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文档简介
章病毒感染的检查方法与防治原则详解演示文稿本文档共39页;当前第1页;编辑于星期一\18点21分(优选)章病毒感染的检查方法与防治原则本文档共39页;当前第2页;编辑于星期一\18点21分标本的采集与送检
1.标本中常加入抗生素。2.低温保存,尽快送检。3.血清学标本:两份本文档共39页;当前第3页;编辑于星期一\18点21分二、病毒的分离与鉴定标本分离培养动物接种鸡胚培养细胞培养病毒形态观察光镜电镜包涵体病毒体CPETCID50,PFU本文档共39页;当前第4页;编辑于星期一\18点21分(一)病毒的分离培养
1.动物接种
应用:尚无敏感细胞的病毒培养动物:兔、鼠、黑猩猩、猴等优点:结果易观察,可建立动物模型缺点:有饲养条件要求,费用高,动物体内常带有潜伏病毒本文档共39页;当前第5页;编辑于星期一\18点21分动物接种本文档共39页;当前第6页;编辑于星期一\18点21分2.鸡胚培养
采用孵化9-14天的鸡胚
绒毛尿囊膜(allantocherion)痘苗病毒、人类疱疹病毒
尿囊腔(allantoiccavity)接种部位流感病毒、腮腺炎病毒
羊膜腔(amnioticcavity)流感病毒的初次分离
卵黄囊(yolksac)嗜神经病毒本文档共39页;当前第7页;编辑于星期一\18点21分本文档共39页;当前第8页;编辑于星期一\18点21分优点:易管理,不带微生物,成本较低缺点:操作程序复杂本文档共39页;当前第9页;编辑于星期一\18点21分本文档共39页;当前第10页;编辑于星期一\18点21分3.细胞培养
单层细胞培养(monolayercellculture)悬浮细胞培养(suspendedcellculture)
原代细胞(primarycell)细胞种类二倍体细胞(diploidcell)传代细胞系(continuouscellline)本文档共39页;当前第11页;编辑于星期一\18点21分病毒的细胞培养细胞培养瓶单层细胞本文档共39页;当前第12页;编辑于星期一\18点21分
病毒增殖的指征
1.细胞病变效应(cytopathiceffect,CPE)
①细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落等(多数病毒);②形成多核巨细胞或称融合细胞(麻疹病毒、巨细胞病毒、呼吸道合胞病毒等);③在培养细胞中形成包涵体(狂犬病病毒、麻疹病毒等)。本文档共39页;当前第13页;编辑于星期一\18点21分本文档共39页;当前第14页;编辑于星期一\18点21分麻疹病毒感染细胞呼吸道合胞病毒感染细胞形成多核巨细胞或称融合细胞本文档共39页;当前第15页;编辑于星期一\18点21分形成包涵体(inclusionbody)本文档共39页;当前第16页;编辑于星期一\18点21分腮腺炎病毒感染细胞2.红细胞吸附(hemadsorption)病毒囊膜表面血凝素(HA)+红细胞表面HA受体本文档共39页;当前第17页;编辑于星期一\18点21分3.干扰现象(interference)4.细胞代谢改变
细胞代谢变慢pH变化减慢本文档共39页;当前第18页;编辑于星期一\18点21分
(二)病毒的鉴定
病毒形态学鉴定病毒血清学鉴定
病毒分子生物学鉴定本文档共39页;当前第19页;编辑于星期一\18点21分(三)病毒数量与感染性测定1.血凝试验:病毒总量(活病毒+死病毒)2.空斑形成试验(plaqueformationtest)3.50%组织细胞感染量(50%tissuecultureinfectiousdose,TCID50)感染性病毒量本文档共39页;当前第20页;编辑于星期一\18点21分空斑试验本文档共39页;当前第21页;编辑于星期一\18点21分三、病毒感染的血清学诊断应用:①采取标本分离病毒为时已晚②目前尚无分离此病毒的方法或难以分离的病毒③为证实所分离的病毒的临床意义④进行血清流行病学调查等本文档共39页;当前第22页;编辑于星期一\18点21分1.中和试验(neutralizingtest)病毒+中和抗体病毒失去感染性
特点:特异性高,抗体维持时间长应用:人群免疫情况的调查临床诊断少用本文档共39页;当前第23页;编辑于星期一\18点21分
2.血凝抑制试验(hemagglutinationinhibitiontest)—正粘病毒型与亚型鉴定
病毒+鸡红细胞=凝集(血凝试验)
病毒+特异性抗体+鸡红细胞=不凝集(血凝抑制试验)
本文档共39页;当前第24页;编辑于星期一\18点21分3.补体结合试验
(complementfixationtest)
用已知病毒可溶性补体抗原检测病人血清中相应的补体抗体
特点:特异性低,抗体出现早,消失快应用:近期感染指标。本文档共39页;当前第25页;编辑于星期一\18点21分四、病毒感染的快速诊断数小时内出结果病毒颗粒病毒成分(抗原或核酸)早期抗体检测(IgM)本文档共39页;当前第26页;编辑于星期一\18点21分(一)形态学检查电镜和免疫电镜检查普通光学显微镜检查包涵体本文档共39页;当前第27页;编辑于星期一\18点21分(二)病毒成分检测1.病毒蛋白抗原检测
免疫标记技术2.病毒核酸检测
核酸扩增技术核酸杂交技术基因芯片技术基因测序本文档共39页;当前第28页;编辑于星期一\18点21分(三)早期抗体检测
可诊断急性感染特异性IgM抗体:孕妇感染风疹病毒EBV早期抗原抗体
本文档共39页;当前第29页;编辑于星期一\18点21分第二节病毒感染的特异性预防本文档共39页;当前第30页;编辑于星期一\18点21分人工主动免疫(artificialactiveimmunization):将疫苗(vaccine)或类毒素(toxoid)接种于人体,使机体主动产生获得性免疫力的一种防治微生物感染的措施。主要用于预防本文档共39页;当前第31页;编辑于星期一\18点21分疫苗
第一代疫苗第二代疫苗第三代疫苗死疫苗活疫苗亚单位疫苗基因工程疫苗重组载体疫苗合成肽疫苗DNA疫苗转基因植物疫苗本文档共39页;当前第32页;编辑于星期一\18点21分本文档共39页;当前第33页;编辑于星期一\18点21分*载体疫苗
利用非致病微生物
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