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第六章酶的非水相催化◆人们以往普遍认为只有在水溶液中酶才具有催化活性。◆酶在非水相介质中催化反应的研究:在理论上进行了非水介质(包括有机溶剂介质,超临界流体介质,气相介质,离子液介质等)中酶的结构与功能、非水介质中酶的作用机制,非水介质中酶催化作用动力学等方面的研究,初步建立起非水酶学(non-aqueousenzymology)的理论体系。◆非水介质中酶催化作用的应用研究,取得显著成果。1.酶非水相催化的研究概况◆酶在非水介质中进行的催化作用称为酶的非水相催化。1.1有机介质中的酶催化:◆有机介质中的酶催化是指酶在含有一定量水的有机溶剂中进行的催化反应。◆适用于底物、产物两者或其中之一为疏水性物质的酶催化作用。◆酶在有机介质中由于能够基本保持其完整的结构和活性中心的空间构象,所以能够发挥其催化功能。◆酶在有机介质中起催化作用时,酶的底物特异性、立体选择性、区域选择性、键选择性和热稳定性等都有所改变。1.2气相介质中的酶催化:◆气相介质中的酶催化是指酶在气相介质中进行的催化反应。◆适用于底物是气体或者能够转化为气体的物质的酶催化反应。◆由于气体介质的密度低,扩散容易,所以酶在气相中的催化作用与在水溶液中的催化作用有明显的不同特点。1.3超临界流体介质中的酶催化:◆超临界介质中的酶催化是指酶在超临界流体中进行的催化反应。华◆为用于尘酶催离化反蚂应的快超临阴界流毙体应歉当对世酶的旅结构扮没有润破坏泰作用务,对益催化腐作用恐没有巡明显幕的不滥良影飘响;出具有盆良好改的化饺学稳基定性赌,对资设备顿没有仗腐蚀蹦性;游超临平界温采度不巨能太遥高或章太低欲,最旬好在扁室温博附近湾或在腾酶催缸化的大最适书温度芬附近旦;超奋临界尿压力洒不能佛太高杏,可夸节约扁压缩叼动力互费用的;超约临界厘流体淋要容购易获搜得,黎价格百要便抖宜等做。恢1.系4晨离子眯液介赴质中狂的酶底催化予:视◆焦离子疑液介助质中帽的酶吸催化摩是指掏酶在零离子锯液中落进行激的催雀化作诱用。悲◆让离子尿液(哲io门ni互c壳li匹qu瓜id衔s)借是由片有机贸阳离毕子与恳有机悔(无父机)建阴离蝇子构葡成的剖在室厕温条巩件下源呈液溉态的茂低熔拘点盐怨类,脚挥发方性低沉、稳宾定性弯好。必酶在支离子脾液中翠的催芳化作匠用具辣有良砖好的慨稳定雄性和尺区域贩选择宾性、冈立体净选择罢性、介键选悦择性丰等显轮著特倾点。阳◆挣在酶瘦的非牵水相猾催化晨中,灭研究白最多拣的非贼水介馆质是控有机半溶剂纵。何◆逼酯酶御、脂捐肪酶熊、蛋淹白酶专、纤揉维素乞酶、酬淀粉痰酶等榨水解碑酶,绞过氧肢化氢椒酶、喂过氧倍化物拳酶、向醇脱剖氢酶颂、胆笨固醇殿氧化瞒酶、已多酚忽氧化层酶、井细胞恰色素湖氧化益酶等雁氧化刚还原坝酶以短及醛击缩酶恭等转卧移酶项中的勒十几两种酶能都可苗以在孩适当子的有晒机溶你剂介拢质中宋起催快化作桶用。靠而且素酶在介有机映介质顿中的简热稳年定性闷比水闯溶液甜中显及著提掀高。兽◆元在理抗论上慈进行绒了非殿水介铅质(贼包括凯有机恰溶剂喷介质扭,超蕉临界俭流体产介质稻,气串相介男质,携离子间液介萄质等物)中饶酶的欠结构屠与功直能、股非水情介质刮中酶魄的作叫用机所制,右非水烤介质饮中酶吨催化剃作用毅动力窑学等鉴方面灶的研消究,隶初步弃建立葛起非偷水酶掌学(养no顾n-公aq债ue粉ou书s档en督zy女mo肝lo惨gy概)的纽理论惹体系酱。功◆伯并进卸行了罗非水枝介质弃中,绘特别控是在旨有机搂介质临中酶途催化看作用善的应幕用研搂究,咱利用划酶在绵有机耗介质神中的桃催化缓作用副进行联多肽巧、酯载类等袋的生剑产,子甾体干转化黎,功火能高趋分子脱的合篇成,咸手性灰药物屡的拆继分等掘方面绘均取掩得显狭著成壳果。美2.膛有机踪介质涛中水齐和有方机溶微剂对钻酶催瓶化反纵应的揪影响浴2.悬1模有机圾介质之反应匆体系宵:裤◆芬常见怎的有妹机介亩质反漠应体汁系包探括:洞(亦1堵)偷微水套介质浇(m纠ic针ro斯aq亭ue栗ou戒s性me猛di没a)乒体系奥:莲◆丙微水现介质除体系芽是由帖有机夫溶剂杨和微凶量的径水组丢成的锯反应种体系合,是乒在有喂机介略质酶脂催化图中广玻泛应屑用的北一种奶反应慧体系家。悄◆贱微量神的水则主要篇是酶季分子弃的结轮合水细,它沾对维眯持酶市分子蜻的空偷间构同象和塔催化孕活性神至关越重要渐。另停外有届一部糊分水劝分配负在有跌机溶输剂中歼。痕◆温通常益所说标的有盏机介顽质反终应体贷系主什要是脆指微必水介妨质体筋系。地(2挎)张与水四溶性冷有机佛溶剂铁组成台的均情一体按系:岔◆平这种榨均一悄体系封是由群水和斑极性哗较大弯的有夫机溶渡剂互俭相混踪溶组杆成的离反应缠体系隙。久◆安酶和萌底物柏都是驳以溶宫解状懂态存虏在于西均一驼体系馆中。扒由于星极性役大的闸有机偷溶剂伶对一决般酶侨的催国化活盲性影返响较舅大,果所以钉能在洞该反溪应体副系的捆进行引催化拳反应果的酶年较少梨。匠(3品)围与水承不溶取性有谱机溶柜剂组殖成的思两相叼或多吗相体例系:君◆吧这种艇体系风是由歉水和柳疏水贪性较是强的虚有机忧溶剂弄组成五的两利相或梯多相朗反应晶体系护。游忠离酶够、亲坟水性箩底物扰或产躬物溶另解于还水相寸,疏陷水性阳底物剂或产每物溶剃解于沿有机由溶剂员相。希◆歪如果玉采用而固定巾化酶奖,则香以悬允浮形六式存夕在两绘相的邻界面锦。会◆槽催化爪反应摔通常供在两皂相的宇界面扒进行坝。一筑般适舞用于怒底物步和产妈物两尺者或翻其中挂一种傲是属甚于疏观水化劈合物批的催孕化反想应。腹(吵4产)创(正庸)胶众束体顷系:梨◆切胶束射又称从为正伪胶束傍或正贤胶团仗,是跑在大撒量水慢溶液尾中含捧有少夸量与贷水不揪相混咐溶的坏有机躲溶剂蓄,加贯入表使面活絮性剂膛后形园成的含水包缺油的贯微小童液滴当。竹◆六表面熔活性腿剂的卧极性市端朝燕外,冠非极现性端寺朝内泽,有心机溶后剂包混在液兵滴内羞部。固◆忌反应从时,当酶在哨胶束裂外面悄的水筋溶液卖中,防疏水汉性的暂底物叮或产望物在奋胶束撒内部纯。反罪应在怎胶束晓的两屑相界热面中锋进行着。愧(5取)夸反胶奥束体依系:初◆抓反胶叙束又菠称为及反胶带团,吊是指李在大叛量与隆水不煮相混垮溶的叛有机升溶剂陶中,圈含有投少量帮的水质溶液丢,加皮入表呼面活今性剂辰后形承成的请油包尿水的网微小障液滴罢。把◆高表面冠活性南剂的诉极性稿端朝捧内,芒非极葵性端核朝外挂,水事溶液竖包在昼胶束昆内部朝。生◆卵反应嗓时,熟酶分就子在跌反胶茎束内未部的童水溶凑液中馅,疏涉水性缓底物与或产陵物在旦反胶目束外怠部,检催化良反应枪在两掏相的辱界面然中进距行。却2.狱2著水对本有机歪介质剩中酶婶催化盲的影估响:佣(鱼1蹦)宽水对骨酶分蝴子空浊间构暮象的碗影响陆:趟◆断酶分剂子需愤要一抚层水鱼化层战,以芦维持聪其完冒整的裹空间获构象替。食◆胖维持值酶分捡子完湾整的轨空间隔构象讨所必社需的牌最低榆水量轮称为息必需香水(避es川se倚nt深ia精l韵wa旦te监r)表。棒◆岗必需援水与旷酶分斜子的破结构嗓和性辣质有党密切弊关系骆。不阔同的娱酶,蚁所要堵求的翻必需晋水的稍量差赚别很幸大。骆(戚2帜)闷水对危酶催泽化反叼应速场度的鸡影响生:最◆傍有机律介质择中水舰的含后量对地酶催劈化反寄应速们度有锈显著抬影响后。刃◆话在催脸化反贩应速帽度达翅到最怪大时乱的水芹含量呢称为扮最适嫩水含逼量。党◆倍在实耳际应裙用时雅应当破根据庙实际返情况镜,通圣过实底验确御定最企适水欲含量跌。述(3怨)邻水活冻度:赚吃旦恋◆市在有度机介妹质中肯含有兔的水总,主遍要有胁两类敲,一赔类是躁与酶刻分子朵紧密痕结合剧的结叶合水僻,另帖一类颠是溶闷解在必有机户溶剂程中的寻游离尖水。崖◆爱研究止表明证,在菊有机巾介质画体系个中,器酶的桂催化栏活性叙随着岁结合带水量挠的增润加而狮提高筝。绞◆某水活纹度(姐wa笋te米r累ac欧ti笛vi盘ty明,求Aw帆)是命指体础系中暑水的夫逸度傅(f圈ug芳ac帝it胸y)阀与纯晚水逸歪度之皆比。冒通常暴可以良用体越系中悲水的撤蒸汽戴压与限相同催条件蹦下纯码水的号蒸汽奸压之甚比表狗示。朵即:形Aw雅=狱P音/P盘0伙式中烟,P叮为在汉一定幸条件焰下体声系中洞水的肤蒸汽笼压,夏P悼o状为在叙相同闹条件垦下纯以水的采蒸汽商压筛研究木表明妇,在晚一般跌情况正下,龙最适店水含少量随肆着溶怀剂极围性的播增加丹而增甘加。车◆裹而最践佳水例活度助与溶划剂的提极性乒大小得没有弊关系煮。所挣以采心用水公活度绵作为垂参数极来研挖究有祖机介梳质中浆水对倾酶催巨化作单用的舞影响缎更为巡确切归。轰2.些3涨有机那溶剂竖对有吨机介明质中浓酶催柄化的瑞影响尸:啊◆险常用圆的有正机溶驳剂有涨辛烷际,正库己烷端,苯肾,吡个啶,厅季丁狼醇,袍丙醇倾,乙裕腈,聋已酯吧,二宗氯甲巷烷等绕。育(搏1穷)吉有机跨溶剂璃对酶付结构属与功候能的速影响冬:修◆万酶具下有完层整的压空间谋结构闹和活垮性中亭心才断能发狂挥其咏催化弦功能丛。敞◆蔑在有巨机溶遭剂中狮,酶何分子缺(经旨过修枕饰后袄可溶清于有豪机溶特剂者泄除外量)不禁能直咸接溶淋解,跑而是乌悬浮芝在溶延剂中配进行斗催化估反应音。黎◆核有些丸酶在背有机普溶剂民的作趣用下泻,其滤空间域结构评会受轮到某欲些破有坏,洪从而艇使酶酒的催匪化活妻性受透到影株响甚遗至引盼起酶践的变级性失途活。隔(2皇)制有机陷溶剂专对酶或分子及表面歼结构府的影尊响:刃◆羡酶在僻有机作介质挥中与驰有机义容剂弊接触这,酶币分子孔的表产面结况构将宾有所肠变化于。训(3孝)窑有机愉溶剂简对酶惑活性盗中心喇结合捷位点懂的影倍响:樱◆稼当酶养悬浮释于有念机溶扯剂中尼,有眯一部教分溶睁剂能炒渗入者到酶妄分子迎的活夺性中采心,谎与底埋物竞们争活汤性中厨心的凤结合堪位点压,降否低底泳物结启合能鬼力,块从而搭影响蒜酶的喊催化纹活性盈。渣◆由有机季溶剂只分子玩进入梅酶的诵活性个中心胳,会红降低卸活性落中心话的极谈性,隆可能扭降低垮酶与传底物圾的结潮合能贱力。叶(4狐)疮有机叮溶剂年对酶享活性燥的影凭响:育◆锤有些败有机饲溶剂翅,特垂别是眯极性典较强寸的有够机溶膨剂,尼如甲丝醇,蜂乙醇丢等,率会夺术取酶庭分子骆的结梅合水斗,影俘响酶摔分子室微环维境的峰水化迫层,优从而青降低宝酶的毅催化孝活性改,甚包至引赔起酶钳的变宝性失木活。杏◆螺有机美溶剂饥极性比的强冰弱可乖以用弓极性勺系数胡lg踏P表泽示。否P是坚指溶讲剂在澡正辛舞烷与荡水两预相中题的分络配系阔数。脾极性厅系数涉越大骂,表甚明其租极性苍越小悬;反技之极堤性系煌数越象小,其则极距性越炮强。狮◆晚研究植表明搜,有毙机溶滋剂的泉极性孩越强甚,越狂容易里夺取拒酶分检子结弹合水筐,对贴酶活看力的丘影响亭就越说大。映极性姓系数掘lg持P犬<恢2的错极性苗溶剂肯一般男不适炸宜作修为有腰机介旬质酶嫩催化慰的溶危剂使雄用。螺(5削)损有机舰溶剂予对底燥物和崭产物菊分配白的影寇响:燃◆涨有机秃溶剂嫩与水爪之间普的极跑性不跌同,私在反钉应过绣程中胃会影州响底乓物和培产物尿的分当配,省从而篮影响航酶的恩催化钩反应膊。椅◆环有机把容剂声能改闯变酶汤分子孟必需俭水层迫中底腔物和枯产物得的浓歌度。暑◆低一般论选用胡2挂≤怕lg饭P拉≤退5的乐有机尝溶剂茧作为图有机美介质算为宜粥。慎3.掏酶在盆有机角介质馅中的炼催化炮特性伶3.蛛1越底物粉专一姿性:任◆系在有仆机介秋质中检,由海于酶饱分子仿活性劲中心蜻的结肺合部币位与拼底物套之间驶的结骄合状棉态发矩生某绣些变妙化,鄙致使飘酶的显底物慢特异茫性会岗发生工改变额。斥◆灭不同铜的有趣机溶手剂具魂有不缸同的胁极性来,所糖以在保不同黎的有无机介拥质中恭,酶湾的底恳物专教一性偶也不大一样天。握
扔在极谱性较催强的电有机屈溶剂岔中,填疏水欲性较召强的销底物嘱容易迟反应缘;而悲在极收性较漠弱的嘱有机贺溶剂轮中,热疏水犯性较秒弱的谣底物伯容易虹反应栋。她3.抬2诱对映悟体选喘择性誉:俭◆揉酶的灶对映盒体选躁择性赶(e波na满nt误io陵se拘le承ct滨iv版it府y)切又称禽为立抖体选蹈择性湖或立材体异解构专兴一性恢,是按酶在椅对称晒的外士消旋残化合餐物中土识别商一种亦异构窜体的柱能力类大小班的指功标。唇◆匪酶立限体选其择性性的强窑弱可滴以用叫立体过选择洞系数呆(K雕LD刺)的移大小陕来衡缠量。笨立体束选择候系数伏越大没,表目明酶踪催化初的对缘映体穗选择端性越艘强。惯◆蚂立体飞选择芳系数梳与酶眨对L病-型踪和D禾-型黑两种淋异构兄体的表酶转轧换数前(K侍ca蠢t慈)和希米氏饱常数性(K针m船)有惑关。尤即:澡塑供但卸昏(零K亲ca哲t妄/K支m怕)阅L第钳卖K堡LD伏将=改县超蛛廉用确(供K拉ca聪t尽/K干m筑)查D悄式中骗,K屈LD笼坚:立磨体选堤择系泉数讨L:嫁佳L猴-型就异构掏体沸D:签蜂D玩-型老异构浪体立K遭m洲:洞米虽氏常浩数。唤即酶柱催化轿反应补速度叶达到屿最大员反应村速度道一半怖时的道底物启浓度维。挨K辅ca名t哈:注酶班的转漆换数麦。是咽酶催明化效慕率的弓一个辜指标袖。指笼每个孝酶分化子每脾分钟争催化霜底物援转化巴的分屠子数酿。杂◆吨酶在冠有机恭介质蚀中催怜化,驻与在巨水溶军液中山催化励比较屡,由帝于介晨质的涂特性颜发生散改变庙,而核引起执酶的途对映钉体选趋择性制也发村生改鱼变。惹◆匙酶在撞水溶还液中贫催化叶的立逐体选套择性厨较强户,而锐在疏窑水性斧强的品有机计介质渠中,倘酶的胞立体劈选择顿性较犹差。宏3.卷3拨区域仔选择掠性:坡◆讨酶在竞有机俊介质根中进店行催突化时致,具卧有区机域选茅择性富(r挂eg炕io樱se驾le白ct划iv扭it紧y)壳,休即酶催能够笔选择首底物尚分子电中某亲一区释域的浩基团跳优先伪进行坐反应当。鞭◆饿酶区嫌域选鹅择性射的强粪弱可葵以用融区域云选择越系数控K雕rs劫的纺大小深来衡普量。妹区域野选择催系数带与立满体选三择系祖数相娃似,穴只是悉以底甲物分顺子的面区域击位置还1,眼2,洽代替霜异构包体的剑构型表L,硬D。晓即:骨K咏1,廉2项=(润K渠ca追t片/K窗m毒)鉴1作/(狸K雾ca斯t奸/K戚m宜)挺2刃3.架4颈键选硬择性婚:稻◆酒酶在食有机守介质少中进药行催川化的誓另一料个显补著特闪点是吩具有笛化学选键选片择性是。够◆狐键选扬择性严与酶音的来彩源和属有机宣介质果的种勾类有孕关。堆3.红5盟热稳该定性甚:吩◆倦许多沈酶在秋有机朴介质尽中的师热稳堤定性勺比在暮水溶质液中痕的热脸稳定捧性更蓄好。币◆如酶在桂有机歌介质葱中的脉热稳负定性煮还与铺介质手中的劫水含粥量有侄关。墓通常夏情况位下,疯随着淘介质旨中水弓含量浅的增鹿加,旅其热送稳定累性降朋低。仙◆懂在有社机介夜质中回,酶抱的热发稳定址性之燃所以逃增强屡,可况能是皆由于克有机新介质盖中缺刺少引至起酶盾分子慢变性太失活虑的水烟分子盲所致校。适◆吸某些阁酶在笋有机街介质菠与水拾溶液翠中的辈热稳铁定性粒如表挥7-亭1所基示。景表7土-1拨某秋些酶枪在有锈机介苹质与讨水溶互液中悠的热四稳定拥性她锻膜填新酶财介炊质条糕件夫湿热稳夸定性息猪胰尽脂肪惑酶正三丁闭酸甘钉油酯往水,介p搅H7浊.0声T参1/导2揪<亲2垄6咏h罗T娃1/血2满<棉2忙m黄in友酵母包脂肪震酶蚁三丁着酸甘响油酯泪/庚虏醇沟水,伸pH胀7.办0罢T庭1/说2励=晨1.足5鹿h眉T与1/先2油<逃2测m敞in播脂蛋统白脂齐肪酶号甲苯迟,作90凉℃健,4圾00月h绝活力钓剩余次40午%汽胰凝锦乳蛋疲白酶邀正辛营烷,叠10狡0而℃普水,绪pH结8彼.0医,蔬55霜℃壮T阿1/摇2顷=照80萄m拼in健T撒1/昨2粉=病1位5及mi洪n币枯草肉杆菌牧蛋白她酶竞正辛条烷,抛11涛0朱℃双T淹1/程2嚼=壶8妈0蒜mi匆n塌核糖艰核酸错酶肯壬烷厚,何11狮0港℃价,6昏h岭水,比pH抢8佣.0鄙,龄90饮℃亮活力芹剩余雾95惭%闪T籍1/吹2村<视1花0交mi钳n妇酸性活磷酸党酶仔正十父六烷堪,换80疮℃染水,升70杜℃揭T单1/骡2层=黄8椒m站in哀T谱1/困2批=众1疲mi湾n呜腺苷删三磷语酸酶赖(传F贸1真-A膜TP薯as拿e)诊甲苯些,轧70牌℃厌水,慢旬60段℃闲T置1/榨2痒>校2茎4患h沙T贫1/膏2典<学10厘m已in秒限制牙性核土酸内兵切酶机(震Hi司nd伯耐Ⅲ暑)盼正庚匀烷,雷55哈℃猾,3爹0d芦活力殃不降丧低疑β铁-葡津萄糖叮苷酶丢2-舟丙醇牵,暴50厕℃佳,3昆0程h集活力剃剩余蚂80扭%役溶菌轮酶晓环己鉴烷,映11欣0寸℃径水轧T燥1/膝2怜=底14他0写mi柄n达T投1/丙2烛=情1阿0常mi腾n吉酪氨届酸酶器氯仿逼,畜50妖℃飘水,态50炕℃运T谎1/禾2析=寿90虚m匀in膀T蹄1/伴2睁=哑10苍m漆in星醇脱糟氢酶色正庚疤烷,你55仪℃尚T暴1/碑2从>状5杀0棋d哗细胞烈色素瞎氧化班酶罗甲苯拾,0深.3常%水帽甲苯着,1棵.3伴%水愚T将1/监2肃=稍4.丛0增h众T锯1/铜2梅=企1.现7军mi某n半3.安6腾p暗H值背特性常:休◆灵在有坦机介屯质反滤应中先,酶凉所处裤的p急H脂环境喂与酶捕在冻映干或禾吸附鹅到载望体上动之前无所使齿用的忘缓冲症液字pH帜值细相同辰。这悲种现得象称渣之为壁pH芦印记柳(p握H-惠im樱pr增in痒ti刻ng计)或届称为述pH盆记忆描。蛛◆晓酶在幅有机枣介质裹中催跌化反让应的属最适悠pH王值通蹈常与确酶在伶水溶估液中比反应未的最奴适p巡H腾值接栽近或许者相迈同。笛利用善酶的颠这种折pH胃印记蓄特性蝇,可宴以通精过控育制缓蹈冲液声中p仍H值摘的方装法,栏达到症控制难有机糕介质艘中酶马催化冬反应贝的最绞适p开H值彼。辱4.铸有机滩介质诊中酶侨催化悟反应甩的条俗件及行其控宜制康◆勒酶在南有机尼介质狗中可卷以催斯化多或种反对应,厅主要胶包括弟:合验成反宿应、归转移嫩反应暮、醇治解反防应、躺氨解棍反应锡、异绳构反轰应、组氧化棉还原泽反应搁、裂置合反采应等寿。团◆厉酶在触有机拖介质饰中的久各种籍催化恨反应希受到衣各种镇因素疮的影把响:冠酶的识种类笼和浓衣度、四底物糊的种茫类和己浓度偿、有什机溶颤剂的俘种类义,水梢含量丙、温慨度、症pH辜和离阶子强柄度等味。朗4.丑1巾有机半介质状中酶狼催化干反应盆的类驾型:顶(势1底)霜合成席反应棚:交脂肪倍酶或授酯酶布在有层机介季质中晃可以还催化熔有机再酸和安醇进饱行酯率类的鲜合成阻反应经:寻蛋白抵酶可痕以在骄有机贱介质怀中催租化氨粱基酸药进行颜合成撒反应样,生捉成各糊种多闪肽。鱼(禾2捡)能转移坝反应输:绳(载3君)影醇解理反应朱:仅(侄4遮)赌氨解嫌反应牙:依(商5腔)刃异构洗反应圆:赶(睁6汇)共氧化犬还原缓反应皆:废(只7俗)河裂合暮反应买:没4.聪2殖酶的洞选择议:故◆杆不同场的酶轧具有六不同原的结婆构和拢特性比,同孟一种位酶,于由于革来源弄的不猫同和桥处理傲方法狮(如佛纯度染、冻偷干条沾件、徐固定疏化载钓体和象固定吧化方换法、不修饰帖方法还和修训饰剂即等)虹的不今同,色其特裂性也朽有所亭差别奶,所国以要短根据爆需要屈通过级试验货进行沟选择借。童◆累在酶若催化策反应谦时,灵通常历酶所慨作用垫的底约物浓纹度远口远高隙于酶循浓度付,所栗以酶遗催化易反应个速度绒随着购酶浓铜度的嗽升高限而升证高,干两者处成正圆比。辞◆晚在有辞机介拒质中句进行虽催化伟反应遗,对恐酶的透选择棕不但弊要看绸催化凶反应渐的速箩度的苍大小挡,还般要特群别注臂意酶遥的稳窝定性女、底容物专周一性攻、对身映体玻选择皮性、醋区域饲选择停性、宋键选通择性悔等。雄4.桐3乳底物赠的选席择和泄浓度座控制悠:锄◆均由于妥酶在犹有机上介质页中的存底物革专一灾性与章在水礼溶液脊中的洲专一构性有钻些差蛙别,首所以脂要根聚据酶溜在所骂使用催的有兴机介演质中驱的专夹一性嚷选择姑适宜宪的底蜻物。胞◆建底物细的浓叮度对惊酶催雨化反刚应速袋度有央显著拾影响腰,一虫般说外来,售在底听物浓肃度较控低的例情况宿下,固酶催芳化反申应速潮度随剥底物贝浓度在的升想高而良增大斥。当胸底物火达到畏一定淡浓度封以后译,再践增加溉底物讲浓度我,反辉应速激度的馆增大戒幅度牢逐渐赤减少牲,最封后趋借于平昂衡,征逐步窜接近秃最大伤反应突速度岗。汪4.坛4观有机掏溶剂晶的选筛择:尘◆凭有机扁溶剂缺是影格响酶晃在有卧机介恐质中垦催化宝的关盾键因锦素之升一,息在使追用过亚程中抵要根神据具标体情妨况进谋行选末择。应◆犬有机铜溶剂薯的极允性选禾择要姻适当期,极劲性过泉强(锹lg李P颗<嘉2)袜的溶烈剂,务会夺尽取较显多的馒酶分睬子表子面结壶合水雷,影际响酶首分子抄的结踩构,扣并使奔疏水勒性底紫物的摩溶解灯度降夸低,畏从而爷降低扔酶反绞应速怪度,捉在一诱般情歼况下瞒不选金用;姿旧◆穴极性蓝过弱判(l锻gP拐胖≥章5屋)的伟溶剂苹,虽殃然对共酶分卷子必态需水午的夺兴取较碰少,毫疏水位性底声物在鹅有机挽溶剂遵中的垂溶解赛度也凉较高娘,但壳是底依物难贸于进抓入酶透分子伐的必速须水钥层,坚催化撇反应诵速度造也不帜高。域◆蛾通常包选用订2扮≤夺l才gP萍吃≤摔5包的央溶剂扬作为泼催化已反应忍介质惨。简4.因5瓦水含污量的尘控制红:衔钩◆围有机醋介质玉中,标水的符含量影对酶眨分子凑的空削间构记象和史酶催已化反拍应速行度有贴显著装影响昌。给◆县要通赴过试泡验确描定反苗应体丰系的拨最适搅水含磨量。施◆援最适嗓水含随量与铺溶剂重的极柜性有柔关,侧通常为随溶救剂极塑性的呜增大害,最却适水份含量当也增框大;贱而达诸到最痰大反缺应速西度的原水活瘦度却紧变化君不大订,都过在0优.5袋~0腾.6篇之间流。处◆粥在实国际应经用时自应当隙控制数反应纸体系具的水斑活度育在0样.5遇~0谎.6富的范胞围内胡。炎4.滚6飞温度冷控制佛:喂◆格温度数是影韵响酶猴催化逝作用轰的主痛要因羞素之乔一。项在最四适温忠度下银酶催冲化的敞反应赔速度偶达到捏最大棉,这请个温寻度称巧为。妇◆瓣在微占水有钥机介问质中匠,由络于水黎含量描低,尸酶的么热稳们定性料增强挡,所风以其候最适密温度党高于秒在水晚溶液烦中催辨化的巩最适扶温度弄。边◆推要注叨意的竹是酶着与其挪它非哲酶催栋化剂备一样品,温胆度升口高时讽,其眼立体歌选择肠性降她低。竟4.魔7银pH胁值的殃控制峰:钉◆箱酶在宪有机秧介质给中催痰化的逝最适春pH挥值通落常与朽在水有溶液悠中催倒化的巷最适林pH辣值相早同或骄者接枝近。旬◆厉在有仓机介早质中桂,酶洗的催羽化活骨性与贼酶在特缓冲键溶液去中的草pH星值和链离子察强度素有密毒切关饿系。汁◆渠酶分惨子从隔缓冲填溶液斤转到抗有机议介质递后,啄酶分镇子保拐留了政原有旋的p搂H印车记。围◆壤通过意调节咽缓冲裹溶液刮pH宣和离怨子强惜度的覆方法滚对有围机介灾质中施酶催闻化的渡pH昼值和蠢离子墓强度机进行欢调节蹲控制慈。慨5.絮酶非卖水相猾催化外的应澡用屯◆玩酶在凳有机属介质岁中的掠催化线如见柏表庸7-婚2)屠。纺剃尝表台7-情2歪袖酶非践水相酷催化滨的应志用烂哀亏酶覆桨澡催旅化反闹应百临任承锯应爷用吩脂仰肪酶逃翻烂球肽液合成燕电捎柿青虎霉素萝G前领体肽蚕合成蚀圆厨善荐说谅岔酯合息成愉蚂卵恐醇与街有机博酸合煌成酯惑类否爹趴脏渔列防生转酯纹帐矿虹配各徐种酯酷类生昌产布嘱师狸专裂田功聚合催四利演妄二壳酯的盗选择导性聚变合赏镰瓜卖轧缸胆哀酰基姻化驱家恒哥甘醇准的酰己基化伯蛋白泥酶虚浓容房肽范合成爸匀皱计合纳成多仇肽陷啦充鼠痒袭升割酰基秘化展亦认枯糖类沟酰基厘化堆羟基萝化酶嫁胖换梨氧化婆沉灭晴渠甾产体转革化氧过氧才化物震酶欣录聚自合刃止抛方启酚类慈、胺蝴类化干合物舞的聚均合说多酚罪氧化损酶笼薯氧柜化嫁敞哗糊悔芳香难化合雹物的淘羟基顶化定胆固故醇氧浩化酶舅糟氧化斯
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