叶绿体中色素的提取和分离肖用华

叶绿体中色素的提取和分离肖用华2023/6/8第一页，共十四页，编辑于2023年，星期二“叶绿体中色素的提取和分离”实验改进2023/6/8第二页，共十四页，编辑于2023年，星期二色素提取原理：利用相似相溶原理，色素可以溶解于酒精、丙酮等有机溶剂中，形成色素液。一．实验原理：色素分离原理：由于四种色素在层析液的溶解度不同，因而四种色素在滤纸上的扩散速度也不同，从而将它们分离开来。2023/6/8第三页，共十四页，编辑于2023年，星期二二、目的要求1.初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。2.探索叶绿体中有几种色素。胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b随层析液在滤纸上扩散速度不同，可以分出四条色素带。2023/6/8第四页，共十四页，编辑于2023年，星期二三、重点与难点重点:初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法和探索叶绿体中有几种色素。难点:该实验中应注意的问题和培养学生独立实验的能力,掌握探究实验的方法。2023/6/8第五页，共十四页，编辑于2023年，星期二四、对实验的几个地方进行的改进1实验材料的改进：用菠菜作为实验材料，易受季节性限制，此外，色素提取液呈黄绿色，色素带颜色浅，实验效果差。用韭菜，萝卜叶，蒿菜，天竺葵代替菠菜，所得到的实验效果很好，又可以克服菠菜因季节原因，难于取材。2023/6/8第六页，共十四页，编辑于2023年，星期二2提取液的改进：除丙酮外，也可用酒精（无水乙醇）替代，用量相同，结果大致相同；和酒精相比，丙酮有一定毒性，因而不妨换一下。2023/6/8第七页，共十四页，编辑于2023年，星期二3过滤和制滤液的改进：获取高浓度的色素提取液是该实验成功的一个关键环节。一般我们要求色素提取液呈墨绿色。为了得到墨绿色的色素提取液，我们可尝试取消漏斗基部放脱脂棉这一步，，而用3～4层纱布包裹充分研磨过的绿叶，用4层纱布过滤，，通过漏斗将汁液挤于试管中，将滤液收集到试管或小烧杯中备用。这样可以降低叶片含水量，从而提高叶绿体中色素的提取效率。实验证明，改进后较改进前实验效果明显。2023/6/8第八页，共十四页，编辑于2023年，星期二2023/6/8第九页，共十四页，编辑于2023年，星期二4分离色素的改进：分离色素时教材中的条形纸层析法，据许多中学老师反映实验效果不很理想，存在的问题有:①采用毛细吸管吸取滤液，画线很难达到“细、匀、齐”的要求;②制备滤纸条时剪去两角，不容易把握;③层析液容易没及滤液细线。④条形纸很容易下滑⑤层析后容易出现色素带分离不够充分，或色素带分离过度而造成胡萝卜素在滤纸条上消失的现象。

4分离色素的改进：

2023/6/8第十页，共十四页，编辑于2023年，星期二另一种新的方法叫培养皿法不用滤纸条，也不划滤液细线，而取直径为10cm的干燥圆形定性滤纸，用毛细吸管吸取色素滤液，在滤纸的中央点成圆形的色素斑，重复4～5次。然后取一枚缝衣针，穿一条细棉线，在棉线末端打个结，将针穿过滤纸上的色素斑中心，在距线结约4cm处剪断棉线。取直径l0cm的培养皿一套，向培养皿底中加入5ml层析液。把上述圆形滤纸扣在培养皿底上面，无线结的一面朝下，棉线则浸没在层析液中。再将培养皿盖盖在滤纸上。

2023/6/8第十一页，共十四页，编辑于2023年，星期二2023/6/8第十二页，共十四页，编辑于2023年，星期二采用该方法，可以看到色素随层析液由线结处向周围均匀扩散。因此得到的4条色素带呈同心环状，由内而外分别是黄绿色、蓝绿色、黄色和橙黄色，十分清晰。而且层析时，滤纸上的色素不会没及层析液中，点色素斑比划滤液细线容易得多，实验效果非常显著。结果证明：运用灯芯法分离色素，色素量大，分层清晰，四种色素分离出鲜明的四圈色素环，效果显著；操作过程较易掌握，失误较少。此实验方法关键有两点需注意:一是几次滴液体要在同一点上，否则不能形成圆环;二是要掌握好滴层析液的量和时间，否则会影响效果，甚至失败。2023/6/8第