第四章灭菌制剂与无菌制剂

第四章灭菌制剂和无菌制剂

苏金柱王帅刘青英马楠

第一节概述一、基本概念

灭菌制剂（SterilizedPreparation）

：采用某一物理或化学方法杀灭或除去所有活的微生物繁殖体和芽孢的一类药物制剂。无菌制剂（SterilePreparation）

：在无菌环境中采用无菌操作方法或技术制备的不含任何活的微生物繁殖体和芽孢的一类药物制剂。灭菌和无菌制剂注射用制剂眼用制剂植入型制剂创伤用制剂手术用制剂注射剂、输液、注射粉针滴眼剂、眼用膜剂、软膏剂、凝胶剂植入片溃疡、烧伤及外伤用溶剂、软膏、气雾剂等止血海棉、骨蜡二、灭菌和无菌制剂的类型直接注入体内或直接接触创伤面、粘膜等的一类制剂三、灭菌和无菌制剂的质量要求除应符合制剂的一般要求外，还必须符合：无菌成品中不应含有任何活的微生物；无热原制剂内不应含热原，特别是用大体积的，供静脉或脊椎腔注射以及一次用量超过5ml的注射剂；可见异物及不溶性微粒应符合药典的要求；安全性应具良好生物相容性，对组织基本无刺激性，一些非水溶剂和附加剂必须经动物实验证实无刺激性和毒性，以确保安全；渗透压注射剂渗透压要求与血浆的渗透压相等或接近；大容量还有等张要求。pH一般控制在pH4-9稳定性物理稳定性和化学稳定性，确保产品在贮存期间安全有效；其他降压物质,蛋白质,鞣质1.制药用水的制备2.热原的去除3.液体过滤4.空气净化5.灭菌与无菌操作第二节、灭菌制剂和无菌制剂的相关技术饮用水1纯化水2灭菌注射用水4注射用水3按使用的范围不同分

一般应根据各生产工序或使用目的与要求选用适宜的制药用水。药品生产企业应确保制药用水的质量符合预期用途的要求。一、制药用水的制备（一）概述制药用水的种类饮用水（tapwater)--

为天然水经净化处理所得的水，其质量必须符合现行中华人民共和国国家标准《生活饮用水卫生标准》（用于药材的漂洗、制药用具粗洗及药材的提取溶剂）。纯化水（purifiedwater)--为饮用水经蒸馏法、离子交换法、反渗透法等制得的供药用的水，不含任何附加剂(配制普通药剂的溶剂或试验用)。注射用水(waterforinjection)--为纯化水经蒸馏所得的蒸馏水(无热原水；配制注射剂、滴眼剂等)；灭菌注射用水(sterilewaterforinjection)—注射用水按注射剂生产工艺制备，不含任何添加剂(注射用无菌粉末的溶剂或注射剂的稀释剂)；

(二)各种水的来源及质量要求制药用水质量要求（符合Ch.P2010二部各自项下的规定)纯化水：检查项目包括酸碱度，硝酸盐与亚硝酸盐，氨，电导率、总有机碳或易氧化物、不挥发物及重金属。注射用水：规定pH为5.0~7.0，氨浓度不大于0.00002%，内毒素小于0.25EU/ml，其他检查项目与纯化水相同。灭菌注射用水：应符合注射用水项下各项检查的规定，并应符合注射剂项下有关规定。

渗透现象反渗透现象盐水半渗透膜纯水反渗透法：20世纪60年代发展起来的，国内目前主要用于原水的处理，美国药典将其用于制备注射用水。

反渗透法（图示）

半透膜：膜材为醋酸纤维素膜和聚酰胺膜

浓度差：两侧分别为盐溶液和纯水

外压力：大于渗透压，达到盐、水分离1.醋酸纤维素膜2.聚酰胺膜纯水盐溶液施加的外压力

反渗透法制备高纯水的工艺流程原水

多介质过滤活性碳吸附精滤高压泵一级反渗透二级反渗透高纯水高压泵反渗透法优点：耗能低、水质好、设备使用与保养方便等；离子交换法:

采用离子交换树脂,除去水中存在的阴阳离子的方法（比电阻大于100万Ωcm，对细菌和热源也有一定的去除作用

特点：化学纯度高、

设备简单、耗能小，

成本低

常用交换树脂阳离子树脂床、阴离子树脂床、

混合树脂床串联阳离子交换树脂：氢型：RSO3-H+钠型（稳定）Na+

阴离子交换树脂：氢氧型：RN+(CH3)3OH-氯型（稳定）：Cl-处理原水的流程：阳床脱气塔（CO2）阴床混合床新树脂：处理、转型旧树脂（老化）：再生---强酸、碱

用途：可作普通制剂的溶剂，还可作蒸馏法制备注射用水的水源。当原水含盐高达3000mg/L时,不宜采用离子交换法制备纯化水.（1）蒸馏壁法制备枪注射跨用水制备校注射贺有水鞭最经宴典的粥方法般。种类端：塔式祥和亭煎式蒸仪馏水办器、赏多效码蒸馏撇水器钳和气涂压式四蒸馏用水器舱。构成点：蒸发染锅（芒塔）校、隔润沫装博置和悔冷凝厦器②多粉效蒸鞠馏水贡机特点踪蝶：热效哭率高寇、耗昆能低蛛、出古水快、纯度蹲高、作水质主稳定、并有斜自动虫控制移系统浪。③汽升压式恨蒸馏沫水器利用愚离心须泵将省蒸汽雅加压,以提短高蒸掏汽利峰用.特点脏：无需搅冷却袋水、耗能印大.用于等蒸汽摔压力峰较低,工业约用水飞比较洋短缺案的厂晓家用.多效蒸馏水机蒸馏塔设备固定架控制面板

冷凝器

附录ⅩⅥ制药等用水哀规定制药道用水蜘的制主备从系统设计块、材炭质选势择、绒制备灯过程颠、贮蛛存、巡寿分配超和使快用均绒应符抓合药品生产楚质量扶管理丢规范草的要僚求制药示用水帐系统秤应定皂期进狱行清湾洗与喇消毒搅，消蠢毒可屑以采葛用热扎处理潮或化较学处块理等疲方法单。采蚕用的休消毒凉方法也以及息化学狠处理御后消乌毒剂史的去卷除应南经过叫验证聋。为保菠证注胁射用栋水的蝇质量穿，应减蠢少原塘水中肠的细拒菌内裤毒素扛，监控俘蒸馏黄法制子备注叨射用围水的协各生望产环阵节，并防宜止微榴生物塞的污僚染。得应定期脸清洗送与消窑毒注脚射用洪水系统。注射的用水冒的储郊存方妥式和躬静态醉储存挺期限灶应经握过验督证确娃保水神质符冲合质妹量要遣求，叙例如望可以匪在80释℃以上坐保温或70密℃以上保温摸循环颗或4℃以下家的状口态下香存放偏。（一膜）概索述过滤肚的概肤念:利用侵过滤折介质丢载留暗液体侵中混例悬的谈固体阀颗粒捐的分离锯的作计用。滤材赶、滤疏浆、草滤饼用或滤汽渣、液滤液滤器:拨a.垂熔课玻璃纲器b.砂滤即棒c.微孔初滤膜祝滤器d.板框蜜压滤驻机e.钛滤氧器二、偷液体终的过定滤1、过植滤机竹制：迅（1）介顺质过静滤：介质限的拦缩慧截作云用进瓣行固棉－液缺分离表面揭滤过鼓：颗粒>孔径蜘如微层孔滤马膜、欠超滤传膜和劫反渗舒透膜贡等深层烦截流荷：颗粒<孔径宵如每砂滤六棒、曲垂熔洪玻璃灵漏斗钱、多爪孔陶鬼瓷、厕石摇棉滤友过板翼等（2）滤笔饼过呜滤：固体枯粒子冠聚集滨在滤希过介膨质表否面逐触渐增用厚形牧成滤兔饼层乒起拦浙截颗看粒的检作用场。（二盆）过政滤机侵制与甘影响胜因素液体偶的流茧动遵号循Po绑is舌eu提il窑e公式斑：V－过违滤容舅量；P－操艰作压仆力；r－流蹈过层死中毛加细管枕半径馒；t－过叉滤时粒间；－液锁体粘剪度；L－毛殖细管认长度鲜；V/冷t－过教滤速久度。P加压牙或减妇压滤萄过法四趁热拣滤过r助滤役剂。l预滤2、影艺响滤售过的景因素ltrPVhp84=常用绑的助贼滤剂棒：①硅隆藻土(主要散成分助二氧雷化硅)；②活填性碳(有较迁强的回吸附恋热原凑和微全生物体的能垄力，厉能吸唤附生勿物碱傅类药滥物)；③滑跑石粉(吸附挤性小卧，能守吸附尾溶液耳中过尼量不户溶性康的挥内发油夕和色我素，羡适用视于含缎粘液折、树际胶较稀多的淘液体)；④纸惠浆(有助厦滤和渡脱色搭作用练，中邪药注眨射剂若中应锁用较情多)。1.闻常用打滤器(1撑)砂滤敏棒硅藻急土滤仆棒,多孔狡素瓷前滤棒特点量：砂滤尚棒价按廉，永滤速抢快，易于薯脱砂德，对沟药液粗吸附刮性强谷，吸留探药液现多，厚难于刑清洗捎，可能恒改变饿药液pH值,注射布剂生尼产中扩一般摩作粗滤之用霉。（三圈）过偷滤器头与过贱滤装态置(2慎)钛滤卷器粉末六冶金阁加工挖制成抖，钛尺滤棒紫与钛茂滤片特点蛾：抗热痰震性府能好题、强街度大茄、重测量轻不易场破碎才，过盏滤阻栋力小孤，滤更速快注射肠剂生队产中恰一般接作粗贯滤之锅用。(3蚂)垂熔汪玻璃该滤器1～6号特点醉：化学模稳定睡性强顶，对悼药液讽的pH值无启影响;滤过傍无渣继脱落晒，对扯药物舰无吸超附作咱用；易于质清洗变，可层以热芽压灭途菌等;价格浴较贵够，脆议而易沉破常作灭精滤君或膜垃滤前练预滤.3号多障用于打常压帮过滤易，4号多太用于讯减压露或加拳压过稻滤，6号用谨于除秧菌过粮滤。(4河)微孔深滤膜步滤器侮：高分赖子孔径0.摩25～14m特点舟：孔径奸小、兰均匀惠、截咱留能摔力强踪蝶；孔隙纷率高殖，滤厨速快杂；无介酷质脱有落也主不影含响药宫液的pH值；滤膜顿吸附压性少协，不打滞留陡药液箱；药液胁之间细无产归生交睛叉污己染测定冤孔径禾大小:泡点塘法膜：展醋酸引纤维健膜、给硝酸亏纤维供膜、螺醋酸滩纤维约与硝酸波纤维所混合煌酯膜肯、聚亭酰胺挺膜、房诚聚偏狗氟乙旗烯膜切等(4紧)微孔妨滤膜若滤器理化珠性质涝：热塌稳定告性；楚化学预性能犯稳定麦。尼龙种膜或怕聚四版氟乙裙烯膜畜化学稀稳定避性好叔。主要织用于摩注射名剂精既滤和遥除菌佳过滤皂。缺点衡：易堵务塞；有些扰滤膜添化学睡性质梨不理容想。念如纤维倒酯膜踪蝶不适猫于酮傅类、筒酯类耽、乙醚-乙醇斩混合激溶液丈以及逐强酸棉强碱劣；(5茄)超滤念膜滤葛器：有机艘高分损子聚舞合物朱制成能截侄流溶弓液中牧的高摸分子鞭及胶细体微窗粒，撞截留砌的粒太径范努围为1～10丽n餐m，超滤额膜可战除热必原超滤但膜的炎孔径权以截选留的凉分子碎量表栏示。(6岭)其它:如普狱通漏灿斗(玻璃谢和布孟氏)、板然框式摆压滤夹机等粗滤塘滤器哪：砂滤歪棒板框老式压吊滤器钛滤建器精滤讲滤器夸：垂熔岭玻璃泻滤器微孔筒膜滤至器超滤绍膜滤弓器4滤器遗选择在注励射液忆生产签中，泡一般箩采用兴二级迁过滤招：高位饲静压发过滤减压积过滤加压尊过滤5常见帐过滤蛛方式加压帖滤过凶装置减压欲滤过筝装置1定义悄及组则成定义复：热原择（py挖ro蓬ge莲n）是貌注射东后能供引起槽人体贺特殊开致热皆反应春的物境质总胞称。火是微扫生物栽的代渗谢产陷物。超大多绑数细蝴菌都学能产剩生热退原，览但革兰带氏阴站性杆深菌产生呼的热怕原致桑热能育力最偶强。组成激：热原侍是由碰磷脂制、脂杏多糖玩及蛋鞭白质吓组成冤的有畅机高搏分子惰复合穴物，局也称悔内毒逆素(e卖nd件ot脾ox某in墓),其中寸脂多悔糖(l杀ip扛ol痰ys彻ac局ch衬ar临id挨e,倦L识PS污)是内宴毒素边的主捎要成助分，镜具有持极强丘的热弃原活粘性。热原=内毒逗素=脂多迷糖。三、焦热响原的去除2.热原塑的性杨质①耐泳热性射：18喘0胃~2描00C颗2尼h、25绿0C兼45锻m傻in、65娱0C封1贿mi歌n可彻拒底破乒坏②水运溶性蓄：③不驴挥发潜性：④过心滤性妖：分子缴量约10106，大壁小约1~朗5嫁nm⑤吸附送性：可被退多孔岛性活删性碳筑吸附⑥被好化学筛试剂包破坏衫：浓硫国酸-重铬找酸钾姓溶液艰、氢脾氧化懂钠、寺高锰晋酸钾地及过议氧化非氢均柿能破负坏热郊原3.热原清污染痕途径①聚经溶拳剂（铲注射踢用水贪）带饥入：②经信原料身带入鼻：③经签使用不的容赶器、耳用具羡、管精道及虑装置些等带楼入：④经因制备僵过程步与生系产环县境带驰入：⑤眼经灭坟菌后费带入窃：⑥歉经输谣液器数带入饮：4、热烈原的惭去除录方法(1惧)高温饭法；25川0℃，30就mi以n以上墙。(2愧)酸碱诉法；重铬园酸钾什硫酸其清洗市液或袋稀氢调氧化拜钠液棚。(3厨)吸附芳法：活性告碳用馅量0.恢05汇-0只.5蛙%(与w/柔v)。(4旁)蒸馏关法：多效荷蒸馏洁水机车制备锦蒸馏借水(5封)离子掏交换浩；10浓%的#3妥01弱碱谎性阴参离子宗交换鄙树脂妥和8%反#嘱12熔2弱酸京性阳视离子乌交换举树脂胜，除冠去丙交球注幕射液扬中热勇原。(6循)凝胶铜过滤遮法；二乙垒氨基珠乙基牛葡聚表糖凝滥胶(分子声筛)。(7识)反渗蛮透法；通需过三那醋酸甲纤维染膜除芳去热摸原。(8买)超滤阔法；3.剖0~辰15朴nm超滤购膜。(9低)其他档方法如二泥次以区上湿贩热灭谱菌，柏或适治当提骆高灭斥菌温僵度和付时间芝，以馅及微逮波等挖。5.热原连去除放方法惹的应驴用①筐容器部上热饭原：可用带高温销法及耍酸碱瓦法。②水宝中热倡原：蒸馏读法及模反渗痰透法。③溶挺液中否热原昼：吸附僚法及糟超滤雕法。活性涝炭对慕热原赤有较词强的肌吸附向作用核，此愿外还貌有助址滤脱鼻色作瓜用，注踩射剂亲中广含泛采优用。挥超滤校膜近桨年已寨逐步匀用于斧注射评剂用腐于截届留大顿分子谅杂质霸以提数高澄柳明度模及除橡去热蔽原。概念灭菌(st坑er吉il术iz缴at集io熟n)：应碎用物话理或辣化学鉴等方恳法将阿物体创上或坡介质榆中所有微生泻物、之繁殖搅体及其芽孢全部始杀灭锁或除泡去的手愤段。灭菌捏法(th糕e形te制ch部ni像qu寻e盾of浪s科te相ri崇li完za扶ti夜on)：杀娱灭或置除去胃所有丹微生监物、圣繁殖援体和册芽孢态的方妻法或占技术萍。四、灭族菌与考无菌刚技术40概念无菌(st哭er误il正it肠y)：在御任一除指定御的物催体、稠介质机或环或境中鞋无任饭何活的油微生捐物。无菌游操作(as平ep近ti核c居te学ch表ni缎qu框e)：在李整个粒操作怨中利晃用或适控制煮一定最的条券件，委使产疫品避免辉被微剂生物瘦污染的一本项操作宜方法饺和技惨术。灭菌陈和无拔菌的联系早区别曲？四、灭路菌与港无菌漫技术41消毒(di技si斤nf敞ec弯ti暮on)：以拆物理伟或化幼学等柳方法杀灭物体砌上或托介质些中的菌除芽斧胞以菠外的病原订微生锻物的手段群。消毒胸剂：对忠病原鸡微生芝物具程有杀灭归或除携去作用诱的物菜质。防腐(an病ti统se轰ps搂is)：用财物理确或化属学等详方法抑制微生伞物的厉生长陕与繁赖殖的投手段可，亦落称抑匪菌。防腐绪剂：对狗微生少物的如生长购与繁作殖具朋有抑制作用忽的物瞧质，徐亦称屿抑菌弊剂。防腐渡和消莲毒的联恭系区袋别？四、灭而菌与党无菌哨技术药剂招学中月灭菌止法可挽分为腿三大败类：腔即物理般灭菌絮、化误学灭万菌、绝无菌峰操作针法。干热某灭菌扯法物理效灭菌宵法湿热砍灭菌帅法射线塔灭菌雹法滤过婶灭菌劝法灭菌瞎法气体体灭菌叹法化学轿灭菌社法化学劫药剂惜杀菌谨法无菌列操作年法（一捏）物壤理灭狗菌技进术利用按蛋白猫质与扇核酸妥具有逗遇热、射线不稳递定的祸特性民，采巧用加热、射线和过滤方法插，杀灭疾或除房诚去微生阔物的墨技术动称为瘦物理妹灭菌恐法，版亦称枪物理台灭菌讽技术括。1.干热绢灭菌柴法2.湿热歉灭菌抵法3.过滤掩灭菌聚法4.射线顶灭菌刻法灭菌蚀原理锋：特点孔：方法总：火焰声灭菌揪法：干热闸空气颠灭菌铺法：应用洗范围缩慧：破坏柴蛋白均质与编核酸浇氢键且，导定致蛋围白质吸变性顷或凝路固、皱核酸逃破坏仗，酶渠失活监，微落生物片死亡本法甘热空煎气穿婚透率邪弱、茂比热爱小，速温度违不够圈均匀缝，灭卖菌温筒度高垃、时较间长贞。火焰茎灭菌毅法及续干热袖空气尽灭菌剖法。直接仁在火择焰中债灼烧软的方描法。图将灭劫菌物辣品通且过火巴焰3~芝4次，20秒/次。迅速屿、可扶靠、咱简便适于粗玻璃鹊、瓷次器或穷金属疼等用立具，窜不适创于药螺品灭扇菌。用高安温干华热空蜻气灭毁菌的蔽方法踏。16塌0~只17舒0C，>2饶h17哗0~它18恩0C，>1咽h25悼0C>45等mi啊n玻璃恭、金然属、快纤维馆制品耐高焰温固设体药苏品或练试剂湿热走不易剧穿透肝的油钉性物形质如折液状嗓石蜡冠、凡喇士林鸭及注坛射用焰油等既的灭旨菌不适狠于橡航胶、赞塑料叔及大筹部分姜药品斩。1.干热她灭菌GM雹H系列阿对开镇门干旺热灭齿菌烘梯箱电能食为热梳源（垂干热欠），25隶0℃温度造下灭涨菌。采用PL权C电脑飘控制毕，对持内部续温度认可自直动记摸录。出风蒸口装筐有高迹效空旱气过金滤器过，防伐止了薪外界粉对内却部的眼污染怪。内部梅装有挽高温撤高效恰过滤斥器，显内部造循环采热风令经高纤温高橡效空已气过妥滤器播过滤明，保府证了逐进入艰有效俘空间滴的热轧风达振到10库0级洁孤净要陈求。2.湿热咽灭菌抚法:系指历用饱和呀蒸气、沸水或流通胡蒸气兵（高温时高湿侧环境坊）进行榴灭菌亩的方罪法。特点：蒸气结潜热据大、霜穿透查力强晋，灭荐菌效损率高恒、灭袍菌温税度低庆、时迫间短询。作用趋可靠握，操熊作简触便等奔。包括拣：热压彻灭菌铺法＊＊秋＊流通宁蒸气惯灭菌孕法煮沸敬灭菌依法低温风间歇扁灭菌欠法（1）热含压灭乏菌：采充用大瓶于常压叮饱和哪水蒸惠气加热巧法杀似灭微绪生物永的方疼法。拌为热槐力灭己菌中最有遥效，喷灭菌虚可靠，能察杀灭所有凭细菌外繁殖蒸体和疤芽胞，用虑途最乞广的旱方法争。灭菌仓条件卷：适用烘范围脾：11翁5.和5C（67志k管Pa），30著`脊12萄1.疯5C（97拼k苏Pa），20岭`12宝6.耳5C（13塌9忍kP龄a），15框`湿热热灭菌临一般剪要求F0＝1～12分钟窄。药物辉制剂腥、玻呈璃器砍皿、酬金属齿容器辈、瓷砖器、帝橡胶金塞、村无菌惹衣、逗敷料采及其登它遇五高温腐及湿竿热不紫发生愈变化罩或破杂坏物弊质。2.湿热腹灭菌（2）流奸通蒸省气灭雹菌和折煮沸披灭菌流通堪蒸气谎灭菌沸是用10底0℃的流轿通蒸礼气加截热灭图菌的细方法水。煮沸渐灭菌触是把服待灭钉菌物末品放才入沸盛水中究加热首灭菌泪的方箭法。流通塞蒸气旋灭菌亏与煮嫂沸灭址菌条姜件为10岁0℃捉3末0~检60怜m旱in。缺点析：不年能保滚证杀占灭所巩有的碰芽孢反，如带破伤纠风等智芽孢穗，不是计可靠塞的灭采菌法.制备包过程卸中要厕尽可班能避闻免污篮染，贪这点底必须额充分然注意侮。本法烈一般个用于派消毒讯或不贺耐高峰热制百剂的访灭菌且。目前同我国魄药厂谅生产系注射暂剂，奔特别同是1-希2晨ml注射符剂及妥不耐蔬高热材的品冶种，可眨考虑翼采用作这种矛灭菌展法。2.湿热规灭菌(3看)低温纠间歇蝴灭菌岛法系指连将待蛙灭菌知物置60引~8聋0℃的水拳或流淡通蒸喉气中可加热60汁mi勿n，杀猎灭微兴生物毁繁殖巷体后疫，在北室温府条件誉下放壤置24自h，让肉待灭租菌物凶中的脂芽孢卫发育笔成繁关殖体盖，再维次加米热灭厨菌、曾放置绪，反饺复多灯次，直至股杀灭扁所有辽芽孢。该法凶适用接于不耐泉高温拔、热覆敏感扒物料影和制晶剂的灭侮菌。缺点启是费浅时、摸工效涉低、颗灭菌挨效果耀差，加入何适量盟抑菌爬剂可帆提高屯灭菌笨效率梅。影响巴湿热艘灭菌碎因素绝：①微芬生物陕的种矿类、犹发育科阶段墙和数池量耐热灾、压涂次序看：芽孢龙＞繁难殖体义＞衰上老体微生设物数晴量解灭菌终时间影响尾湿热援灭菌既因素②蒸纵气性志质蒸气饱和航蒸气湿饱蓝和蒸姓气过热引蒸气热含絮量热穿茧透力灭菌丑效率影响挥湿热洽灭菌硬因素③灭枕菌时娘间和坐药物柏性质灭菌弃温度平愈高矩，灭桶菌时寻间愈廉长。隆药品借被破夫坏的禁可能姜性愈天大。原则材：在尺达到晕有效联灭菌婚的前军提下因，尽愿可能龙降低下灭菌邀温度腾和缩悲短灭挥菌时栗间。液体颈制剂础的介陵质性近质：pH值、吨营养剥成分榜等。影响忍湿热逮灭菌境因素④灭炼菌物属品体尺积及旦排布柜内梁物品盆放置倘不能足太拥钢挤，楚确保案蒸气勉流通吉；并岔用摆允放要闻整齐灾、均脚匀，贫以何胡证温拉度的煌均匀陡性。3.过滤凤灭菌惨法系指筋采用进过滤域法除统去微笨生物坟的方邪法。使该法甜属于机械夫除菌方法厌，该罩机械位称为犯除菌轧过滤灿器。该法应适用策于对热秀非常权不稳羊定的景药液夺、气刚体、银水等物品耀的灭低菌。对灭嫌菌用过滤泊器应有乞较高惰要求答。（繁殖差体>1m者，排芽孢0.漠5m）常用寸的除呜菌过莲滤器寺：0.婆22声µm的微村孔滤杨膜器(过筛石作用醋的滤妖器)和0.轰3肉µm野G6垂熔唉玻璃塞滤器情。(阻留铲作用劳滤器欲这类喂滤器晒如压撞力过彩大或大波动彼，细撇菌可乒能被光挤过湖，影朵响灭污菌效期果。)4.射线膏灭菌谢法系指田采用辐射娇、微螺波和紫外意线杀灭夕微生救物和姻芽孢籍的方福法。包括雹：（1）紫林外线都灭菌探法（2）微目波灭蛾菌法（3）辐菊射灭起菌法（1）紫瓣外线蛮灭菌舍法系指富用用紫外吹线（能色量）干照射梅杀灭微生洞物和史芽孢的方跃法。紫外逃灭菌畅的波尼长:2计00荡~3接00明nm，25牌4n轰m最具鹿强灭喝菌力千。灭菌扔机理编：核选酸蛋扰白变举性、疲空气漏中氧滩气产那生微您量臭岗氧。（1）紫塑外线等灭菌顾法紫外纲线穿透秤能力耍弱，并忽能被蒙普通幸玻璃歼吸收统，装于五容器居中的植药物傲不能雷用紫扭外线舞灭菌。紫外币线对测人体味有一定蹦的伤耍害，照踩射过殃久易度引起义结膜肉炎、闸红斑蚊及皮悼肤烧责灼。注意邀事项控：仅作港空气址、表途面，高蒸馏乳水灭畅菌，6~颗15益m3空间30瓦灯垄一只严禁湾在紫旁外灯楚下操夸作使用杠时限（2）微葵波灭凭菌法采用怕微波撇（频饥率为30储0M卷Hz稠~3吃00巷kM惨Hz疗)照射多产生留的热能杀灭贱微生良物和箩芽孢瓜的方推法。微波商杀菌属机理热效掉应—使微文生物橡中蛋坏白质选变性京而失枝活。非热韵效应—干扰唉了微警生物已正常狗的新太陈代剩谢，拴破坏围微生份物的渣生长流环境甜。低温皱（70此~8咏0℃）即结可杀谢灭微总生物鞭，不喝影响浑药物候的稳滋定性奋。（2）微来波灭娱菌法特点羽：热伤在加上热的肿物质居内产惯生，经具有余低温胞（70扮~8具0C）、猫迅速篇（2~冈3园mi换n）、原加热印均匀槽，节滔约能吗源，肚不污栋染环勿境，蹲操作归简单欢，易关维护奥等特蹄点。适用昌范围衡：热气敏感亿药物隐（如VC、阿花司匹远林）（3）辐珍射灭昆菌法系指开采用孙放射斧线同浴位素答（60Co和13头7Cs）放贩射的γ射线杀灭午微生的物和缴芽孢的方客法。迁辐射免灭菌吓剂量案一般追为2.矛5×梨104Gy。原理批：射勒线可租使微读生物依的分痒子直厅接发差生电挽离，菌产生兵破坏畏正常赶代谢殊的自哀由基灵，最呈终使闲微生渗物遭佳到破赚坏。优点嘴：不升备高产狡品温秃度，队穿透悬力强凶，灭辱菌效非率高手。适应涌范围：不耐毁热产念品灭殖菌，宇适于族已密催封物互品灭雾菌。缺点睬：设备省费用谊较高唉，对违操作乒人员据存在签潜在碗的危盆险性梁，对抚某些揭药物絮（特踪蝶别是斥溶液话型）冻可能丢产生罪药效第降低茫或产逆生毒嘴性物楼质和流发热嘱物质皂等。不适块用于由蛋白极、多球肽、嫂核酸阔等生克物大塌分子招药物持灭菌γ射线浊适用乳于较细厚样森品的侨灭菌焦，维受生素肿类、械抗菌牌素、激素管、肝酿素、肢羊肠惕线、劝医疗旱器械亚等物揭质的泳灭菌呢。（二消）化家学灭冲菌法系指义用化学计药品直接瓣作用莲于微课生物宗而将逢其杀逮灭的袭方法候。杀菌众剂是指贝对微丙生物帖具有滑触杀你作用拳的化达学药迅品。郑分为气体杀菌辉剂和液体杀菌采剂。杀菌丸剂只对盲微生揉物繁蒙殖体剧有效郑，不努能杀势灭芽馒孢。杀菌鼓效能洒决定满于微两生物个的种乌类与泼数量患、物适体表呜面光复洁度养或多张孔性疑以及疫杀菌玻剂的冒性质胁等。气体鹿消毒:该法仗适用技于环境品消毒和不耐阿热的绵医用才器具仔、设叙备和紫设施等的河消毒旁，亦径用于粉末醉注射且剂的消乔毒。环氧炭乙烷隙：杀菌预机理延：烷帜化作重用，钞对细鲜菌的呀代谢贼产生贵不可乖逆损盛害。适用避范围枣：塑挣料容旷器、肆对热亲敏感熔的固勤体药绵物、滥纸或虚塑料山包装咽的药扣物、邻橡胶态制品腥、注但射筒喷及注堆射针轧头、撕衣着泳敷料窃及器霉械等为的灭讨菌。甲醛炕蒸气魄：室内松的灭搂菌，连每立驾方米糊空间姥用40％甲复醛溶呀液30柱m拴1，室熔内空击气灭竞菌还芳可用丙二分醇及睛乳酸。（二喉）化姓学灭矿菌药液隙消毒心：0.办1％~0你.2％新拾洁而层灭溶蓬液；2％苯胜酚或明甲酚斤皂溶湾液；75％酒须精等谱；1%聚维块酮碘叠。该法勾常作利为其志他灭缘瑞菌法饥的辅贝助措碰施，适用致范围超：物某体表做面，晕包括姥无菌架设备押，无厚菌室帅的地稻面、渣墙面讽、台怒面等丽。（二敢）化躬学灭排菌在制锁剂工雹业上怀应用臣化学路杀菌诱剂，鼠其目乖的在悬于减吗少微萌生物紫的数退目，酒以控鼻制无先菌状须况至弱一定泰水平胞。（三捧）无秋菌操狱作法系指整个负过程控制听在无菌条件位下进则行的尼一种销操作顺方法镰。无菌达分装茅及无搂菌冻多干是轰最常鄙见的翼无菌朗艺.该法特适用矿于一绪些不耐座热药誉物的慕注射熄液、梳眼用下制剂网、皮劝试液妄、海堤绵剂太和创午伤制半剂的制备.无菌努操作悔法包威括无菌磁操作贺室的锣灭菌和无菌冠操作两个惜环节测。1.无菌艺操作麻室灭腰菌1)甲醛口溶液脾加热院熏蒸须。2)紫外朵线灭抗菌：睁每天槐工作住前开箭启紫挨外线奶一小株时，臂中午柔休息母时间意也要好开0.克5-涂1小时或。3)液体守灭菌秀：用3%酚溶做液、2%煤酚古皂溶科液、0.亚2％新坦洁尔政灭溶敢液或75％酒昌精等集对室粒内空责间、燥用具爹、地疮面、迷墙壁连等喷挺洒或册擦试甲醛烛溶液提加热痛熏蒸项法气体支发生博装置（蒸角气加缩慧热夹某层锅葬）液态拣甲醛甲醛等蒸气鼓风怒机无菌现室关应闭熏拳蒸12桶~2允4h湿度讲﹥60逃%温度绒﹥25于℃25矿%氨水除气3h2.无菌漆操作无菌吗操作许的场诊所无菌瓶操作稳室、结层流运洁净嘴工作醉台、田无菌刚操作漆柜。无菌区操作愚的所荐用物寸品、颜器具男、环庸境操作汤人员无菌斗操作操作深人员主进入摊操作晶之前灿要洗寒澡并健换上塔已经剥灭菌乌的工歌作服就和清位洁的栗鞋子翼，不症使头竹发、搭内衣归等露度出来棵，以术免造仁成污丸染机绸会。安瓿宗要15热0-舟18弊0℃，2-恋3h干热辫灭菌筛；橡塞皮塞惊要以12糊1℃，1h热压原灭菌遮；有晌关器货具、豪机器改都要澡灭菌倚。用无戴菌操评作法瘦制备冈的注洁射剂姜，要肯加入抑菌纵剂。小量剥无菌盾制剂谁的制堪备，撤可在巾无菌乏操作桐柜中坝进行友。无菌枕操作终场所淘：罢：①答无派菌操茶作室蚊；②遭层叹流洁敬净工嘴作台版；③杜无层菌操稳作柜。无菌评检查呀：整赌个工梢艺过椅程保睛证SA拉L≦10－6灭菌扇参数剃（F值和F0值）D值为企降低枯被灭刃菌物加品中口微生营物数许至原绢来1/星10或降千低一苦个对躺数单伯位（lg叶10穷0降至lg菠10）所谈需的撑时间司。1.日D值在一定摇温度通下，杀徐灭90驱%微生擦物（或荒残存刃率为10勾%）所牛需的灭菌辆时间。lg苹N0-l篮gNt=kt/孤2.迫30狂3微生吴物死擦亡的吧速度:D乌=轧t复=佩2.晨30贱3/k(l线g1游00鲁-l职g1放0)（四）劲灭菌陡效力咳的检奖查方火法与F0值D值因续微生贿物的举种类狐、环筐境、阀灭菌焰温度幸不同糕而各开异。不同泻灭菌理法不慨同微夹生物献的D值灭菌方法微生物温度介质或样品D值（min）蒸气灭菌嗜热脂肪芽孢杆菌105℃5％葡萄糖水溶液87.8蒸气灭菌嗜热脂肪芽孢杆菌121℃5％葡萄糖水溶液2.4蒸气灭菌嗜热脂肪芽孢杆菌121℃注射用水3.0蒸气灭菌产芽胞梭状芽孢杆菌105℃5％葡萄糖水溶液1.3干热灭菌枯草芽胞杆菌135℃纸16.6红外线灭菌枯草芽胞杆菌160℃玻璃板18秒Z＝T2－T1／lo签gD2－lo婆gD12.亿Z值降低取一个lg艳D值所如需升原高的乘温度,即灭殃菌时常间减跃少到篇原来均的1/白10所需咱升高尤的温照度或恢在相揭同灭万菌时并间内,杀灭99查%的微失生物捧所需在提高机的温姑度.D2/D1=1鸡0(T兄2-谱T1猛)/亭Z；如Z＝10℃，唱灭菌衰时间吴减少向到原勾来的挠时间且的10犯%，而否具有讯相同刘灭菌棋效果结，所敞需升铲高的拌灭菌晚温度润为10℃.F值：在一达定灭津菌温恨度（T）下梢给定顺的Z值所沈产生绳的灭跌菌效晶果与粱在参翠比温关度（To）下史给定泰的Z值所铲产生蹲的灭骨菌效隙果相侦同时克，其畜灭菌悲效果膝所相厅当在泊参比阁温度识下灭泳菌了肺多长张时间雨。常用哭于干宋热灭完菌，单化位：mi拌n。F许=闸△t丧∑刃103.姑F与F0值T－T0ZF(或F0)值可鹅作用杆验证迫灭菌掘可靠选性的青参数讯。t是测少量被换灭菌诊物温茫度的奋时间旱间隔孩，一抄般为0.察5-胜1.旱0或更拦小，T是每凉个t测量丢被灭灿菌的轮温度框，T0是参琴比温战度。在一赏定灭抬菌温牧度（T）、Z值为10翁℃时t时间园所产起生的款灭菌下效果中与12白1朗℃、Z值为10笔℃所产非生的拾灭菌手效果闪相同枯时，损其灭咳菌效寇果所警相当星于温件度在12补1守℃下灭昼菌F0时间(m躺in进)的效购果快。F0值F0=刊△t祖∑父10

T-121Z物理F0值数学加表达配式：生物F0值数学慈表达裹式：F0=D12品1℃×(团lg把N0-l虏gNt)为灭没菌后贴预计迫达到民的微输生物戏残存搁数，衣即染烦菌度院概率日。也就景是说F0是将为各种雀灭菌僻温度惕使微风生物此的致藏死力悠转换闲为灭梯菌物兔品完许全暴码露于12材1℃使微渗生物耍致死捡效力态；亦即F0为标疾准灭食菌时伐间。时间/min012345678-38温度/℃100102104106108110112114115时间/min3940414243

444546

温度/℃114112110108106104102100

灭菌融过程滥中不蔽同时歉间的秘温度77F0值的露计算龄对于洞验证认灭菌胳效果嘴极为碌有用，当洞产品祥以12部1℃湿热干灭菌时，锁灭菌斗器内乞的温通度虽放能迅毕速升辱到12问1℃，而导被灭排菌物益品内冷部则易不然卖，由犯于包曾装材林料性省能及嗽其他毕因素烦影响门而使犯升温船度各度异，厉而F0将随片着产压品温絮度(T足)变化安而呈茫指数欧的变芝化，慢故温靠度即浸使很鲁小的斯差别(如0.着1-廉1)将对F0值产驳生显拔著的妹影响宅。同摆时要惕求测弦定灭迎菌物糠品内符的实辫际温缴度，故用F0来监签测灭探菌效艇果有欣重要梁的意拿义。由盖于F0是将信不同锦灭菌趟温度匠折算抖到相芒当于12食1℃湿热交灭菌眠时的秩效力肃，故F0值可彼作为万灭菌拆过程惨的比歇较参叛数。影响F0值测房诚定的营因素：温度器由于两温度陈的微罢小差委别将饥使F0值发签生显罚著的勿变化差，因昌此首丈先应保证雅温度够测量魄的准罢确性。灭菌考物品辫的数夜量与华排布捞使各饶处温换度分侄布均覆匀，测判得F0值更随可靠灭菌叙产品驻溶液叼粘度拜及容寒器充茶填量奶。灭菌织产品汪微生说物污菌染数F0＝D12票1×（lgNo－lgNt）计算F0时，颈应适漂当考诱虑增脾加安与全因捷素，购一般柄增加50％尽可给能减暖少各雀工序白中微葵生物稻对药嗓品污猛染,分装谣好的搅药品遮应尽卡快灭渔菌,以使详初始嫩微生堪物数这在最如低水托平.最好赞每个图容器忠含菌匙量控救制在10以下.79为了走使F0测定夹准确六，先贯应选捎择灵腐敏度钱高，减重现命性好观，精梁密度懂为0.谁1的热霜电偶带，并旺对热柳电偶应进行怎校验沸。灭菌季时应狱将热斥电偶泡的探击针置奋于被肯测物倚的内趟部，屡经灭陈菌器六通向先柜外穴的温效度记胁录仪缴，有礼些灭攻菌记饰录仪旬附有F0计算款器，货在灭凶菌过纱程中颠和灭厌菌后博，自雁动显否示F0值。五、乘空气遭净化（一扩）岔概述空气贤净化扫以创图造洁净伞空气为目事的的空气迎调节替措施。工业昂净化息除去声尘埃生物海净化溪除去栗尘埃神、微服生物--连--制药住工业（二兵）侧空气番净化怨标准一般凭净化预：握温度壳湿度虎，初臣效过效滤器中等垦净化赠：你温度译湿度律，含区尘量借，初泡中效恢二级鞭过滤并器超净锯净化烦：略温度芬湿度邮，含仙尘量(严格)，初扬中高20步09年GM滚P规定无菌认药品器生产呆所需暮的洁焰净区花可分煤为以典下4个级晒别洁净度级别悬浮粒子最大允许数/立方米静态动态(3)≥0.5μm≥5μm(2)≥0.5μm≥5μmA级(1)352020352020

B级3520293520002900C级3520002900352000029000D级352000029000不作规定不作规定洁净亩区微款生物数监测毅的动倡态标贷准(a无)级别浮游菌cfu/m3沉降菌（90mm）cfu/4小时(2)表面微生物接触碟（55mm）cfu/碟5指手套cfu/手套A级1111B级10555C级1005025－D级20010050－A级高风具险操侧作区悠，如解：灌装闹区、脖放置肠胶塞辨桶、士敞口源安瓿绵瓶、才敞口叔西林僚瓶的疾区域垦及无逢菌装德配或聚连接永操作增的区戒域。通俊常用层流驳操作换台（涨罩）蒜来维粪持该请区的熟环境跪状态。层筐流系要统在撒其工享作区据域必欲须均得匀送疯风，投风速馋为0.丝式36熔-0街.5肺4m嫩/s（指园导值忠）。裤应有洽数据成证明吗层流诵的状辅态并精须验袄证。在密脂闭的岭隔离宁操作狗器或歪手套爽箱内诸，可尽使用寇单向辩流或况较低赶的风励速。B级指无菌件配制和灌装等高偿风险吸操作A级区存所处慌的背景盘区域。C级和D级指生径产无面菌药锦品过识程中投重要苦程度似较低的疮洁净仔操作杏区。洁净级别及要求药品分类最终灭菌药品非最终灭菌药品B级背景下的A级轧盖前产品灌装（或灌封）、分装、压塞、轧盖；灌装前无法除菌过滤的药液或产品的配制；直接接触药品的包装材料、器具灭菌后的装配以及未完全时转运和存放；无菌原料药的粉碎、过筛、混合、分装。C级背景下的局部A级高污染风险(1)的产品灌装（或灌封）B级轧盖前产