(遗传与优生学)4产前筛查课件

唐氏综合征产前筛查1产前筛查是在孕早中期定量测定孕妇血中的某些血生化成分，结合孕妇的年龄、体重、孕周等指标，并利用专用的筛查数据软件进行风险估计，从而得出胎儿罹患遗传病（如染色体病及基因病）的风险度。由于产前筛查只是风险度的估计，因此，产前筛查适用于所有符合筛查年龄及孕周的孕妇。产前诊断（即宫内诊断）是细胞遗传学、分子遗传学、生物化学和临床医学实践紧密结合的一门学科，通过有创性及无创性的检查方法，获取胚胎或胎儿信息并对这些信息进行分析，最终诊断胚胎或胎儿是否患有某种疾病。唐氏综合征(Down’Ssyndrome,DS)又称先天愚型或21-三体综合征，是胎儿先天缺陷中最常见的一种染色体病，本病是21号染色体三体引起的先天畸形，也是智力低下最常见的遗传性病因。智力发育不全是本综合征最突出、最严重的表现。唐氏综合征目前缺乏有效的治疗手段，因此孕妇产前筛查唐氏综合征和羊水产前诊断是防止和降低患儿出生的有效方法。近年来，为降低缺陷胎儿的出生率，很多医院产前诊断中心开展孕妇唐氏综合征筛查，把唐氏综合征作为常规的产检项目之一。孕妇血清学标志物产前筛查方法目前已被证实可在孕中期有效地检出DS高危患儿，为她们进一步作羊膜腔穿刺的羊水染色体检查提供依据。唐氏筛查的原因一直以来，人们习惯以孕妇年龄≥35岁为唐氏综合征高风险的筛查指标。即建议≥35岁孕妇应进行胎儿染色体检查，现在发现实际上69%～85%的唐氏综合征患儿由35岁以下的孕妇所出生。因此建议唐氏综合征血清学筛查所有的孕妇都应实行。唐氏筛查的时期和指标唐氏筛查有早期和中期之分，其中以中期筛查为多，产前筛查安全无创伤，孕妇容易接受。早期筛查主要采用游离绒毛膜促性腺激素(Freeβ-HCG)和血浆妊娠相关蛋白(PAPPA)二联标志物方案。中期筛查有采用游离β-人绒毛膜促性腺激素(Freeβ-HCG)、甲胎蛋白(AFP)二联标志物筛查方案和Freeβ-HCG、AFP、游离雌三醇(μE3)三联标志物筛查方案。现在普遍使用三联方案。对于中期两种筛查方案的差别有不同的看法。有报道显示患有唐氏综合征的孕妇，血清AFP水平下降，Freeβ-HCG水平升高，Freeβ-HCG和AFP二联检测可筛查出65%的唐氏综合征患儿。加入μE3的三联方案有争议，研究表明加入μE3

的三联方案能提高唐氏综合征的检出率和减少假阳性率。也有研究认为μE3是引起唐氏综合征产前筛查产生假阳性的主要原因。因此唐氏筛查结果不能只看风险分析的风险数，还应结合单个血清学指标的中位数倍数值，单项指标异常也应考虑唐氏综合征高风险，应建议孕妇做产前诊断，以免假阴性造成唐氏儿出生。孕中期唐氏筛查的孕周为14～20+6周，因电脑分析软件的限制，超过此期限则不能做唐氏血清学筛查，若怀疑有唐氏儿的风险则应直接做羊水或脐血产前诊断。羊水穿刺最佳时期为孕18～20周，因此，唐氏中期血清学筛查选择以孕16～18周为好，过早筛查如系高风险则会使孕妇出现较长的焦虑期，过晚则不利于提早诊断，不利于孕妇的身心健康。胎儿颈项透明带厚度(nuchaltranslucency，NT)是指胎儿颈背侧软组织和皮肤之间的厚度，被认为是筛查唐氏综合征和其他染色体异常的最常见最有效最敏感最特异的遗传学超声指标。正常胚胎发育过程中，颈部淋巴管与颈静脉窦在10～14周左右相通，在颈部淋巴管与颈静脉窦相通之前，少量淋巴液积聚在颈部，出现短暂回流障碍，形成暂时性的颈部透明带，所以10～14周的正常胎儿颈部可出现正常宽度的透明带，到14周后应消退。。NT增厚的本质是胎儿颈部皮下水肿。自20世纪90年代以来，胎儿颈项透明带厚度(nuchalskinfoldthickness，NT)与各种胎儿先天性异常的关系已受到关注，相关研究显示，NT增厚可能与胎儿染色体异常、心血管系异常、骨骼系统发育不良、代谢及血液系统异常等有关。其中，在胎儿染色体异常中，21-三体综合征与NT增厚的相关性更加受到临床的重视，并开展孕期对胎儿颈部皮肤厚度的测定，以筛查染色体异常的胎儿。NT增厚除了与21-三体相关外，与其他染色体异常如18-三体综合征、三倍体也有一定关系。孕龄(GestationalAge，GA)对产前筛查风险计算结果有重要影响，GA估计不准往往会造成风险估算错误，引起假阳性和假阴性，选择正确的GA估计方法对提高产前筛查效能具有重要意义。通常，当孕妇月经周期不规则，或遗忘末次月经日期时，则需根据超声检查胎儿发育推断GA。超声估计GA的方法很多，现对其常用的指标作一综述：1孕囊(GestationalSac，GS)由于GS个体变异较大，形态受膀胱、直肠的充盈度影响，根据GS估计GA的准确性较差，可作为估计GA的辅助指标。2头臀径(Crown-rumpLength，CRL)CRL被认为是孕早期估计GA最准确的指标。3双顶径(BiparietalDiameter,BPD)4头围(HeadCircumference，HC)对于异常头型，BPD估计GA会产生较大误差，此时应测量HC估计GA。测量方法是利用超声直接获得HC数值，记为HC(measured)，或通过测量颅骨的前后径和最大横径，应用简便的公式计算，记为HC(drived)。5腹围(AbdominalCircumference，AC)在孕15周以后可以直接测量AC，并记为AC(measured)，也可由公式计算获得。6股骨长(Femurlength，FL)当胎位不正，胎头入盆等原因影响BPD测量时，可辅以长骨测量估计GA，在长骨测量中多采用FL测量。在采用超声指标估计GA时，在早孕期，特别在10～13孕周采用头臀径估计GA最为理想。而中孕期(14～20孕周)，优先采用双顶径估计GA，国内外公式估计的GA差异基本在1d左右。当胎儿的双顶径不宜测量时，可采用HC、AC和FL长估计GA，且选择基于中国人群或类中国人群建立起来的超声指标与GA回归公式估计GA。目前常见的与DS有关的血清学

标志物已明确的和DS有密切关系的血清标志物有近十种。其中有代表性的有：甲胎蛋白(AFP)，游离雌三醇(μE3)，游离β-绒毛膜促性腺激素(Freeβ-HCG)，妊娠相关血浆蛋白-A(PAPP-A)，抑制素A等。AFP是胎儿血清中最常见的球蛋白，孕早期由卵黄囊产生，孕晚期由胎肝大量产生。DS孕妇血清AFP浓度一般低于正常值（0.5MOM），其在DS筛查中的意义是其它指标无法替代的。μE3是胎儿肝、胎盘和肾上腺相互作用合成的一种甾体类激素。以游离形式由胎盘分泌入母体循环，反映了胎盘和胎儿功能状态，随孕周而升高。DS则低于正常（<0.7MOM），提示胎儿肾上腺皮质发育不良，导致μE3合成减少。绒毛膜促性腺激素(hCG)是胎盘滋养层分泌的一种糖蛋白，hCG对染色体异常，尤其是唐氏综合征胎儿较为敏感。其中Freeβ-HCG是敏感性最高的标志物（前者1.8~2.3MOM，后者2.2~2.5MOM）。

因为Freeβ-HCG和PAPP-A这两个指标在孕早期唐氏妊娠孕妇和同期正常孕妇之间有较明显的差别，可以用来识别高危人群。如果准许筛查假阳性率为5%的话，上述两项血清指标和孕妇年龄综合考虑可以检测出62%的唐氏妊娠；如果准许筛查假阳性率为9.5%的话，则可以检测出72%的唐氏妊娠。值得注意的是，PAPP-A在孕13周以后就不再是一个很好的指标了。抑制素A主要由黄体和胎盘分泌，在受精和维持妊娠中起重要作用。DS中抑制素A水平是正常孕妇的2倍。其首个临床应用就是作为孕中期DS筛查的血清学指标。2血清学标志物筛查组合临床常见的多采用孕中期二联和三联联合筛查。二联，即AFP和β-HCG联合检测，结合孕妇年龄，计算风险率。适合孕中期14～20w筛查，DS阳性率为65%，国内多采用这种组合。三联试验即AFP，μE3，β-HCG，该组合对14～21w孕妇进行筛查，利用风险评估软件计算风险率，检出率可达65～80%，假阳性率仅为5%，高龄孕妇更易被检出，被国际上广泛应用。近年来，四联产前筛查的良好效率已被临床研究证实，有研究显示，抑制素A加盟DS筛查后，使检出率提高10%，而假阳性率不增加，从而提高了筛查效率。目前用于DS等染色体异常的产前筛查方案有：孕中期(14～20周)，二联[AFP+游离β-hCG(f-β-hCG)]、三联[AFP+f-β-hCG+游离雌三醇(μE3)]和四联[AFP+f-β-hCGf+μE3+抑制素A(inhA)]筛查；孕早期(9～11周)f-β-hCG+妊娠相关血浆蛋白(PAPP-A)+NT筛查，NT为在孕早期B超测量的胎儿颈后透明带厚度(NT)

。目前发达国家已广泛开展孕早期筛查。英国血清、尿液和超声筛查研究(SURUSS）和美国早期和中期妊娠风险评估（FASTER）两大前瞻性研究结果显示，孕早期联合筛查优于孕中期筛查。美国妇产科医师协会产前筛查指南指出，在同样的假阳性率(FPR)下，采用超声测定胎儿NT厚度的孕早期联合筛查优于孕中期筛查。研究指出，目前最好的孕中期筛查是四联筛查。美国早期和中期妊娠风险评估(FASTER)研究机构对40000例产前筛查数据作统计后得出完全的整合筛查，孕早期11周行NT和PAPP-A检测加上孕中期四联筛查于15～17周能够达到检出率96%[假阳性率(FPR)5%]英国的SURUSS(TheSerumUrineandUltrasoundScreeningStudy)研究表明整合筛查是最有效和安全的方式，血清学整合筛查次之。早孕期联合筛查方案优于中孕期联合筛查，中孕期联合筛查方案中，四联筛查是最好的，二联筛查、三联筛查以及早孕期的单一NT筛查方案在将来的DS产前筛查方案中不再保留。目前国内外采用的DS产前筛查方案，均为能够精确定量的血清学产前筛查技术和(或)接受标准化培训认定的超声筛查方案。大部分采用一次采样DS筛查方案，若孕妇同意分别在早孕期和中孕期采样筛查，则可采取独立式、集合式和序贯式等DS筛查方案。血清学联合筛查和血清学联合超声指标筛查，使得筛查效率与假阳性之间获得最佳平衡PAPP-A+游离β-hCG+NT联合筛查。单独利用超声测量胎儿NT(孕11周～孕13+6)、鼻骨、颌面角、三尖瓣血流、静脉导管血流频谱，在假阳性率为5%时，平均检出率为76%。在联合PAPP-A+游离β-hCG后，大大提高了检出率。当假阳性率为5%时，检出率为85%～90%。孕早期血液采集时间为10-13+6周（最好在10+2-11+6周）孕中期血液采集时间为15-20+6周（最好在15+2-17周）。11-13+6周做NT检查加拿大产前筛查指南

需要进行NT检查的适应征是：a)预产期（EDD）时年龄≥40的孕妇；b)多胎妊娠的孕妇；c)既往生育史的小孩或胎儿中有唐氏综合征，18三体或13三体；d)≥35岁的妇女并有3次或多次流产；e)HIV阳性。当能提供NT检查时可将NT检查范围扩大到35-39岁的孕妇。对于超过40岁的单胎妊娠孕妇或35岁多胎妊娠时羊膜穿刺也是选择孕妇就诊时推荐筛查选项A孕期≤13+6周时的选项：1.孕妇小于35岁：血清整合产前筛查（SIPS）包括两次血液检查：第一次在10-13+6周（最好10+2-11+6周）和第二次15-20+6周（最好15+2-17周）。在第二次血液检查后可拿到结果。如果孕妇HIV阳性，做SIPS。如果NT可做，IPS。2.孕妇35-39岁SIPS;或如果NT能做，整合产前筛查（IPS）：IPS包含SIPS加颈半透明度（NT）超声测量时间为11-13+6周（最好12-13+3周）3孕妇超过40岁SIPS；或如果NT超声可做，IPS;或绒膜绒毛取样（CVS）或羊膜穿刺而不用前面的筛查孕妇就诊时推荐筛查选项4孕妇个人或家族史中有增加胎儿患唐氏综合征或18三体12的风险：SIPS；或如果NT超声可做，IPS;或绒膜绒毛取样（CVS）或羊膜穿刺而不用前面的筛查5孕妇个人或家族史中有增加胎儿患除外唐氏综合征或18三体外的染色体异常，CVS或或羊膜穿刺而不用前面的筛查6孕妇多胎妊娠如果NT超声可做，单独NT;如果NT超声不可做，SIPS;或如果年龄≥35岁，羊膜穿刺而不用前面的筛查孕妇就诊时推荐筛查选项B孕期为14周和20+6周时的孕妇选项：1.孕妇小于35岁Quad筛查包含15-20+6周的一次血液检测（最好15+2-17周）2.孕妇35-39岁Quad3.孕妇超过40岁:Quad;或羊膜穿刺不用前面的筛查.孕妇就诊时推荐筛查选项4.孕妇个人或家族中史具有可增加胎儿唐氏综合征或18三体Quad;或羊膜穿刺不用前面的筛查.5.孕妇个人或家族中史具有可增加胎儿除唐氏综合征或18三体外的染色体异常

•羊膜穿刺不用前面的筛查6.孕妇具有多胎妊娠：

Quad;或如果超过35岁，羊膜穿刺不用前面的筛查.孕妇就诊时推荐筛查选项C.孕期≥21周妊娠选项（没有前面的筛查）:1.孕妇小于35岁:

详细的超声肢体检查并用软标记物评估非整倍性.如果超声异常，进行母亲和胎儿医学专科或医学遗传学咨询.2.孕妇为35-39岁:详细超声和羊膜穿刺3.孕妇大于40岁:详细超声；和羊膜穿刺4.孕妇个人或家族中史具有可增加她们具有胎儿唐氏综合征或18三体风险详细超声和羊膜穿刺5.孕妇个人或家族中史具有可增加胎儿除唐氏综合征或18三体外的染色体异常风险•详细超声和羊膜穿刺6.孕妇具有多胎妊娠：详细超声和羊膜穿刺筛查项目血清整合产前筛查(SIPS)筛查整合产前筛查(IPS)Quad筛查(Quad)独立的颈透明度(NT)超声所有孕妇在≤13+6周孕期第一次就诊时孕妇在≤13+6周孕期第一次就诊时和：≥35岁在个人或家族史上有增加怀唐氏综合征和18三体胎儿风险的和HIV阳性所有孕妇在14-20+6周孕期第一次就诊时多胎妊娠孕妇在≤13+6周孕期第一次就诊时胎儿“染色体非整倍体”无创基因检测2011.9.9深圳华大基因研究院深圳华大临床检验中心纲要1技术概述2技术原理3方法建立4临床试验5临床验证6个案分析7项目总结技术概述胎儿“染色体非整倍体”无创基因检测：通过采集5ml孕妇外周血，提取其中游离DNA进行大规模并行测序，结合生物信息分析，得出胎儿患“染色体非整倍体”的风险率。适用范围：适用于染色体不分离而导致的染色体非整倍体妊娠12-24周的孕妇进行检测1997年科学发现开始探索2007年建立测序技术平台2008年技术研发方法学确立2009-10年临床试验2011年临床验证技术历程检测方法条件摸索羊膜穿刺/脐血穿刺（20例）方法学确立90例样本，双盲门诊随机样本依从性差，穿刺比例低随访困难临床高危样本有核型结果验证质控体系建立质控体系完善2技术原理理论基础

孕妇外周血中存在胎儿DNA

胎儿DNA的来源和特点来源：1胎儿细胞通过胎盘渗透到母血中，被母体免疫系统破坏，胎儿DNA残留下来；2胎儿细胞凋亡；3胎盘滋养层细胞的凋亡基本特点：1含量有一定的变化规律。妊娠第5周开始可检出胎儿游离DNA，随着孕周增加而增加，存在个体差异。2分娩后短时间内消失，平均半衰期为16.3min(4-30min)，2h就无法检出。再次妊娠不影响检测结果。3DNA片段较小，平均166bp左右。常规技术很难检测理论模型

母亲Chr21：95×2=190母体外周血中Chr21=190+10=200以21-三体为例：100DNA单位/毫升血浆。其中，95个单位来源于母亲，5个单位来源于胎儿大规模并行测序，获得分布在每条染色体上的真实的核酸片段数量；通过计数与比较：正常胎儿或者

21-三体胎儿

正常胎儿

Chr21：5×2=10

母亲Chr21：95×2=190

21-三体胎儿Chr21：5×3=15母体外周血中Chr21=190+15=205血浆DNA测序定位覆盖深度统计覆盖深度Cov-chrN=参考序列染色体N上有效测序片总数样品染色体N上有效测序片段总数AACGT------CGATA-------TAGGC------ATCGC------生物信息比对Chr6Chr18ChrXChr21Chr7Chr13Chr11ChrY50bp统计值计算(t-Score值,L值)确认胎儿是否为T21,T18,T13…测试样本ChrN的关联t-Score样本的覆盖深度—参考样本的修正覆盖深度参考样本的标准差L值=

对数（样品正常可能性值）对数（样品患病可能性值）=检测流程正常21-三体结果判读专利：NONINVASIVEDETECTIONOFFETALGENETICABNORMALITYPCT国际申请（申请号PCT/CN2011/001070）

AbstractThecurrentinventionisdirectedtomethodsfornoninvasivedetectionoffetalgeneticabnormalitiesbylarge-scalesequencingofnucleotidesfrommaternalbiologicalsample.ThecurrentinventionnotonlymakesthedetectionmuchmoreaccuratebutalsorepresentsacomprehensivemethodforfetalaneuploidydetectionincludingsexchromosomedisorderssuchasXO,XXX,XXY,andXYY,etc.D21,maleD21,femaleT21,maleT21,femaleT21检测总样本数：28例T21：14例特异性：100%敏感性：100%方法学建立阶段数据分析无创基因检测21-三体核型分析/产后随访合计阳性阴性阳性131*14阴性07676合计137790*1例假阳性样本出现在方法学建立的过程中，是由于数据积累不足和质控缺乏导致的。结论：与核型分析结果相比，该方法检测21-三体的正确百分率为98.9%。表明该检测流程和分析方法已初步建立，可以进行下一步研究方法学建立阶段，90例样本测试情况54质控体系建立质控指标1图1不同胎儿DNA浓度所需数据量测序数据量孕妇外周血胎儿DNA含量存在个体差异，5-10%，平均7.5%。目前的测序数据量可以准确的检测出胎儿DNA含量≥3.5%的样本。图2测序质量值分布2测序质量

要求其每个碱基位置的平均质量值≥30。56质控指标23数据一致性

用于衡量本批次数据是否与标准参照样数据一致。一致则可以进行下一步分析，不一致则说明本批次数据可能由于某因素造成较大偏差，需要重新实验。图3数据量的一致性分析4GC碱基含量

待测样本的GC碱基含量，必需分布在标准参照样数据范围之内。图4GC碱基含量分析4临床试验深圳市人民医院深圳市妇幼保健院珠海市妇幼保健院临床试验流程签署知情同意书、血样采集、编码（共计3177例）胎儿“染色体非整倍体”无创基因检测羊水/脐血核型分析（共计1198例）判断结果判定结果为假阴/阳性判定结果为真阴/阳性统计数据分析，编制“临床试验研究报告”一致不一致双盲试验临床试验阶段，3177例样本基本情况中位数或%范围或例数年龄(岁)31.518-45孕周(周)17w+47w+6-37w+4年龄≧35岁18.16%577/3177进行产筛62.95%2000/3177产筛高危11.45%229/2000胎儿细胞核型分析37.71%1198/3177胎儿细胞FISH分析0.03%1/3177样本概述临床试验结果3177例临床试验样本进行无创检测、产筛、核型检查及回访情况一览表孕周无创检测例数无创检测结果产筛结果核型结果回访结果T21T18未检出T21和T18高危低危未做总例数结果相符结果不符回访例数符合不符胎死宫内7-11w+66610654511177040400012-15w+6527125249638447252501141140016-20w120795119360708439466465132320020w+1-24w5651345483264469519519019180124w+1-39w128551180101181171170101000小计2493291624481921217108411341133121521401不详684102672375549364640424101合计3177391831202291771117711981197125725502△注：△回访主要针对无创基因检测结果阴性的受检者；其中两例流产，其中一例为巨细胞感染，另一例原因未明。临床试验结果3177例临床试验样本的孕周分布孕周例数不详临床试验结果3177例临床试验样本进行无创检测、产筛、核型检查及回访情况一览表孕周无创检测例数无创检测结果产筛结果核型结果回访结果T21T18未检出T21和T18高危低危未做总例数结果相符结果不符回访例数符合不符胎死宫内7-11w+66610654511177040400012-15w+6527125249638447252501141140016-20w120795119360708439466465132320020w+1-24w5651345483264469519519019180124w+1-39w128551180101181171170101000小计2493291624481921217108411341133121521401不详684102672375549364640424101合计3177391831202291771117711981197125725502△注：△回访主要针对无创基因检测结果阴性的受检者；其中两例流产，其中一例为巨细胞感染，另一例原因未明。

*以T21为例，唐筛结果低危样本中，无创检测为阳性的样本与核型分析结果相符3177例临床试验样本进行唐氏筛查的情况、及无创检测T21结果产筛结果低危1771例产筛结果高危229例产筛未做1177例T21：4例T21：30例T21：5例临床试验结果临床试验结果3177例临床试验样本进行无创检测、唐筛、核型检查及回访情况一览表孕周无创检测例数无创检测结果唐筛结果核型结果回访结果T21T18未检出T21和T18高危低危未做总例数结果相符结果不符回访例数符合不符胎死宫内7-11w+66610654511177040400012-15w+6527125249638447252501141140016-20w120795119360708439466465132320020w+1-24w5651345483264469519519019180124w+1-39w128551180101181171170101000小计2493291624481921217108411341133121521401不详684102672375549364640424101合计3177391831202291771117711981197125725502△注：△回访主要针对无创基因检测结果阴性的受检者；其中两例流产，其中一例为巨细胞感染，另一例原因未明。临床试验结果随访中1721例（82%）无创检测T21：阳性1例，结果无反馈有核型结果122例（5.8%）无创检测T21：阳性15例结果已电话随访257例（12.2%）无创检测T21：阳性1例，经FISH验证255例报告婴儿正常，2例流产门诊随机样本（2101例)产筛高危样本（1076例，均有核型结果)核型结果阳性22例（2.0%）核型结果阴性1054例（98.0%）胎儿“染色体非整倍体”无创基因检测（3177例）无创基因检测21-三体核型分析合计阳性阴性阳性36137阴性011611161合计36116211981198例（门诊随机样本122例+临床高危样本1076例）有核型分析结果的样本，胎儿“21-三体综合征”无创基因检测，检出“21-三体”阳性病例37例，1例为假阳性，检出阴性病例1161例。主要评价指标：

检出率：

100.00%；假阴性率：0.00%；

特异性：99.91%；假阳性率：0.08%。假阳性1例(原因分析，早期质控系统不完善，数据量未达到要求；分析方法不全面）胎儿“染色体非整倍体”无创基因检测结果与核型分析比较临床试验结果同一受检者不同孕周检测结果对照编号(医院）年龄孕周抽血日期无创基因检测结果染色体核型SR0082292020091229T2147,XY,+216952320100119T2147,XY,+21SR0083302320091226T2147,XY,+216912520100119T2147,XY,+21SR0084332020100126T2147,XY,+217252420100223T2147,XY,+21SR0085352020100126T2147,XY,+217212220100211T2147,XY,+21SR0081282520091208T1847,XY,+186302820100105T1847,XY,+18339252120090908T2147,XX,+213902720091013T2147,XX,+21651451620100112T2147,XX,+217382220100226T2147,XX,+21临床试验结果

临床试验5临床验证3962例临床样本的基本情况临床验证中位数或百分比范围或检测例数年龄(岁)3520-49孕周(周)20w+58w+1-36w年龄≧35岁45.78%1814/3962进行唐筛55.22%2188/3962唐筛异常82.40%1803/2188超声检测98.81%3915/3962B超异常5.13%201/3915胎儿细胞核型分析2.52%100/3962胎儿细胞FISH分析1.67%66/3962截至2011年9月1日临床验证注：

*检测结果为T21的样本中5例无核型结果，其中2例拒绝羊穿，1例羊穿预约时间未到，2例等待核型结果。△回访：已对235例进行了电话回访，2例流产（妊高症、宫颈内口松弛），1例引产（胎儿心脏畸形）孕妇年龄血清学筛查T21检测结果无创检测阳性例数核型验证无创检测阴性例数核型验证无创检测样本总数核型验证总数≥35\1212171328172540＜35高危1512152741154253低危1127102721未做3140434074不详11151162合计3227*3930△7339621003962例临床验证样本，进行无创检测、唐筛、核型检查及回访情况一览表6个案分析临床案例121-三体检出样本编号：

PDP10003761孕妇年龄：31唐筛：1/510（低风险）无创检测：T21核型分析：47，XX，+211例T21假阳性：73临床案例2样本编号：

PDB100001881孕妇年龄：28孕周：18周唐筛：1/5600（低风险）无创检测：T21核型分析：46，XX原因分析

样本编号检测次数t-score风险指数测序核酸片段数结果PDP100001881-1-7第一次检测3.8004243241/0722654T21PDP100001881-1-7第二次检测-0.74873931/194132236667970511未检出T21PDP100001881-2-12重新制备样本后再检测0.31969311/187070229972991未检出T2173Chr21#测序获得的

核酸片段数量解决方案完善质控体系，确保一定的测序数据量，每例样本测序量（要求达到2000000核酸片段数）；优化分析方法，改用双假设检验早期研究阶段经验不足（测序数据量不足导致结果误判；分析方法不完善）早期质量控制体系不完善（关键环节没有明确质控标准）18-三体检出样本编号：PDP100002190孕妇年龄：32唐筛：未做无创基因检测：T18核型分析：47，XY，+18临床案例313-三体检出样本编号：PDP100003321孕妇年龄：32唐筛：未做无创基因检测：T13核型分析：47，XX，+13临床案例41例早孕周的特殊案例样本编号：PDP100000063孕妇年龄：31孕周：11w+3唐筛：未做无创基因检测：T21FISH：47，XX，+21临床案例5该孕妇已经流产，但胎盘没有完全娩出，医院在流产当天抽取孕妇外周血，希望能通过无创基因检测的方法查找流产原因。

送检医院样本数（例）检测结果T21T18T13XOXXYXXXXYY北京妇产医院285223131113北京和美妇儿医院1281中国人民解放军总医院16711湖北妇幼保健院752同济医院6中信湘雅医院26重庆医科大学附属第一医院101重庆西南医院578311上海市第一妇婴保健院4111南京妇幼保健院4浙江大学医学院附属妇产医院7121深圳市妇幼保健院27南方医院2深圳市第二人民医院16香港60深圳市人民医院227523*1312深圳市妇幼保健院3561241珠海市