠胸腺、脾脏指数与给药前相比变化不明显,结果见表2。小鼠灌胃何首乌水提组分4h,