精高考生物冲刺复习课件：微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用张

专题19微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用微生物的分离和培养主要考查培养基的配制与分离微生物的方法：平板划线法和稀释涂布平板法某种微生物数量的测定知道微生物数量测定的方法：直接计数法、活菌计数法、生理指标法培养基对微生物的选择作用熟知选择培养基的配制原理、方法及在微生物选择、分离中的作用利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用熟知微生物发酵制作果酒、果醋的原理、方法、步骤及二者的关系运用发酵加工食品的基本方法理解腐乳的制作原理、方法和注意事项测定食品加工中可能产生的有害物质记住食品中有害物质的检测原理、方法微生物的培养、分离及无菌技术【典例1】(2011·新课标全国卷)有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染，某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以______为惟一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于________培养基。(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即____________和_________________。(3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力________________。(4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_______________和______________。无菌技术要求实验操作应在酒精灯____________附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。【审题视角】解答本题需要明确以下两点：(1)理解筛选菌株的关键是用原油作为惟一碳源。(2)掌握微生物分离、灭菌的基本技术。【精讲精析】(1)选择性培养基的特点是在培养基中加入某种化学物质，以促进所需要的微生物的生长，而不需要的微生物无法生长。本实验的目的是筛选出可以分解原油的高效菌株，因此在筛选的时候选择性培养基的碳源为原油。(2)纯化微生物的方法有两种：平板划线法和稀释涂布平板法。平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。(3)分解圈是原油分解之后，菌株周围形成的无原油的透明圈。菌株降解能力强，周围原油被分解得多，分解圈大。(4)获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的污染。灭菌的方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。酒精灯火焰附近温度高、无菌，因此实验操作应在其附近进行。答案：(1)原油选择(2)平板划线法稀释涂布平板法(3)强(4)干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰【命题人揭秘】命题规律：微生物的培养、分离及灭菌是选修模块的高频考点，以考查基础知识的理解和简单应用为主，常用实际问题作为切入点进行考查。备考策略：备考时，重点要注意微生物培养知识的归纳(1)细菌培养的条件：①营养条件：碳源、氮源、无机盐、水分、生长因子;识记关键：理解微生物培养需要全面的营养成分。②环境条件：无菌无毒的环境、适宜的温度、渗透压、pH等培养条件。识记关键：细胞生活环境要求适宜的条件。(2)作为遗传学材料的原因：体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短。识记关键：类比果蝇作为摩尔根实验材料的优点。(3)培养后的注意问题：因培养物易突变，难预测其变异的利与害，因此，实验后一定要注意灭菌处理后才能丢弃，以防止造成环境、生态污染。识记关键：生物实验后通常都要对材料进行严格的无害化处理。(4)灭菌、消毒对象的选择：环境、培养器具、培养基选择用合适方法灭菌，实验操作者的衣物、双手要消毒。识记关键：微生物培养时要注意各个环境均避免污染。(5)分离方法与原理：微生物分离的方法有平板划线法、稀释涂布平板法，可以使菌株充分分散，培养得到由单一菌株形成的菌落，以利于选种、鉴定、计数。菌落鉴定的依据是菌落特征。果酒、果醋及腐乳的制作原理【典例2】(2010·海南高考)葡萄发酵可产生葡萄酒，请利用相关的知识回答问题：(1)利用葡萄制作葡萄酒的过程中，发挥作用的微生物是_________________。(2)该微生物通过无(厌)氧呼吸可分解_____________，产生的终产物是__________和__________。(3)甲、乙、丙三位同学将葡萄榨成汁后分别装入相应的发酵瓶中，在温度等适宜的条件下进行发酵，如图所示。发酵过程中，每隔一段时间需排气一次。据图分析，甲和丙同学的操作有误，其中甲同学的错误是__________，导致发酵中出现的主要异常现象是_____________。丙同学的错误是_________，导致发酵中出现的主要异常现象是_________。上述发酵过程结束后，甲、乙、丙同学实际得到的发酵产品依次是_____、____、______。(4)在上述制作葡萄酒的过程中，假设乙同学的某一步骤操作错误导致发酵瓶瓶塞被冲开，该操作错误是________________。【审题视角】解答本题三要点：(1)准确记忆酵母菌的代谢特点：兼性厌氧代谢。(2)装置的特点：明确充气管、排气管的应用原理、方法，以及培养液装瓶的要求(预留大约1/3的空间)。(3)操作过程中的排气：酒精发酵时注意密封和排气，醋酸发酵时注意通空气。【精讲解精析】酵母转菌既夺能进屈行有济氧呼鼓吸又常能进劝行无幸氧呼惨吸，饱且只毯有在戏无氧禾条件鸦下发卖酵产释生酒肝精。破欲用日酵母衬菌发肾酵生尽产葡垂萄酒网，需盲要提躲供无跪氧的舅环境酿，所得以对马于实沾验的之装置缠应严晓格控荒制为询无氧申环境略。(1艇)利用捐葡萄肾制作予葡萄闸酒的机过程嗓中，俱发挥澡作用动的微挺生物穴是酵扔母菌业。(2恼)酵母裁菌能皮够利努用葡刻萄糖壁进行宴无氧帝呼吸迅产生办酒精葱和二添氧化净碳。(3钟)甲同裕学未盟夹住呢发酵妹瓶的饺充气隙管，胶酵母刷菌无铸氧呼隐吸产炮生的颗乙醇暑被氧敏化成滑醋酸轧，发路酵液柱变酸挨；丙凶同学祥错在婶瓶中宁发酵牛液过秘多，拨淹没腊了排天气管虹在瓶芦内的的管口屑，这炭样发全酵液波会从气排气枕管流锐出；林甲中乙醇妇被氧锈化成拨醋酸妥，乙尸和丙躁中都吃能产增生乙桶醇，航所以彼甲、趟乙、席丙同赌学实覆际得垦到的填发酵肯产品绒依次让是葡澡萄醋(或果币醋)、葡右萄酒(或果待酒)、葡袖萄酒(或果动酒)。(4胖)乙同薄学由筝于未班及时磁排气饲，导尊致发乌酵瓶蛮中气督压过声大而植冲开炮瓶塞主。答案丛：(1程)酵母纵菌(2沫)葡萄絮糖耻乙醇CO2(3拢)未夹锐住发另酵瓶牺的充险气管篇发处酵液叠从充销气管胸流出究，发井酵液饿变酸或瓶块中发闻酵液喂过多驼，淹考没了课排气仁管在春瓶内危的管鹅口氏排气巷时发佳酵液纺从排岗气管妄流出挽葡昆萄醋(或果击醋)葡萄逮酒(或果麦酒)葡萄辞酒(或果坝酒)停(4净)未及欺时排贷气【命题软人揭商秘】命题故规律惕：果娱酒和湾果醋拉的制仪作是保选修裕模块弄的高六频考拐点。刊考查戴方式料常以秒具体主的生祝产过摔程为乳切入吉点，堆考查急理论钥联系爆实际邪的能澡力。备考的策略锻：(1握)明确牌发酵集的菌靠种来满源和妹条件皱：菌种来源发酵条件温度氧气果酒制作空气中的酵母菌20℃左右无氧果醋制作空气中的醋酸菌30℃～35℃连续通空气(2惧)注意船事项掌：在尺实验今操作在中装赛置的挤选择蓄、装商置的括组装叨及原兽理、拌装置心的共电性与己差异递性、坟正确库使用咽方法过等都坑应是练考查肌和复齐习的谅重点鹿，错扔误选姿择仪高器的俩确认希、错俗误组队装的盼辨析爪纠错铺、操伏作不其当引搜起的驾不良棍后果占分析翁等，役也是片需要袋注意麦的。微生妄物的证培养依、分蚊离及本无菌呼技术高考买指数:★树★1.铅(2纠01漆2·北京刻高考)高中施生物胁学实广验中越，在攻接种演时不鸣进行笋严格陕无菌竹操作爪对实乞验结时果影虎响最凉大的谅一项欠是(郑)A.将少轧许干挖酵母妻加入想到新盘鲜的给葡萄怠汁中B.将毛肉霉菌池液接篮种在掌切成匪小块阿的鲜码豆腐彩上C.将转影基因彻植物透叶片乎接种犁到无袜菌培测养基窗上D.将土哲壤浸权出液赞涂布炸在无阿菌的酬选择却培养禽基上【解题演指南】解答苍本题心的关蛋键是视明确奶其他晴微生觉物对竖实验辣结果疑是否梁有明纪显的染影响颗作用片。【解析】选C。具鬼体分军析如伙下：选项具体分析结论A项在酿酒过程中，需将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中，绝大多数微生物都无法适应酿酒环境而受到抑制，但为了提高果酒品质，最好还是抑制其他微生物的生长

影响不大

B项在腐乳制作过程中，盐、酒和香辛料都具有防腐、杀菌的作用

影响不大C项在植物组织培养实验中，无菌技术是获得成功的关键，培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃

影响大D项在土壤中分解尿素的细菌的分离和计数实验中，选择了选择培养基，本身会抑制或阻止其他种类微生物的生长

影响不大2.脉(2午01粒1·重庆宁高考)下列肝有关宝细菌该培养除的叙女述，制正确贿的是(休)A.在琼贼脂固购体培挽养基廉上长眼出的育单个脂菌落必含有词多种宏细菌B.在培临养基镇中加代入青菠霉素怜可抑弹制真蓬菌而妄促进钳细菌恒生长C.向液繁体培桨养基果中通报入氧屑气能坑促进谱破伤跌风杆慎菌的方生长D.在半荣固体网培养麦基中削接种副细菌冲培养耀后可菜以观军察其停运动【解析】选D。A项，顺在琼铜脂固器体培梅养基氧上长久出的死单个哲菌落鞠是由周一种绩细菌市增殖织而来戴的；B项，少青霉岂素能盏破坏拨细菌欧等原幸核生站物的航细胞泪壁而袋抑制苦细菌衔的增浮殖，狠对真稼菌没光有明穷显作哭用；C项，黄破伤息风杆们菌是描厌氧主菌，购通入砖氧气全会抑取制其闸生长秧；D项，页半固偿体培增养基胳中可俱以观毙察细漆菌的酒运动简。3.辨(2纸01最1·山东环高考)研究质发现藏柚皮忙精油献和乳脱酸菌况素(小分饺子蛋器白质)均有芹抑菌映作用头，两汗者的得提取日及应券用如尼图所文示。(1泡)柚皮扭易焦妥糊，望宜采辽用__映__衬__伸__达__法提歉取柚镰皮精势油，扮该过鬼程得鸦到的苹糊状兴液体貌可通播过__伙__役__植__种_除去蛙其中痛的固练体杂王质。(2表)筛选梦乳酸售菌A时可帅选用阀平板探划线并法或__蛙__荡__沃__接种构。对确新配横制的庆培养窗基灭尘菌时氧所用软的设逐备是__竹__庆__聋__。实屡验前朗需对泡超净跑工作惩台进卖行__补__校__舱__死__处理标。(3档)培养撞基中兴的尿协素可膛为乳课酸菌A生长贩提供__姥__踢__蓝__。电规泳法感纯化绍乳酸垃菌素张时，舒若分薯离带浇电荷局相同独的蛋廉白质熊，则决其分广子量翅越大突，电齐泳速殊度__院__昏__亡__悄__亡__球__。(4僻)抑菌乡丰实验其时，翅在长踏满致盈病菌导的平命板上坏，会暑出现赠以抑牧菌物截质为吸中心披的透钻明圈锹。可编通过招测定蜘透明程圈的__尖__困__鹊__易_来比霸较柚良皮精乖油和袜乳酸款菌素组的抑腿菌效品果。【解析】(1铁)柚皮目易焦千糊，抚宜采期用压快榨法臂提取娘柚皮兆精油羊，不言宜用闸蒸馏纯法，曲压榨引所得哈糊状铸液体高可通吵过过愿滤除尿去其恒中的醒固体初杂质草。(2隐)接种法方法依常用雕的为肌平板维划线叶法和枣稀释夹涂布推平板歌法，撕对培扒养基扮灭菌观时所词用的龄设备会是高霸压蒸窗汽灭徒菌锅赢。实薪验前干需对晓超净感工作守台进黄行紫眼外线品消毒竟处理梳。(3仇)培养筋基中腊的尿尿素可产为乳里酸菌A生长锤提供峡碳源伐和氮羡源。嚼电泳谱法纯并化乳倾酸菌杆素时去，若暴分离归带电难荷相蚂同的统蛋白咽质，系则其扶分子饱量越拉大，雷电泳曾速度亮越慢制。(4悲)抑菌僚实验叛时，轮在长兴满致残病菌村的平策板上销，会太出现斥以抑争菌物泥质为屑中心喂的透帽明圈牛。可堵通过寻测定削透明蛾圈的浪大小萝来比语较柚钉皮精仙油和篇乳酸贩菌素睬的抑吃菌效指果。答案搭：(1肠)压榨蒙过朋滤(2贼)稀释壳涂布版平板越法塑高压宣蒸汽杀灭菌标锅颜紫外材线消早毒(3损)碳源倘和氮嫩源格越慢(4炸)大小果酒借、果店醋及纲腐乳热的制湖作高考途指数:★摔★★蹄★4.释(2券01拖2·江苏梁高考)下列伟关于愤制作袋果酒渴、果凳醋和闸腐乳代的叙头述，虾合理停的是(多选)(墨)A.在果趣酒发绕酵后材期拧瓶开瓶伙盖的觉间隔少时间墓可延冬长B.条件壮适宜兔时醋饰酸菌嚷可将拼葡萄君汁中土的糖该分解睬成醋量酸C.果酒牛发酵慈过程臂中发为酵液配密度戴会逐埋渐减讽小D.将长毒满毛付霉的饲豆腐户装瓶智腌制屯时，浩底层超和近缓瓶口询处需惯加大愚用盐叔量【解析】选A、B、C。具劳体分滚析如拴下：选项具体分析结论A项在果酒发酵后期由于葡萄糖的大量消耗，酵母菌的无氧呼吸减弱，因此形成的CO2逐渐减少，所以拧开瓶盖的间隔时间可延长正确B项在氧气和葡萄糖充足时醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸正确C项果酒发酵过程中随着酵母菌消耗葡萄糖量的增加导致发酵液密度逐渐减小正确D项将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时,越靠近瓶口处用盐量越大错误5.违(2较01够1·江苏测高考)下列瞎与果掩酒、慕果醋君和腐壶乳制厨作相虾关的忧叙述林，正竞确的哈是(栽)A.腐乳微制作督所需径要的蹈适宜勒温度盘最高B.果醋首发酵悉包括拘无(厌)氧发凳酵和渡有(需)氧发余酵C.使用透的菌疾种分烦别是处酵母再菌、剪醋酸翅菌、售乳酸因菌D.使用冈的菌敬种都沾具有醒细胞定壁、惊核糖丑体、DN卖A和RN严A【解题客指南】果酒孙发酵净是无永氧发总酵，件果醋鸟发酵母是有衣氧发顷酵。枕酵母馆菌和浇毛霉滩是真毅核生津物，修醋酸充菌是胀原核睡生物圆。【解析】选D。A项错裁误，柄果酒驶发酵道时适遭宜温那度在18词℃～25优℃，腐艳乳制很作的帜适宜叙温度革是15宋℃～18毯℃，果县醋制验作所遮需要气的适咸宜温裂度最领高，闻为30孙℃～35携℃。B项错辛误，托醋酸逮菌为川好氧率细菌公，氧测气充念足时王，才这能进天行旺路盛的施生理次活动负。因霞此，琴果醋味发酵偏为有尚氧发隐酵，显缺氧痰时醋卸酸菌族的生墨长、勿增殖匀都会洽受到末影响巩。C项错来误，违果酒抵制作惠利用挪的是丙酵母秀菌无题氧呼皂吸产叮生酒机精；叙果醋睬制作诞利用吃的是性醋酸唤菌有震氧呼清吸产棚生醋缸酸；板腐乳弯制作诵利用扩的是世毛霉袜等微鸡生物墓产生匆的蛋陡白酶偿将豆犯腐中米的蛋残白质粒分解坟成小浊分子咏的肽乒和氨广基酸现，脂亭肪酶榜将脂昆肪水奋解成央甘油望和脂葛肪酸狮等，壤因此砌使用要的菌吊种分度别是滚酵母萍菌、搅醋酸请菌和彼毛霉浅等。D项正扶确，男酵母遍菌和唇毛霉师是真伟菌，少醋酸色菌是均细菌朋，它壶们都抱具有虽细胞樱壁、楚核糖缴体、DN帽A和RN投A。6.境(2辣01酬0·广东得高考)小李限尝试徒制作筹果酒能，他校将葡础萄汁场放入男已灭城菌的位发酵怖装置摩中进绵行实从验，刺恰当典的做亩法是(多选)(嫁)A.加入练适量违的酵隙母菌B.一直己打开悦阀a通气C.一直躲关紧紫阀a，偶霞尔打催开阀b几秒拘钟D.把发缎酵装镜置放敌到4开℃冰箱甚中进讨行实副验【解析】选A、C。发域酵的诵原理白是：拉在适握宜的都温度她、无含氧条解件下浆，用贝酵母缠菌分容解葡定萄糖雅产生巷酒精量。酵配母菌漏发酵枪产生槽酒精通的同屑时，晴还产牛生二沫氧化峡碳，院为使对二氧登化碳耻不影肝响发启酵，后多余稿的二胡氧化浅碳必钱须及联时排黄出。饶在该承发酵竭装置纤中有同发酵蒙底物(葡萄疤糖)，但锡没有莫发酵流微生滨物(酵母拥菌)，故著应在旬装置研中加进入适叛量的井酵母技菌，乖所以A正确配。将毁阀a一直深关紧催是为狸了防赢止氧埋气进站入发岁酵装额置；阻偶尔语打开润阀b几秒还钟，烫是为写了排香出发棚酵过句程中铺产生觉的过宾多二俱氧化桐碳，膜所以C正确岭。如观果一催直打看开阀a通气欣，则习可使扛氧气厉进入树发酵掩装置保而影搜响发奋酵，变所以B错误膊。酒闸精发够酵需另要的欠温度台在18桂℃～25布℃，4愧℃时温混度太帖低，珍将影兰响发楚酵的唯速度京，所蝇以D错误帜。7.廉(2唤01停0·北京须高考)在家轮庭中候用鲜浙葡萄深制作歪果酒闯时，肌正确济的操殊作是(坛)A.让发臣酵装随置接腐受光鹊照B.给发赴酵装断置适驳时排踪蝶气C.向发狭酵装舞置通欲入空饭气D.将发盼酵装挺置放货在45灾℃处【解析】选B。酒漂精发铅酵的津适宜酱温度猪在18查℃～25膝℃。在徐无氧而条件辛下，掏酵母英菌能穴进行显酒精探发酵虎，发双酵装脆置不网需要友接受均光照奋，也夹不能断通入或空气彩，发坑酵过祥程中考会产附生二焦氧化缴碳，谣所以枣要适躬时给界装置帖排气亚。8.倡(2锯00侄9·浙江工高考)请在辱标有絮序号仪的空虹白处纯填空界。下面绝是有隔关食馋醋和根泡菜宝制作束的实造验。淹请回揪答：(1趁)食醋区可用亏大米身为原遥料经腿三步助发酵系来制怒作：第一值步：扩大米窗经蒸却熟、递冷却疯后加位入淀每粉酶括，将谎原料剧中的亡淀粉沙分解幕成__物__系__寺__驻_(填中周间产迁物)，然铲后进弹一步茶分解散成葡钞萄糖坏，这幸一过榜程可桃用__猎__镰__基__盟(填淀终粉指速示剂)来检下测，顾因为主该试块剂遇曲淀粉幻玉呈蓝售色，您遇上棵述中晶间产板物呈嫂红色屿。第二屯步：珍用__恩__痛__菌将柴葡萄趟糖转颜化成瘦乙醇县，这炒一发垒酵过燃程中你，玻经璃发宽酵瓶咳不应鼻完全裤密闭端的主证要原医因是__壁__去__旦__锯__况__当__稼__陪__鞠_。第三贞步：轻用__荷__山__菌将室乙醇折转化蜜成乙侨酸，巡寿这一捐过程__块__贝__府_氧气孤。(2我)泡菜满发酵相过程伙中，肺会产光生多支种酸怒，其慨中主您要是__伶__丹__合__箱__，还钉有少什量的腿亚硝壳酸。刊对亚水硝酸睬盐的的定量袍测定侨可以墓用__果__素__妈__短____驱__俘__梯_法，些因为睁亚硝榜酸盐伐与对怀氨基般苯磺疯酸的毯反应轻产物珠能与N—帅1—萘基轿乙二旧胺盐宿酸盐依偶联算成__担__未__朽__快__节__吗__色化油合物牌。进挨行样椅品测惭定时廊，还统要取慌等量借水进庆行同慎样的风测定闯，目既的是__耽__堂__省__惜__六___把__仆__磁__押__绵__甲__林_。【解析】(1验)大米烟经蒸镇熟、睛冷却棒后加示入淀挂粉酶(淀粉级酶必傲须在竖大米负冷却献后加耽入，上因为公酶的门催化宴活性商受温桌度的灯影响)，大纽奉米的微主要逝成分驰是淀商粉，浆在淀被粉酶边催化得作用哥下，肿分解杏成糊惕精(主要动含麦莲芽糖庆等)，这艰一过耻程中页可用闪碘液(或KI师-I2溶液)来检忧测反栋应的耽情况芹。酵蒸母菌仓将葡叔萄糖痰转化宵成乙姓醇的商过程隐中产蹦生CO2，随仆反应旅的进耻行发痛酵瓶寄中CO2逐渐膛增多震，瓶片内压征力升蚕高，苏可能宣引起缩慧爆裂缸，所辆以不译要完敏全密蹲闭。暗醋酸(杆)菌是拨好氧牺型细去菌，纱在将叫乙醇首转化佣成乙研酸的冻过程土中消蜻耗氧呢气。(2正)泡菜姨发酵幸过程暮中，扛产生戏的主桌要是去乳酸扶和少锦量的半亚硝烫酸盐酱，亚的硝酸获盐总饿量达幸到0.净3未g～0.磁5伏g时就域会引萝起人售中毒精，必朽须对风泡菜辉中的贯亚硝霉酸盐雹含量旱进行检测定族。其随测定茎方法尺可用(光电)比色堪法。答案虎：(1吸)第一受步：浴糊精政碘鉴液(或KI土-I2溶液)第二影步：床酵母碰发痰酵过幅程中真会产便生大旬量CO2，使病瓶内哥压力却升高钳而可药能引拣起爆袖裂第三激步：雁醋酸(杆)需要严消耗(2牌)乳酸(或有接机酸)曾(光电)比色擦玫战瑰红清作妥为对岩照微生搂物的也培养1.培养违基的尝成分营养物质概念作用主要来源碳源凡能提供所需碳元素的物质构成生物体的细胞物质和一些代谢产物，有些是异养生物的能源物质

无机化合物：CO2、NaHCO3；有机化合物：糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等氮源凡能提供所需氮元素的物质合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物无机化合物：NH3、铵盐、硝酸盐；有机化合物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等营养物质概念作用主要来源生长因子生长必不可少的微量有机物

酶和核酸的组成成分维生素、氨基酸、碱基等水在生物体内含量很高，在低等生物体内含量更高不仅是优良的溶剂，而且可维持生物大分子结构的稳定

无机盐为微生物提供除碳、氮以外的各种重要元素，包括大量元素细胞内的组成成分，生理调节物质,某些化能自养菌的能源，酶的激活剂

2.培养失基的盖制备馋步骤计算冷→称鼻量→识溶化费→灭冠菌→捐倒平集板(半固嘴体、胡液体蚕培养慢基不训需倒锣平板)3.培养驾基的缸种类并及应热用分类标准培养基类型配制特点主要应用物理性质固体培养基

加入琼脂较多

菌种分离、鉴定、计数

半固体培养基

加入琼脂较少

菌种保存液体培养基不加入琼脂工业生产、连续培养

化学组成天然培养基

天然成分配制而成，培养基成分不明确

工业生产、降低成本合成培养基培养基成分明确，由已知成分配制而成菌种的分离、鉴定

目的用途鉴别培养基

添加某种指示剂或化学药剂菌种鉴别

选择培养基

添加或缺少某种化学成分菌种分离

【名师碎点睛】1.培养嫌基中原各成绣分的久作用(1屋)琼脂肾是一辰种多民糖，紫一般嫂不能磨被微姥生物企分解沃利用旗，只墨作为耻凝固津剂，兔不能夹作为蔽碳源慰和能露源。(2奏)无机喷碳源印只作小为碳绢源，攻不能清作为堪能源砍，而必有机粮碳源言既能暴作为拉碳源绳，又答能作锣为能馆源。为微生绝物最出常用弄的碳摆源是待糖类吃，尤察其是姐葡萄眼糖，原最常绝用的捏氮源呀是铵纵盐、撞硝酸身盐。(3企)无机大氮源签除作忧为氮预源外吉，有栏的也占可以殖作为围能源申，如NH3对于斑硝化难细菌苹来说寨，既粱是氮石源又拴是能胆源；穴有机舍氮源务都可拼作为钩能源贱。(4谷)生长迁因子艇是培既养基熄必需朋的成旬分。(5斧)培养症基配讨制时粉目的嗓要明旅确、洞营养岔要协匹调、pH要适烦宜。2.选择特培养匙基的赖选择其作用普通杜培养锯基可段生长盾多种箩菌株态，而桑选择宋培养堪基只心能生始长一允类菌北或一查种菌捐株。触因此纠应用宣选择饭培养挎基可屿分离姜出所辫需要治的微么生物嗓。无菌猛技术1.关键肢：防止讯外来微杂菌租的入虾侵2.无菌丘技术歉的内浙容(1买)对实极验操赏作的空间、操猴作者宵的衣杀着和高手，柄进行清洁休和消邀毒；(2娘)将用渐于微蛛生物夫培养评的器蓝皿、撤接种催用具址和培丢养基际等进睁行灭菌，应蒜在酒镜精灯寺火焰慎附近滑的无饭菌区廉进行垒操作戒；(3乌)操作度时应颜避免堡已经扑灭菌页处理集的材迹料用起具与年周围仓的物先品相帆接触哄，防丛止二雾次污竭染。3.无菌董技术盛的方充法——消毒春和灭催菌的压比较条件结果常用方法应用范围消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微生物煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高温的液体化学药剂消毒法用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子

灼烧灭菌法

接种工具

干热灭菌法玻璃器皿、金属用具高压蒸汽灭菌法培养基及容器的灭菌【名师案点睛】1.灭菌忘的原抱理利用久强烈惠的理若化手挖段使中细菌呆蛋白笛质变嫂性，初从而柴达到灿消灭厦细菌番的目恰的。2.化学蹈灭菌脚法的街局限膀性化学扛物质膛难以出透过超孢子惑、活餐芽孢绞的坚锅硬外史层而狱不能犯进入磁细胞拥内，虑因此愧用化迎学方席法难店以消虑灭孢恋子和冈芽孢排。3.酒精洲消毒际时，70乌%的酒的精杀撇菌效测果最已好，廉原因妖是浓椅度过迁高，副使菌协体表鲁面蛋似白质律凝固周成一脾层保隆护膜闲，乙肥醇分码子不慈能渗委入其藏中；杨浓度浊过低维，杀莲菌力准减弱递。微生嫩物的场纯培哈养1.纯培坑养利用议一定藏方法城，将单个阿细胞与其靠他细膏胞分累离开猎，进球而在包适宜趴条件命下培遮养成欠单细奏胞来飘源的衬群体通。2.微生锄物纯苦培养鬼的方湿法(1液)平板纺划线仓法：①概超念：侄通过砌接种泥环在障琼脂蔑固体漏培养虽基表犹面连续恩划线的操腰作，举获得菌落的方神法。②接足种步蓬骤：将接腹种环汗放在租火焰件上灼烧，直番到接灵种环烧红↓在火焰支旁冷锅却接种誉环，婚并打方开棉司塞↓将试床管口通过砍火焰↓将已雷冷却老的接尘种环希伸入挨菌液斯中，谷沾取尤一环戚菌液↓将试侨管口炊通过歪火焰懂，并饿塞上夺棉塞↓左手探将皿敏盖打石开一宏条缝模隙，势右手啦将沾府有菌策种的淘接种悲环迅宁速伸省入平感板内亏，划壁三至供五条平行根线，盖盲上皿攻盖。两注意不要闷划破培养凯基↓灼烧幅接种防环，音待其冷却后，姥从第一区域升划线落的末陆端开煎始往第二区域凯内划超线。械重复居以上仆操作锅，在共三、存四、斑五区漏域内厨划线叙。注粒意不捕要将忆最后交一区闭的划絮线与叶第一接区相团连↓将平汤板倒矛置，详放入犹培养策箱中博培养(2狠)稀释烫涂布竟平板号法：①概阻念：屿将菌饼液进敬行一脸系列转的梯度击稀释，然阶后将亩不同伯稀释谣度的全菌液吸分别钞涂布课到琼消脂固咬体培确养基眠的表源面，柳进行邀培养相。分工为系列窗稀释操作踏和涂布祥平板操作侵两步嫩。②接听种步牧骤：将涂枝布器幅浸在盛有爽酒精的烧园杯中↓取少多量菌喇液，偶滴加叠到培踏养基将表面↓将沾访有少闭量酒浓精的倘涂布烛器在按火焰割上引源燃，湿待酒验精燃闷尽后留，冷信却8槐s～10捞s↓用涂矩布器只将菌补液均泊匀地秋涂布宗在培摊养基浓表面【名师狸点睛】纯培属养的牵注意舒事项(1侦)平板干划线爪操作疤时，悉接种早针在众每次户划线寇后要从注意惠灼烧返灭菌势。(2索)稀释策涂布逗平板互法中翠，系帝列浓政度(梯度)溶液扒的稀章释是帮实验维的关雁键。分解爬尿素冶的细旅菌的沿分离她与计崭数1.筛选膀菌株配制苦选择两培养勾基，网把尿素作为扑培养而基中瞧的惟一冷氮源，原瓜则上连只有腹能够剥利用咸尿素及的微拉生物激才能旨够生归长，阵其他川微生阀物则汤不能抬在此贫培养君基上质生长珍。2.统计层菌落闯数目(1邮)理论匙依据要：当跃样品格的稀窄释度完足够市高时抚，培家养基寇表面舍生长衫的一沿个菌敏落，涛来源别于样芹品稀臭释液紧中的一个肉活菌。通虏过统扣计平灭板上最的菌兵落数挨，就服能推院测出款样品穷中大狮约含羽有多石少活藏菌。尖为了闪保证桨结果椒准确名，一稍般选联择菌丛落数砌在30～30背0的平窄板进涛行计数数。(2比)计算渣方法稿：每幼克样赤品中翁的菌缴株数=(义C÷承V)萌×M其中C代表品某一赵稀释成度下艰平板饥上生除长的平均翁菌落姐数；V代表岂涂布叼平板源时所与用稀释爽液的俘体积(mL)；M代表稀释肚倍数。(3马)统计塞的菌没落往怖往比错活菌狠的实雪际数捆目低。因境为当羞两个柳或多顽个细今胞连位在一起起时仗，平牺板上锁观察忆到的雅只是树一个骄菌落咳。(4懂)为使泛结果彩接近熊真实居值，怪要设东置重泥复组佛，取彩其平均债值。可个将同奸一稀刷释度特的样嫂品滴扶加到传三个能或三报个以统上的把平板趴上，盼经涂格布、裤培养作计算蒜出菌勇落平部均数缠。3.设置威对照可排睁除实对验组把中非测喝试因兼素对实堆验结狂果的制影响惑，提境高实嗓验结堤果的掀可信医度。4.实验惜流程(1盾)以尿粉素为绳惟一既氮源膛的培车养基秀作为实验过组，制良备牛肉秘膏蛋盼白胨坝培养梳基作为肥对照腿组，姨用来眨判断夹选择锯培养山基是宣否具湾有选兴择作才用。(2蚂)以培浸养基洞加土撑壤样往品进葛行培灶养为拒实验游组，截培养都基不民加土租壤样辨品进趁行培帝养为栽对照稠组，殿判断岂培养蛙基是否永被污映染。5.鉴定席分解队尿素要的细济菌(1饺)原理裂：细努菌合努成的脲酶将尿健素分普解成疫氨，铜使培钻养基嫂碱性钩增强纸，pH升高务，因右此，字可通谁过检潮测pH的变行化来判富断该争化学抢反应珍是否情发生失。(2电)方法寄：在占以尿静素为安惟一计氮源服的培裹养基忧中加店入酚红指示棍剂，神培养垃某种虑细菌态后，坛如果pH升高狗，指新示剂芬将变接红，改说明允该种瞒细菌伶能分纤解尿象素。【名师乔点睛】测定伍微生汗物数询量的值方法(1两)直接预计数唱就是踩利用愿细胞拿计数封板直异接统五计菌疲液中斯的菌冰体数蓬量，今既有耐活细学菌，朝也有商死细琴菌；(2舒)间接睁计数然法通凳常通省过计与数菌越落、者细胞品产物赔、生睡理指纲标等应来计耗算菌搬体数禁目。键菌落差计数肠只统购计了毅活细棉菌数介目，千一般崇较理谁论值豆要小贷。【状元盯心得】分离慎微生槽物的利方法(1椒)利用建微生曾物对姨某种许抑制满性物穷质的稍抗性饲，在赴培养敌基中悉加入眯该物解质，该经培岗养后崖抑制此原来汽的优画势菌掩而选贫择抗婶性菌枕，从敌而分酷离目言的菌衫株的准方法议。(2升)分离狭细菌讯的方粪法一捏般为驶选择但培养掀基培脚养法汉。(3娃)菌落允计数勇一般痛计数30～30贸0个菌蜘落的闸平板趣，求速平均剧值。分解找纤维匙素的棕微生幅物的妨分离1.筛选廉原理(1姐)(2伟)即可税根据叠是否应产生透明餐圈来筛名选纤侨维素扎分解荒菌。2.实验手流程土壤绞取样：富献含纤畅维素你的环胳境↓选择慰培养：用题选择绣培养心基培递养，油以增样加纤枪维素遗分解击菌的歼数量↓梯度膊稀释↓涂布慈平板膊：将厨样品柜涂布龄到鉴独别纤蔬维素数分解庄菌的病培养昼基上↓挑选泽产生垒透明呢圈的盒菌落3.鉴定——刚果暴红染色洋法两种关染色向法的污比较扶：方法先培养微生物再加入刚果红进行颜色反应倒平板时就加入刚果红过程培养基上长出菌落→覆盖CR溶液(质量浓度为1mg/mL)10min～15min→倒去CR溶液→加入NaCl溶液(物质的量浓度为1mol/L)倒掉NaCl溶液→产生透明圈配制CR溶液(质量浓度为10mg/mL)→灭菌→按照1mLCR溶液/200mL培养基比例混匀→倒平板→培养→透明圈优点显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用操作简便，不存在菌落混杂问题15踪蝶m尤in方法先培养微生物再加入刚果红进行颜色反应倒平板时就加入刚果红缺点操作繁琐，加入刚果红会使菌落之间发生混杂(1)由于纤维素和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质，可能使产生淀粉酶的微生物也形成透明圈，即假阳性反应(2)有些生物具有降解色素的能力，它们在长时间培养过程中，会降解刚果红形成透明圈，与纤维素分解菌不易区分【名师耳点睛】纤维镰素分秘解菌河的分观离实逮验应融注意奏的问娘题(1渴)为确们定得火到的孕是纤云维素脉分解碌菌，每还需年进行拍发酵左产纤翁维素原酶的炒实验践。纤贸维素卵酶的崖发酵滤方法还有液欧体发擦酵和捷固体楼发酵枝两种毯。纤硬维素攀酶的愿测定宅方法穗，一秃般是拖对纤弦维素坛酶分馆解滤不纸等马纤维载素后晨所产舌生的循葡萄洪糖进抽行定脸量测牙定。(2偏)流程拘中的友“选事择培着养”介是否文需要贵，应透根据团样品完中目竟的菌沙株数甲量的甲多少兰来确铁定。【状元辟心得】分解允纤维轿素的公细菌篮的分楼离与隶鉴别袖方法(1竞)纤维承素分租解菌踪蝶的选碗择培域养基旷属液寨体培搜养基衫，以骨纤维全素为梅惟一仓碳源增和能邪源。择能利臂用纤替维素竟的微沾生物子才能听在此奸培养珍基中裹繁殖漏生长遥。(2猫)纤维弦素分钻解菌炉的鉴铃别培洒养基信属于双固体攻培养技基，袜培养雷基中死加入源刚果伪红染俗料。缸只有喊能产居生纤起维素尾酶的帮微生爸物，挥才能倍使培斯养基枕中的刚刚果相红—纤维摇素复教合物奔无法酸形成锐，从富而出浅现透创明圈汤。果酒腊、果匀醋的胖制作1.原理(1势)果酒验制作米的原扁理：酵母铸菌在有氧险条件传下能大拼量繁押殖，笛在无驳氧条驻件下姓，能鞋通过落无(厌)氧呼端吸产锈生酒纽奉精。反应匀式：C6H12O6+6谅O2→6改CO2+6司H2O哥C6H12O62C2H5OH鹅+2顺CO2(2只)果醋厦制作微的原射理：①当氧气残、糖升源都充轨足时帝，醋守酸菌体将葡呜萄汁否中的累糖分督解成猾醋酸土。反应驻式：C6H12O63C盖H3CO咱OH酶__今__锦__划__沫__宴__图__蛾__壤__狮__累__酶__命__择__熟__碧__准__福__絮__躬__糟_②当缺雁少糖固源时打，醋喊酸菌愿将乙壶醇氧巨化为崭乙醛私，再哑将乙候醛变特为醋传酸。反应布式:2散C2H5OH膛+O22C镇H3CH肿O+戒2H2O2C害H3CH炎O+推O22C窑H3CO逝OH酶酶__怀__罗__萝__变__掉__麦__铃__夺__签__那__淹__御__材___腹__帝__廉__凝__污__狂__滋__御__滨__胡__茅__倡__杆_2.步骤庆比较制果酒制果醋相同过程①选材和材料处理：选择新鲜的葡萄，先用清水冲洗葡萄1～2遍除去污物后，再去枝梗②制作发酵液，防止杂菌污染③发酵：将葡萄汁注入发酵瓶，注意液体量不要超过发酵瓶总体积的2/3

制果酒制果醋不同过程④将温度严格控制在18℃～25℃，时间控制在10d～12d左右。发酵旺盛期的CO2产量非常大，要及时排气，防止发酵瓶爆裂⑤检测指标：7d～10d以后，可以开始进行取样检测工作。例如，可以嗅味和品尝、用重铬酸钾检验酒精含量，进行酵母菌的镜检、测定pH等工作

④将温度严格控制在30℃～35℃，并注意适时通过充气口充气⑤检测指标：果醋的制作是否成功可以通过观察菌膜的形成、嗅味和品尝初步鉴定，再通过检测和比较醋酸发酵前后的pH进一步鉴定。还可以在显微镜下观察发酵液中是否有醋酸菌，并统计其数量作进一步鉴定【名师状点睛】控制织好发骨酵条友件是诊实验筛成败帐的关逢键(1瓶)果酒玩：①温通度:2吹0迫℃左右乳，最筐适合挪繁殖存：18邮℃～25亿℃，酒狗精发什酵。②氧纵气:前期颗通O2，然踢后控爹制无O2。(2断)果醋初：①温全度：30征