中药制剂含量测定技术-气相色谱法

PRINCIPLEANDINSTRUMENTCOMPOSITIONOFGASCHROMATOGRAPHY气相色谱法的原理和仪器构成案例导入气相色谱法检测血液中酒精含量酒后驾车是导致交通事故的重要危险因素之一。统计发现，即使在少量饮酒的状态下，交通事故的危险度也可达到未饮酒状态的2倍左右。对路面驾驶者的血液中酒精含量的监测能够有效减少酒后驾车引起的交通事故的发生。除了现场快检方法外，快速且能精准定量驾驶者血液中酒精浓度的方法也至关重要交管部门依据我国公共安全行业标准《GA/T842-2019血液酒精含量的检验方法》，采用顶空气相色谱法，以叔丁醇为内标物，FID为检测器，对血液中乙醇含量进行测定，该法具有法庭证据效力气相色谱法如何进行中药制剂中目标成分的测定?案例导入气相色谱法检测血液中酒精含量气相色谱仪由哪些部分组成？对于不同组件的温度要求有何不同？为什么？中药制剂含量测定技术——气相色谱法一、概述气相色谱法是以气体为流动相（载气），带动气化后的供试品进入色谱柱，多组分实现分离后，最后由检测器记录色谱信息的色谱分析方法本法适用于具有适当的挥发性、且在操作温度下具有良好的稳定性的化合物的含量测定。局限之处在于对挥发性差、遇热易分解破坏及不具挥发性的物质则难以分析中药制剂含量测定技术——气相色谱法

根据峰面积进行定量计算以气体为流动相（载气）升温使供试品气化，由载气带入色谱柱各组分在固定相与载气间作用不同，在色谱柱中移动速度不同，从而得到分离再依次被载气带入检测器，将各组分的浓度转换为电信号变化并记录成色谱图气相色谱法在中药制剂分析中主要用于含挥发油及其他挥发性组分的含量测定，还可用于中药及其制剂中含水量、含醇量的测定和农药残留量的检测等气相色谱法的含量测定方法有内标法、外标法、面积归一化法和标准溶液加入法。《中国药典》一部多采用内标法测定含量含量测定方法中药药味代表中药制剂气相色谱内标法冰片西瓜霜润喉片、冰硼散、麝香舒活搽剂等樟脑麝香舒活搽剂、十滴水软胶囊等薄荷脑麝香舒活搽剂、川贝枇杷糖浆等莪术油保妇康栓等中药制剂含量测定技术——气相色谱法二、仪器组成与工作原理

1.仪器组成气相色谱仪由气流控制系统、进样系统、分离系统、检测系统和数据处理系统等组成。中药制剂含量测定技术——气相色谱法

2.仪器构造与功能（1）气流控制系统包括气源、气体净化装置、气体流速控制和测量装置等常用载气有氮气、氦气、氢气、氩气等，空气一般作为辅助气，要求纯度高于99.9%气流控制系统是一个连续运行的密闭管路，载气由高压阀释放出来后经减压阀、压力表、净化器、气体流量调节阀、转子流量计、气化室、色谱柱、检测器，最后排出整个系统中药制剂含量测定技术——气相色谱法（2）进样系统气相色谱的进样系统包括进样器、气化室和温度控制装置气化室的作用是将液体或固体样品瞬间气化为蒸汽中药制剂含量测定技术——气相色谱法进样方式包括手动进样、自动进样和顶空进样。手动进样使用的注射器是尖头的微量注射器，有别于高效液相色谱的扁头注射器。手动进样或自动进样时，进样口温度应高于柱温30~50℃，进样量一般不超过数微升，采用毛细管柱时，一般应分流以免过载（3）分离系统气相色谱仪的核心部分，包括色谱柱、柱室和柱温箱色谱柱按柱内径的大小和长度，可分为填充柱和毛细管柱。毛细管柱的材质为玻璃或石英，内壁经涂渍或交联固定液，柱长一般在5-60米中药制剂含量测定技术——气相色谱法柱温箱是控制色谱柱温度的装置。柱温应精确控制在±1℃，且波动每小时不超过0.1℃。温度控制系统分为恒温控制和程序升温两种（4）检测系统浓度型检测器：热导检测器TCD、电子捕获检测器ECD等质量型检测器：氢火焰离子化检测器FID、火焰光度检测器FPD等中药制剂含量测定技术——气相色谱法气相色谱检测系统由检测器、微电流放大器等部件组成。检测器将流出色谱柱的载气中被测组分的浓度或质量转化为电信号的变化（5）数据分析和处理系统由放大器、记录仪、积分仪和色谱工作站等组成。色谱工作站接收处理经放大的供试品浓度或质量信号，打印出操作条件，由积分仪给出分析结果中药制剂含量测定技术——气相色谱法链接未来岗位中药制剂中有效成分或特征性指标成分含量的测定对于评价中药质量的优劣具有重要意义，同时也是药品质量检验中的关键环节。本讲内容既是知识体系中的重点内容，也是岗位工作中的重要技能作为一名药品检验人员，须牢固树立“质量第一、安全操作”的意识，牢固掌握气相色谱仪的组成结构与各组件的功能，正确操作仪器，确保检验结果的真实可靠小结气相色谱法的原理和常用测定方法气相色谱仪的仪器组成气相色谱仪各系统的结构与功能思考题从原理、含量测定法、仪器组成以及在中药制剂含量测定中的应用等几个方面，对比气相色谱法和高效液相色谱法的异同。CONTENTDETERMINATIONTECHNOLOGYOFTRADITIONALCHINESEMEDICINEPREPARATIONS–GASCHROMATOGRAPHYINTERNALSTANDARDMETHOD中药制剂含量测定技术——气相色谱内标法案例导入气相色谱法测定十滴水软胶囊中樟脑和桉油精的含量本品是由樟脑、干姜、大黄、小茴香、肉桂、辣椒和桉油加工而成的软胶囊采用气相色谱法进行含量测定，每粒含樟脑和桉油精的量应符合规定测定法配制环己酮内标溶液，再分别取樟脑对照品和桉油精对照品，精密加入内标溶液，吸取1µl注入气相色谱仪，计算校正因子。再配制供试品溶液。吸取1µl，注入气相色谱仪，测定，即得案例中提到了内标物和校正因子，分别是何意义?案例导入气相色谱法测定十滴水软胶囊中樟脑和桉油精的含量运用气相色谱内标法如何计算十滴水软胶囊中樟脑和桉油精的含量？中药制剂含量测定技术——气相色谱法一、概述气相色谱法的定量分析方法有内标法、外标法、面积归一化法以及内标法加校正因子法等《中国药典》一部收载的中药制剂多采用内标法测定含量主要介绍气相色谱内标法的定量依据、内标物选择原则、测定方法步骤以及应用实例

1.定量依据二、气相色谱内标法

根据待测组分与内标物的峰面积之比与其浓度比在一定浓度范围内成线性关系，对组分进行含量测定。选用与检测器相对应的纯物质作内标物，对照品溶液和供试品溶液中分别加入相同量的内标溶液，在相同条件下分别测定内标物和待测组分的峰面积，从而进行定量计算中药制剂含量测定技术——气相色谱法

2.测定方法内标法加校正因子法（内标对比法）内标物选取原则：理化性质与待测组分相近；不存在与样品中，且不与样品中的组分发生化学反应；与待测组分能够完全分离，但又不能相距太远；与待测物的峰面积比为0.7-1.3为宜中药制剂含量测定技术——气相色谱法本法中引入了相对校正因子f，

f是指某组分i与内标物s的绝对校正因子之比。内标物不得与待测组分为相同物质，一般是根据检测器的种类选择内标物向含有待测组分的对照品溶液中加入内标物，则校正因子为内标物的峰面积AS比浓度CS与对照品溶液的峰面积AR比浓度CR之比中药制剂含量测定技术——气相色谱法对照品溶液供试品溶液在相同条件下，将一定量的内标物加入到供试品溶液中，则校正因子为此时内标物的峰面积AS’比浓度CS与供试品溶液的峰面积AX比浓度CX之比由于在相同色谱条件下，待测组分与内标物的峰面积之比与其浓度比在一定浓度范围内成线性关系，所以已知对照品中待测组分的峰面积和浓度以及内标物的峰面积和浓度，供试品中待测组分的峰面积以及内标物的峰面积和浓度，就可以求出供试品溶液的浓度，进而计算出供试品溶液中待测组分的含量中药制剂含量测定技术——气相色谱法

3.测定步骤对照品溶液配制按规定取对照品，用相应溶液溶解，加入内标溶液，再次溶解稀释成一定浓度，进样，测得峰面积并记录供试品溶液配制按各品种项下要求，精密称取供试品，配成溶液，加入内标溶液，再次溶解稀释成一定浓度，进样，测得峰面积并记录内标物溶液配制根据各品种正文项下含量测定中的要求进行配制中药制剂含量测定技术——气相色谱法

4.应用实例应用实例川贝枇杷糖浆中薄荷脑的含量测定

（1）色谱条件和系统适用性试验

（2）校正因子测定①固定相：改性聚乙二醇毛细管柱柱温110℃②分流进样，分流比为25﹕1理论板数按萘峰计算应不低于5000配制萘的内标溶液，浓度为CS；配制薄荷脑对照品溶液，浓度为CR中药制剂含量测定技术——气相色谱法应用实例（3）测定法配制供试品溶液，VX=50ml，V供=20mlAS=851302，AR=798023.5AS’=841603.2，AX=814180.5本品每1ml含薄荷脑（C10H20O）应不少于0.2mg（4）含量要求中药制剂含量测定技术——气相色谱法川贝枇杷糖浆中薄荷脑的含量测定应用实例中药制剂含量测定技术——气相色谱法川贝枇杷糖浆中薄荷脑的含量测定

＞0.2mg，所以本品中薄荷脑含量合格链接未来岗位中药制剂中有效成分或特征性指标成分含量的测定对于评价中药质量的优劣具有重要意义，同时也是药品质量检验中