上海市临检中心 微生物学习班 12-B族链球菌感染与诊断进展-蒋燕群

2015/5/28无乳链球菌S.

agalactiaeB群链球菌感染与诊断进展(GrS)上海医院感染质控中心专家委员会委员上海地区耐药监测网专家委员会委员<检验医学>杂志编委原上海交通大学附属第六人民医院蒋燕群GBS概述GBS概述GBS感染B族链球菌(Group

B

Streptococcus,GBS)学名无乳链球菌，革兰氏阳性链球菌，正常寄居于阴道和直肠，属于条件致病菌。GBS筛查与预防在20世纪70年代，GBS已被证实为围产期母婴感染的主要致病菌之一，在围产医学中占有不可忽视的地位。GBS检测GBS的生物学特性及流行病学GBS概述•

GBS细胞壁有C物质（族特异性碳水化合物抗原)和S物质(型特异性荚膜多糖抗原)菌种化血清群*

杆菌肽

VPPYRCAMP蕈糖

马尿酸钠•血清分型:Ⅰa、Ⅰb、Ⅰc、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ型,其中Ⅲ型毒力最强，可产生多种外毒素和溶组织酶，引起严重感染鉴别要点无革兰阳性球菌，菌落较小，β溶血、触酶试验阴性CAMP

试验阳性，马G群链球菌GR---ND-••发达国家GBS感染以Ⅲ型为主(占60%以上)发展中国家以Ib,Ic及Ⅱ型感染为主(占74%

)*Lancefield血清分型细胞壁中多糖物质抗原构造分类12015/5/28GBS对孕妇的影响GBS感染

GBS感染是胎膜早破的重要发病因素GBS对绒毛膜有较强吸附能力和穿透能力，接种2小时内即可吸附于母体组织，继而侵入绒毛膜，通过炎症细胞的吞噬作用及细菌产生的蛋白水解酶的直接侵袭，使胎膜局部张力减低，从而导致胎膜早破

。•GBS一直是新生儿和女性生殖道受感染的重要病菌

,尤其近年来在免疫力低下的成人中

GBS的感染率也呈上升趋势

,特别是在老年人或者有严重潜在疾病者更是如此

。所有侵袭性

GBS感染中

,又以软组织感染为最常见的临床表现

,约占所有

GBS菌血症感染

GBS生殖道感染是导致早产的重要因素是新脓毒血括GBS对于妊娠最大的影响是其细胞因子大量的释放，细胞因子及其产生的细胞因子蛋白水解酶直接侵袭到胎膜，刺激羊膜和脱膜合成和释放一些磷脂酶，前列腺素，从而引起子宫收缩，导致早产或胎膜早破。这也是GBS有严重不良妊娠结局的原因。•在成链源的15%

～40%。球菌

,因此

,这类女性所分娩的新生儿感染该菌的机率会比较高

。

GBS是造成产褥感染的主要致病菌之一产褥感染是指分娩时及产褥期生殖道受病原体感染，引起局部和全身的炎性应化。产褥感染发病率为1%～7.2%，是产妇死亡的原因之一

。GBS对新生儿的影响GBS的传播与感染感染GBS产妇30~60%40%~70%未传染给新生儿传染给新生儿炎（6%迟缓、视1%~3%97%早发性疾病：脓毒血症，肺炎或脑膜炎无症状1/3的晚发型疾病出现脑膜炎，故这些生存下来的新生儿中更易发生神经系统后遗症。5%会导致死亡围产期GBS预防指南（美国CDC2010）国内外GBS筛查现状美国疾病控制中心(CDC)

制定了《围产期GBS预防指南》该指南已经获得以下认可：1.

对所有孕妇于妊娠35-37周进行GBS筛查，结果阳性者进行预防性治疗美国妇产科学院美国儿科学会2.

以下情况，应进行GBS检查和预防性治疗：美国护士助产士协会美国家庭医生协会美国微生物学会美国流行病学会美国药理学会•••••本次妊娠有GBS菌尿；上次新生儿GBS感染史；在妊娠37周之前分娩；羊膜早破超过18小时；分娩温度超过38℃在我国，2011年，中华医学会妇产科学分会产科学组在《孕前和孕期保健指南(第1版)》中已将B族链球菌筛查作为一个备查项目。3.根据统计，这种方案会对26.7%的分娩者进行预防性治疗，可以预防86%的新生儿早发GBS感染12China

PPM

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201422015/5/28GBS的筛查与预防预防GBS疾病的抗生素使用方案举例:《围产期GBS预防指南》指出：阳性(+)孕35-37周取阴道和直肠拭子作GBS检测抗生素预防GBS阳性患者应用抗生素进行预防性治疗未检测

Boyer在1989年研究中指出，产时氨苄青霉素使用超过1小时就可以使得新生儿感染从28%减少到4%。LIN在2001年的研究中表明，与无产时应用抗生素相比，抗生素预防超过2小时的有效率是89%，不足2小时的有效率为71%。阳性(+)阴性(－)临产后GBS检测抗生素预防或产时高危因素：早产，产时发热≥38

℃，胎膜早破≥18小时阴性(－

)且无产时高危因素挑战：我妈妈会进行IAP治疗吗？不需要抗生素预防GBS检测方法比较《围产期GBS预防指南》有无青霉素过敏方法学具体方法优势劣势周期长（18-60h)，，否是选择肉汤培养液18-24h，特别不适合临产时孕妇不知道自身是否有GBS感染的情况；灵敏度较低；实验操作人员需要较深的经验。血平皿培养18-36h；结果判读直观，易开展，青霉素G，首次剂量500万单位（静脉注射）然后每4小时250〜300万单位，直至分娩或者氨苄青霉素，首次剂量2g（静脉注射），然后每4个小时1g，直到分娩病人在接受青霉素或头孢菌素时有无出现下列任一症状？过敏症、血管性水肿、呼吸窘迫、荨麻疹细菌培养后续药敏学实验：STAEP

成本低，可进行药敏学签定板条培养4-24h后，

分析。药敏学分析。乳胶微粒凝集试验、协由于B族链球菌血清型较多，容易造成漏检，灵敏度相对较低。同凝集试验、对流免疫

操作比培养法简便，成电泳试验及酶联免疫试

本低。验等。否是细菌抗原检测头孢唑啉，首次剂量2G，然后每8个小时1g，直到分娩红霉素和克林霉素治疗是否有效采用的是所有B族链球菌cfb基因保守序列，所有GBS都存在；灵敏度最高，及荧光PCR仪。出结果快（<2h），操作荧

光

PCR

方法

荧光探针，PCR法扩增核需要专门的PCR实验室检测酸。否是万古霉素每12小时1g（静脉注射）直至分娩克林霉素每8小时900mg（静脉注射）直至分娩简单。什么方法适合GBS筛查chromID

Strepto

B检测原理•Strepto

B含有丰富底物，包括不同的蛋白胨和3种显色底物及抗生素••GBS为浅粉色到红色菌落绝大多数细菌和真菌不能在此培养基上生长或者不产生典型菌落32015/5/28流程简捷

判读方便GBS样本采集取样接种孵育样本观察（2ml生理盐水混匀）孕妇的直肠阴道样本&

尿液50ul50ul和/或采样接种简单方便孵育18-24小时孵育18-24

小时直接接种:Strepto

B培养基增菌:（有氧，避光，37℃）Todd-Hewitt增菌肉汤24

小时若无生长，延长孵育至48小时孵育18-24小时解释结果接种Strepto

B培养基:GBS:

浅粉

至

红色

菌落圆形

&

珍珠状杂菌：无生长或紫色、蓝色

及无色菌落1.擦掉多余的阴道分泌物；2.拭子插入阴道下1/3处从粘膜处取分泌物*典型StreptoB菌落须用生化或免疫学方法确认3.拭子插入肛门括约肌上方约2.5cm处轻柔转动20STREPTOBID–Launch

File-F.

Rageade20China

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2014GBS的取样部位和方法判读容易，颜色易辨Streptococcus

agalactiaeATCC

NCTC

8190S.agalactiae

ATCC

12386+C.albicans

ATCC

102312、取样方法：•••方法一：使用一个女性拭子，按先后顺序分别在阴道及直肠处同时采集标本；方法二：使用两个女性拭子，每个拭子只在一个部位采集标本，两个拭子同时送检；阴道下1/3及肛周细菌培养GBS有20%阳性率。同一个棉拭子可同时擦拭2个部位，（首先阴道），但有人反对，认为有传播阴道肛门疱疹的可能性，阴道拭子应插入而不借助于窥器，较低的阴道壁（1/3）取样（不应该子宫颈）。肛门拭子超过肛门括约肌，插入和飞旋几圈（总深度不超过2.5cm），不论一个或两个棉拭子，均应接种于培养基中。GBS:

浅粉至红色菌落S.agalactiae

ATCC

12386+E.faecalis

ATCC

29212杂菌：无生长或紫色、蓝色及无色菌落22China

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