相互作用蛋白质组学唐冬雪课件

相互作用蛋白质组学唐冬雪相互作用蛋白质组学唐冬雪相互作用蛋白质组学唐冬雪蛋白质相互作用研究方法、酵母双杂交技术、免疫共沉淀技术三、细胞共定位技术四、GSTPull-dow技术五、FRET(荧光共振能量转移技术)六、BiFC(双分子荧光互补技术)七、TAP(串联亲和纯化技术)八、Far-Westernblot(亲和印迹技术)、酵母双杂交技术1.基本概述2.基本过程3.应用与优缺点农村中小学在面临应试教育向素质教育改革的情况下,思想准备不足,理念转变不够,行动迟缓,收效甚微,严重阻碍我国农村中小学教育的发展。分析这些问题产生的原因,找出合理的措施以促进农村中小学教育的可持续发展是教育工作者的责任。1农村中小学实施素质教育改革存在的问题1.1教育理念匮乏、落后目前,我国多数农村中小学的教育沿袭传统教学,教师处于至高无上的权威地位,学生无条件地接受教师灌输,在教学中注重死知识的传授,教师是课堂的中心,学生围绕教师转,学生的主体地位得不到体现,教师与学生之间处于不平等的地位。有的教师片面地认为素质教育就是减轻学生负担,减少教学内容;有的学校挂着素质教育的旗帜大搞应试教育,仍然把升学率当成评估教学质量的硬指标,节假日补课有增无减,甚至把班级分为快班、慢班、实验班来进行教学,对学生的身心造成极大的伤害。1.2教育资源配置失衡经济发展水平是实现教育供给的决定性因素,城乡收入差距扩大是我国城乡之间教育供求失衡的重要原因,它直接导致农村教育的资金投入不足[1]。教育政策的制定往往是以城市教育的发展为基点,教育投资向城市一边倒,而广大的农村中小学教育遭到有意或无意的忽视,这就使本来有限的教学资源分配得不合理,教学资源配置严重失衡。1.3教育、教学管理水平不高,教学效果不好一些教育管理部门为了显示政绩,大搞形象工程,过分重视“示范学校”“重点学校”的建设和管理,而把农村中小学当成“弃儿”,疏于管理。加之有些农村中小学的学校领导教学观念陈旧,教学管理水平不高,工作责任心不强,有些校长和教导主任就如何进行教学管理心中无底,无章可循,跟现代教学管理理念很不适应。在上述情形下,教师工作积极性不高,对自己的职业产生倦怠情绪,在教学中只重视数量而不重视质量,导致教学效果不好。1.4“留守学生”心理健康问题严重随着我国经济的发展和农村外出务工人员的增多,农村家庭的“留守学生”问题已成为我国社会转型时期的一个独特问题。由于“留守”在家的孩子缺少父母的爱,在对他们的管教上很容易出问题,尤其是心理问题比较明显。有心理问题的“留守学生”,在学习和生活中表现为更容易违纪,成为教育的难管对象,普遍有厌学倾向,学习成绩差,更为严重者还会走向犯罪道路。对他们的教育的不足或多或少地影响到农村中小学素质教育改革的有效实施。2解决农村中小学素质教育改革中所存在问题的建议2.1转变观念1)更新学生观。教师要用发展的眼光看待学生,确立学生在教学中的主体地位,要理解、信任、尊重和爱护学生,认识到学生的独创性,鼓励学生发挥特长,发展个性。2)更新教师观。在课程改革后,教师是学生的诊断师、指导者、评价者、激励者和管理者,同时教师又是一个研究者,是一个不断在教学上获求进取的人。3)更新教学观。教学方式由以讲授为主转为以合作探究为主;教学内容由封闭转为开放;教学组织形式由单一时空转为灵活时空;教学手段要由黑板、粉笔转为多样化综合;教学评价由重结果评价转为多元化评价。2.2加强社会关注、扶持力度整个社会都应该关注农村的中小学教育。尤其是城市教育要支持农村中小学教育,为农村中小学教育提供教育资源上的帮助,做好送课下乡的工作;教育政策应倾向于农村中小学教育,加大财政资金的扶持力度,用于改善农村中小学的教学硬件设施,提高办学条件,提高农村中小学教师的工资待遇;大力呼吁社会各界人士为农村中小学教育贡献自己的力量,提供力所能及的帮助;营造良好的社会氛围,为了实现农村中小学教育的可持续发展,整个社会都应该把农村中小学教育放在优先发展的地位。2.3加强农村中小学教师职业道德建设,提高教书育人水平农村中小学教师在师德方面要不断地学习和总结,不断地提升自我。教育主管部门可将师德建设作为学校办学水平评估的重要指标,加强对教师师德的考评,坚持师德考核与业务考核并重,建立教师自评、互评,家长评教师,学生评教师相结合的考评机制。重点考核教师教书育人的实绩和职业道德状况、教学态度和育人效果等,把师德考核结果作为教师职务聘任、评优评先的重要依据。2.4以人为本,注重学生的身心发展农村中小学较城市学校而言,有问题行为的学生比较多,表现也比较复杂。要想从根本上解决好问题行为学生的身心问题,就要注重以人为本的教育思想。首先从人格上要尊重这些学生,在生活上关心他们,在行为上引导他们;其次要想他们之所想,走进他们的内心世界,因势利导,循序渐进地解决他们的问题;此外,建议农村中小学开设心理辅导课程,由心理学专业毕业的教师进行讲授,作为一门学科纳入农村中小学的课程体系。新的课程改革明确提出：“课堂教学要培养学生的创新意识和实践能力。”为此教师应彻底改变传统“一言堂”，“填鸭式”的教学模式，重视和加强学生的创新意识、创新素质的培养，这是当今社会对教育提出的新要求，也是小学数学教学的主旋律。《数学课程标准》指出：“数学教学是数学活动的教学，是师生之间、学生之间交往互动与共同发展的过程。”学生要在教师的指导下，积极主动地掌握数学知识、技能，发展。培养学生的创新精神是数学教学的首要任务，而落实这一目标的主阵地就是数学课堂。如何在新课程理念下实现数学课堂创新，下面是自己的一些粗浅看法。一、营造和谐的、民主的教学氛围――课堂创新的保障现代教育认为：“只有给学生创设一种和谐、融洽、宽松、民主的教学环境，激发学生内在的学习需求，才能使他们生动活泼、主动有效地进行学习，把教学活动视为他们自己乐意的生活。”只有在这种师生关系平等的课堂教学过程中，学生处于一种无拘无束的情况下，才会感到学习过程中没有压力，学习的灵感才容易迸发出来，也只有在这样的场合下学生的不同观点，不同想法才容易产生，才会产生创新的灵感。在课堂上，只有老师放下“架子”，不顾“面子”，溶入学生之中，成为学生中的一员，做学生的知心朋友，在这种融洽、民主的氛围中，学生才会感到学得轻松，才愿意动脑筋思考问题，才会有创新。例如，我在教学《人民币的认识》时，就把我自己作为一名小学生融入到学生中去，虚心向孩子们请教，他们皆争先恐后地把自己认识的人民币介绍给我。甚至有个学生说：“嗨！嗨！你真棒！”这充分说明学生们正在这种和谐的、民主中轻松愉快地学习。二、创设情境，激发创新意识――课堂创新的前提《数学课程标准》这情感与态度目标提出，让学生“在数学学习活动中获得成功的体验，锻炼克服困难的意志，建立自信心。”这一目标的达成，必须通过学生亲身的主动参与，自主探索。因此，创设主动参与的情境就成了课堂创新的重要前提。1.问题情境创设问题情境，不仅能唤起学生的有意注意，引起学生对学习内容的好奇心，而且还能激发学生的求知欲望和乐于创新的兴趣。因此在教学中，教师要根据小学生的认知特点和心理特征，在教学目标和求知心理之间创设一种富有创新机会的情境，把学生引入这样一个问题情境中，唤起他们的创造欲望，那么学生的创新意识就会孕育而生。2.探索情境学生创新意识的培养是在自身的实践活动中发展起来的。大量的思维研究认为，每个人都蕴藏着无限的潜在创造力。我们要时时处处站在培养学生创新意识的角度来钻研教材、设计教法、组织教学、指导练习，积极挖掘教材中蕴含的创新要素，尽量创设开放的探索，增大学生创新意识培养的时间和空间，让学生的学习活动真正变为学生自己探索的创新过程。例如，我在进行“两位数加一位数”这一内容的教学时，出示：28＋9＝（）后，放手让学生独立、自主地探索各种计算方法，允许学生打破教材规定的方法，用适合自己喜欢的方法去计算。通过学生独立探索，小组合作探究学习，在群体交流中学生探索出了很多的计算方法，如“接数法”、“凑十法”“先加再减法”等。3.创设猜想情境猜想是一种带有一定直观性的比较高级的思维方式，这种直觉思维是指未经逐步分析，迅速对问题的答案作出合理猜测、设想或突然领悟的思维。直觉思维是点燃创造思维的火花，对于创造思维的产生和发展起着极其重要的作用。对于探索和发现性学习来说，猜想是一种重要的思维方法。它的主要特点就是“一眼看出”、“突然领悟”，但又不能马上就出理由。可见，在教学中鼓励学生大胆发表不同见解、质疑，甚至出错，引导学生从多方面，多角度大胆猜想，进而让学生验证自己的猜想，学生在验证的过程中，会发现新的问题，并在解决问题的过程中不断完善自己的猜想，发挥创造才能，最终发现规律，从而可以激发学生的创新欲望，培养学生的创新意识。4.创设求异情境小学数学教学中，创设必要的、适量的开放性题目，可以为学生提供广阔的思维空间，培养学生思维的灵活性，提高学生分析问题、解决问题的能力，还有助于培养学生的探究精神和创新能力。例如，我让一年级的学生练习：写出得数是4的加法算式，他们不但写出了课本上的“1＋3＝4，3＋1＝4，2＋2＝4”，而且还写出了：“0＋4＝4，4＋0＝4，1＋1＋2＝4，1＋2＋1＝4，1＋1＋1＋1＝4，……”；又如：教学“简便运算172-98”，教师不要急着提醒学生“98”最接近哪一个整百数，应该把98先看成多少？而是让学生自由发挥，如果学生用“拆数”的方法，把“172”拆成“72+100”时，教师将计就计，因势利导，让学生讲出思路，不要死板地按照书上“172-98=172-100+2”这样必然大大激发学生思维的创造性；反之，如果硬拉到书本的方法，学生就会被动的接受，完全落入“教师讲学生听，教师讲得满头大汗，学生听得昏昏欲睡”的俗套，严重地抑制学生的求异思维，创造性培养无从谈起。问题解决的过程，就培养学生发展思维的过程，学生创新意识形成的过程。这种开放性的题目是学生求异思维训练的最佳方式，同时也是培养和发展学生创新意识、创新思维的有效方法。（江苏省连云港市东海县安峰中心小学）蛋白质相互作用研究方法、酵母双杂交技术、免疫共沉淀技术三、细胞共定位技术四、GSTPull-dow技术五、FRET(荧光共振能量转移技术)六、BiFC(双分子荧光互补技术)七、TAP(串联亲和纯化技术)八、Far-Westernblot(亲和印迹技术)、酵母双杂交技术1.基本概述2.基本过程3.应用与优缺点基本概述酵母双杂交系统(Yeasttwo-hybridsystem,Y2H是1989年由Fields等提出并初步建立的,主要用于研究真核生物的蛋白质该系统利用了酵母的转录激活因子GAL4,含有的两个结构域,DNA结合域①dNAbindingdomain,BD)及转录激活域(activationdomain,AD),将已知基因(诱饵基因)和靶基因分别构建在含BD及AD质粒载体上,将两种质粒共同转化酵母感受态细胞,若BD结合的诱饵蛋白能够与AD结合的靶蛋白或文库中的某些cDNA编码的蛋白相互作用、彼此间结合时,则会导致位于侧翼的BD与AD在空间上接近,呈现GAL4转录因子的完全活性,激活下游的报告基因表达,从而在特定的选择性培养基上生长BaittranscriptionDNA-BDGALUASminimalpromoter原理示意图靶蛋白结合对象DNA结合蛋白转录激活结构域蛋白把分别编码“诱饵”和“猎物”的重组基因引入酵母细胞酵母细胞捕获猎物1诱饵转录激活子↓报告基因的转录结合位点报告基因表达的蛋白MCSSV40NLSpGBKT778A0M)TLmppGADT7AD7.3kbHATag7988bpHLEUZ△c-MycepitopetagAH109ConstructsGALIUASGALITATAHIS3GALZUASGAL2TATAADEZMELTUASMELITATAMELlUASMEL1TATAMEL1His3是编码组氨酸合成的基因,3-AT是它的竞争性抑制剂;ADE2是编码腺苷酸合成酶的基因。lacZ是编码β-半乳糖苷酶的基因,可以用β半乳糖实验测定活性。MEL1编码α-半乳糖苷酶,可以降解X-α-Gal,产生蓝色。GAL1,GAL2和MEL1的上游激活序列(UAS)应答于GAL4转录激活因子。AH09衍生于PJ69-2A菌株,包括ADE2,HS3营养标记和一个内源的MEL基因,lacZ报告基因被引入PJ69-2A而得到AH109菌株基本过程构建表达载体构建表达载体醋酸锂转化法PGBKT7-BaitPGADT7-Prey转化酵母AH109(或直接提质粒)菌株感受态醋酸锂转化法转化酵母AH109拿测序结果进行Pey菌株自激活菌株感受态BLAST找出相应基因验证Bai菌株自激活对阳性克隆进行将BD-Bait与AD-Pre验证ColonyPCr后测序用醋酸锂转化法共转化酵母AH109菌株感受态,涂到含BDB酵母与文库中冷缺陷培养基检测三缺培养基上验证酵母混合培养形成二相互作用也可用其他方法验证「倍体在三缺培养基筛选ncbi.nlm.nihgov/ATGGCGTCTTACCAGAACCGTCCAGGAGGTCAGGCCACTGACGAGTACGGAAACCCGATCCAGCAGCAGTATGACGAGTACGGAAATCCGATGGGAGGAGGAGGATACGGAACTGGTGGTGGTGGAGGAGCTACAGGTGGCCAAGGATACGGAACAGGTGGCCAAGGGTACGGATCAGGTGGCCAAGGGTACGGAACCGGTGGCCAAGGATACGGAACCGGGACCGGGACTGAAGGCTTTGGAACTGGCGGGCTTGGGA