细菌内毒素检查方法研讨

细菌内毒素检查法1目的该SOP用来判断供试品中细菌内毒素是否符合规定。2适用范围该SOP适用于《中国兽药典》要求检查该项的药品和适合《中国兽药典》要求的其它品种的药品的细菌内毒素检查。3职责进行该项检验的检验员应该按该SOP进行检验，检测室主任负责监督该SOP的正确执行。4检验4.1技术依据及原理本法系用鲎试剂与细菌内毒素产生凝集反应即内毒素在二价阳离子的参与下，作用于鲎血凝集酶系统而发生的一系列酶联反应，最后形成凝胶，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定。4.1.1鲎试剂灵敏度复核试验项的目的不仅是考查鲎试剂和细菌内毒素工作标准品的效价是否准确，也是考查检验人员操作方法是否正确和实验条件是否符合规定。因此要求每个实验室在将一批新的鲎试剂用于干扰试验或供试品细菌内毒素检查前应进行鲎试剂灵敏度复核试验。供试品干扰试验项用于建立新品种细菌内毒素检查方法以及供试品的配方和工艺有变化，鲎试剂来源不同或供试品阳性对照结果呈阴性时确定供试品是否存在抑制或增强作用。检查法项为供试品细菌内毒素检查方法。阴性对照、阳性对照和供试品阳性对照必须同时进行，否则试验结果无效。植4.2廊与偷注意事项惧4羊.遣2.白1割边实验前，须判用肥皂洗手惹，颠用堡75抚%最乙醇棉球消界毒分4.2曾.2角屈实验时，须嫩戴工作帽和蓬口罩。尤其弯在配制洗液栗和洗涤玻璃顿器皿时一定菜要戴手套、清工作帽和口荣罩。真4.2篇.3情列试验应在洁苏净室或洁净钱工作台内进难行。寸4.2.鬼4输智用移液管或眠刻度吸管等昨吸取样品时版，须使用洗显耳球，勿用碑嘴吸、吹，组防止唾液溅替入。也可使巡用加样器等水其它方法浑。歇4.2拜.5再注意所用鲎京试剂猪的批号、有坚效期、规格舒、灵敏度等仆。初4朴.2仪.6邀火进行干扰实爷验时，标准社对照和供试喜品阳性对照往（含供试品帝的内毒素溶火液）应同时寒进行。衰4.2仅.7取单在进行灵敏透度复核、干矿扰试验和供贪试品内毒素师检查时，各圣个实验所要够求的对照应作同时进行，邀并在有效的邮条件下才能梨进行计算和料判断。窄4.3他焰旺材料、仪器泪、试剂的准糟备及基本要棚求做健肃天欢平庆乐文供试品称量助用，感量为肉0.1mg孙以下。勿刑持电热干燥俩箱看顷弓除外源性内扇毒素用，温临度应能维位持都25坡0畅℃巡以上至少一剪小时。漆4.3留.3麦廊恒温水浴箱用或适宜的恒亮温器，应能戴在买3诉7商℃赶±末1贫℃宵保持一小脚时。坛4.鸡3.4接水银温度计巩或酒精温度宵计，精度塑在停1篇℃滴以下。杂4.混3傅.基5漂领旋涡混合器畅4.焦3.6哀秆鲎试剂，应寸具有国圾家主管部门银的批准文号聋。宫4.欺3.7前沿细菌内毒素业国家标准品切（低NS炼E思），细菌内鹅毒素工作标使准品才（挑WS糖E凤）。浸4.能3.8收馆细菌内毒素修检查用水环（寺BE贡T榴水谅）圆吉建系指与灵敏位度为纤0.03E造u/ml命或更高灵敏集度的鲎试剂筐在柳3虽7仓℃逢±杰1各℃肾条件下不产仁生凝集反应稳的灭菌注射柏用水。趴4.每3.9瘦芒实验用撕具运痰杀移液管（或老刻度吸管，粒定量移液器狗）、凝集管踢（至10赵×携75彩mm链）、三角瓶呈、小试管舱（讨16颗×沟100浸mm博）、试管架尺、洗耳球、遭封口膜或金犯属试管帽、蹦时钟、脱脂结棉、吸水纸语、剪刀、砂艘轮。所用玻豪璃器皿须话经习25畜0伙℃其干烤至业少扇1朵小时。塑料蜘用具应使用阅其它适宜的析除细菌内毒率素方法。倾4.疗3.10恋叙试谋剂捡75吧%戴乙醇、纯化吩水、铬酸洗样液。仓4.4田舅检验步骤刷4.4神.1集衔试验准备催4.4处.1.1狗隶洗液的配扭制举砖蛾配制铬酸洗戏液或其他适纯宜的细菌内恩毒素灭活剂狂。拴4.4厦.1.2略岛玻璃器皿的聪洗若涤摆音请将被洗涤的卡玻璃器皿用指洗涤剂和自龙来水洗净并悄空干水分后很置洗液中浸构泡蒸4锋小时，取出到将洗液滤干薪，用自来水劳将残余的洗臂液洗净，再资用新鲜纯化摇水冲洗枝干燥后置适稀宜的密闭金放属容器中，湾迅疑速置烤箱中融。翠4.4铅.1.3北僵除去玻璃阵器皿表面可去能存在的外拿源性内毒浑素巷律东玻璃器皿置草烤箱后将烤扭箱调天至趟25转0珠℃冈，待烤箱温扫度升至设定也的温度后开变始记时，须嘱干烤至狸少仇1织小时。达到群规定时间后箱，关断电源股。待烤箱温丽度自然降至推室温，在不凤开启金属容据器的情况下努，可在两周淡内使用，否沾则须再次加帖热除去可能朱存在的外源太性内毒素。器4.4荡.2递姨鲎试剂灵敏劝度复核付4.4蛋.2.1皮尺内毒素标准慌溶液的制备砖4.4英.2.1.已1天膛取临NS略E酱或续WS聋E极一支，轻弹误瓶壁，使粉秤末落入瓶底搬，再用砂轮闻在瓶颈上部贪轻轻划痕宗，铺75研%沿酒精宰棉球萝擦拭后启开错，防止玻璃糠屑落入爽瓶等内。使4.4登.2.1.通2帮绿按标准品使掌用说明查书用移液管羡加入规定量梦的潮BE愿T钢水溶解其内然容物，用封斤口膜将瓶口搁封严。置旋断涡混合软器上混种合心1畏5类分钟，然后评制备成所需睛浓度的细菌装内毒素标准兴溶液即芳2.0诵λ餐、难1.0隔λ俱、欠0.5抗λ社、成0.25剪λ辟（手λ戚为所复核鲎恢试剂的标示垒灵敏度），设每稀释一步龟均应在旋涡信混合器上混确合法3旗0浪秒（详细过树程请参见使链用说明书）位。若岩为耍NS缝E微，可按其使狮用说明书将辱其稀释至规真定浓度后分冒装并保存。脆例如使稼用折NS啄E训（内毒素含骨量权为宗9000E清U宗/据支）时的方烈法如下：惕复溶：准确凉吸确取遮BET蜻水元1ml岂加惯入面NS谎E将的安瓿内，隔用封口膜将肉瓶口封严，涛置过旋涡混合器毫混竖合令1潜5向分钟，即基为纪9000骂EU/号ml被内毒标标准镜溶液。仔稀释：取沙0.3ml题内毒素标准执溶液加上亩2.7ml罪BE狮T婆水垒即纺为侨1华→袋1或0蝴稀释液，得肠到丝900EU旗/汽ml敌内毒素标准遮液。至取授0.3m绍l纷1肌→研1虎0伏稀释液，加捷上院2.7ml逮BE胡T寒水即证为痕1火→圆10剩0耐稀释液，得吴到贤90EU/劈ml忘内毒素标准伴溶液。唐往后依次类丈推，也可写殿成下列格式赵：叮0.3ml姓诸廊0.3ml吃链0.3ml跨框表0.3m其l谅悔1味ml湿鹅阅1劣ml扭9000E叨U/量ml峡要→蜘900EU泡/研ml爷要→板90EU/撇ml普监→羡9EU/葵ml发秒→揪1EU/刑ml阶→踪0.5鞭EU/头ml是→卧升叛2.7ml撕堆亡2.7m喘l劈2.7m孔l秃博2.4m热l专涨畏1ml换图1ml邀1奇ml恰剧1骨ml馅寒遣1步ml锯0.25亭EU/钞ml按洽→寨插0.125枣EU/办ml级仪→游评0.062穿5焰EU/痒ml福纯→蹈俯0.031律25乱EU/狂ml熄1塞ml置秒1吨ml歌呆动1愁ml训在上述稀释种过程中，每壁稀释一步，封均须在旋涡惨混合器上混蚀合阻3今0纹秒钟。很渠.2懒加待复核鲎试蕉剂的准备透4.4至.2.2.滔1炕浑在制备内毒丧素标准溶液化的同时，取踩0.1英ml/唇支的鲎试祖剂滤1父8养支轻弹瓶壁昂，使粉末落疼入瓶底。用醋砂轮在瓶颈旱轻轻划痕悔，狐75清%信乙醇棉倡球擦拭后启供开备用，防祸止玻璃屑落矩入瓶内，加慈入大0.1ml馆BE笼T周水复溶，使落内容物充分陶溶解，避免屿产生气泡。震4.4柔.2.2.篇2揉乳若待复核鲎跑试剂的规格李不是搅0.1ml头/辩支时，按标肢示量加厕入任BE蛇T甚水复溶，将兰复溶后的鲎坚试剂溶液混漆匀后每压0.1ml师分配到既10娇×怜75膏mm危凝聚管中，伙要求至少分半配残1里8甩管备用。简4.4蚁.2.3尝齿加样浪4.4呜.2.3.盒1慕必将已充分扬溶解的待复课核鲎试元剂丑1赢8画支普（刷管）放在试称管架上，排输成黎5跟列，其供中起4私支（管瞎）烈4凤列分别加入消2.0谊λ阴、晕1搞.0慰λ废、落0.5陈λ材、竖0.25翼λ浆的内毒素标谎准溶液盈；吴2童支（管遥）演1符列分别加享入柳BE炎T非水。内毒拜素标准溶液永和孟BE残T雁水的加样量成均为农0.1ml同/益支。宇4.4趟.2.4丧雅加样结束后僻，用封口膜单封口，轻轻分混匀，避免迫产生气泡，斑连同试管架掌放球入龄3每7皱℃避±执1矿℃销水浴或适宜痒恒温器中，则试管架保持像水平状态，针保药温去60亿±湿2靠分钟，观察难结果。魄4.4谜.3代趴干扰试验叙4.4短.3.1罗商供试品细菌诊内毒素限值库（熔L蜓）的确定粉4.4派.3.1乐.1免欲按供试品标债准规定限值库4.4.骨3.疑1束.2辰碗供试品日最大有仁效稀释倍数端的计算：击MVD胞＝够C扮·雾L勇/胸λ帽L撇为供试品的蚊细菌内毒素抱限值布，垮λ吧为测试用鲎摆试剂的灵敏爹度标示值述，剖C贩表示供试品猪的浓度，或轰供试品复溶票后所得溶液杯的惭浓度。汇当涨L幼以运EU/奉ml陡表示躁时叶C吐为碌1.0ml盖/ml烛，悄当玩L嚷以疫EU/摄mg铅或丢EU/障u炉表示时早，参C妨为斯mg/ml涝或因u/ml没。如需计算输供试品的测胜试浓疤度析C睁，可州设宪MV跟D膨为双1泽。忙4.4.泰3.构2柴宋内毒素标准雄溶液的制备帜同涉4柴.忆4前.苍2置.柏1违。佣4.4.枯3.3盐浮含供试品的片内毒素溶液裁的制备图4.4.梢3.市3.1这护根据供试品照的限值葬（宽L三）和使用鲎狭试剂的灵敏唐度享（谜λ可）计算供试姐品测试浓度钥（最C牙）赠或味MV竹D执。差4.4.际叹宫将供试南品稀释，其牙稀释倍数不谈应超切过被MV玉D怀，并通过怀预试验确定兽正式试验供肯试品测试浓哲度。畅4.4.摔潜州在制备内毒岭素标准溶液叫的同时用未毛检出内毒素绪的供试品溶承液或其不超须过最大有效剪稀释倍数的极稀释液大将莫WS屠E蚕以相同方法具制备成所需快浓度的含供驶试品的细菌似内毒素溶液瓣（首2.0泰λ痛、踢1.0煎λ中、究0.5块λ必、作0.25段λ帐）。浙4.4.墓插浊简化法制备聪含供试品的针细菌内毒素厘溶推液谎密叉取疯0.5ml盘内毒素标准取液（赠1.0EU包/ml粗）＋辰0.5ml碰供试品溶液剧（染10mg/鸽ml威）惠→胡1ml0.举5EU布/ml省（镰5mg/m丰l脚）含供试射品内毒素财溶液。额同理分别用堆0.5料ml罪浓度为望0.5EU省/ml浇、抱0.25膀EU/败ml石和蚊0.125弓EU/嗽ml夏的内毒素标惩准溶液加入千0.5ml纳浓度彻为颠10恩mg/ml痒的供试品溶饿液制备株0.25镰EU/叫ml息、絮0.125肌EU/付ml微和辜0.062冷5按EU/屋ml长含堆5mg/m印l呢浓度的供试肝品阳性对照悬溶液（其体突积大小根据兽试验所需量创而定）。号4.4.侦3.晴4嘴显鲎试剂的准捎备痛4.4.小3.鹿4若.1亡在制备内毒拜素标准对照族溶液和含供饿试品的内毒弯素溶液的同宏时，取促0.1ml屯/绿支的鲎试横剂漆3加6轰支轻弹瓶壁年使粉末落入现瓶底，用砂隔轮在瓶颈轻优轻划痕美，啄75验%驶酒精棉球擦爱拭后启开某，防止玻璃想屑落入瓶失内，加入勾0.1大ml麻BE漏T乞水复溶，轻浑轻摇动瓶壁扒，使内容物碑充分溶解，教避免产生气静泡市。洲4.4.铲3.杨4叠.2园样若鲎试剂的过规格不是宿0.1ml构/敢支时，按标棚示量加入水束复溶，将复走溶后的鲎试岔剂混匀后每余0.1ml量分配到划10枣×求75椒mm紫凝集管中，接要求至少分残配跑3贫6裳管备用。立4.4.秘3.嘱5扬故加样督4.4.默3.驶5桑.1古妥将准备好的搅鲎试篮剂捉1珠8填支（管）放牛在试管架上脸，排饮成悄5构列，其帆中窑4艳支（管贵）预4盯列分别加入跪2.0激λ蹦、私1.0睁λ鬼、视0.5呀λ艺、常0.25腿λ肃的内毒素标笼准对照溶液先；拍2家支（管接）亭1歪列加辰入梯BE辅T嫩水。解4.4.貌3.和5井.2冈忌将准备好墓的另打外瓦1威8搏支（管）放委在试管架上滔，昼排责成池5帮列，其象中政4陶支（管柿）编4摆列分别加入械2.0挎λ竿、壁1.0独λ遮、醋0.5擦λ绘、药0.25鲁λ靠的含供试品讯的内毒素溶易液钉；躬2冈支（管完）据1洪列加入己供试品溶液禽。韵4.4.殊3.借5苍.3域伤内毒素标准机溶液线和虽BE某T行水、含供试达品的内毒素现溶液和供试雁品溶液的加定样量均为纠0.1ml粗。演4.4.木3.架6偿踏加样结束后稳，用封口膜抱封口，轻轻视混匀，避免要产生气泡，堵连同试管架涝放入恒温水碰浴或适宜恒酸温器中，试阀管架保持水啄平状态保兄温蜘60泻±掌2伞分钟后，观焦察结果。注4.4.匹3.盏7壳懒当在进行正式俊干扰试验前驱可进行预试阅验，动用救L瞎和捞λ予（通常用脉0.5盒～更0.03E铸U/ml夕）计算马出超C饼的范围，邻以底1彻∶蛇2切的浓度比例傅，制备咬含匠2奸λ买和迈0.25蛇λ呈的系列浓度愤供试品溶液些，每一浓度尾取鸽2寨支（管）鲎详试剂进行试市验，判定无吗干扰浓度进丹行正式干寺扰试验。显雅地抄供试品细菌拐内毒素的检薪查斜4.4陷.4.1表阁供试品溶液滨的制备拾4理.4.晶4.爽1.1喇穴计歼算善MV仍D领＝像C奉·多L矩/旦λ叙。米C毕、决L披、爹λ击的意义愿同貌4闹.直4恋.棒慢4.4乓.4.1.幻2坝闪稀赠释久杰餐其稀释倍数弃不得超别过浓MV钳D呜。倍4.4步.4.2厌虚阳性对照溶洋液的制总备宪新胶按翅浆.1逗用君BE尾T从水制唱成夺2道λ芳浓度的内毒虚素溶液。燃4.4耕.4.3洋番供试品阳性由对照液的制闸备持咱晶用被测供试且品涛将容WS滨E习制醋成当2恋λ叹浓度的内毒统素溶液。方膛法同路浓.3微含供试品的签内毒素溶液请制备。其中陵利用简化法坛时，由于供如试品原液必虽须稀释一倍粒，采用的洒鲎试剂灵敏粱度要提高一像倍（如输液旁），供试品售浓度也相应依调整。阻4.4庆.4.4杏翠鲎试剂的制桃备群4.4章.4.4.寨1凉塌在制备供试抵品溶液、内取毒素标准溶静液和供试品若阳性对照溶天液的同时，牢取怒0.1ml拦/软支的鲎试窗剂辱5稍支，手指轻绩弹瓶壁，使籍颈部瓶壁上缩的粉末落入茫瓶内，用砂别轮在瓶颈轻却轻划痕粒，辆75刷%贵乙醇棉球擦贼拭后启开备从用，防止玻夹璃屑落入瓶起内，加入涝0.1ml与BE万T渔水复溶，轻稳轻转动瓶壁箱，使内迫容物充分溶处解，避免产御生气泡。以4振.4先.4.4.言2灰锈若使用的鲎说试剂的规格忠不是甚0.1ml捧/庙支时，按标央示量加侍入蚕BE杰T释水复溶，将咐复溶后的鲎悉试剂溶液混糕匀后每第0谢.1ml应分配到迈10孔×攻75牛mm你凝集管中，碌要求至少分粪配辈5布管备用。往4.4垄.4.5缸蛛加样惭取装有户0.1ml节鲎试剂溶液粥的绵10惰×移75帅mm沫试管或复溶计后的透0.1ml肤/掠支规格的鲎涝试剂原安丛瓿捏5梯支，其程中鞠2溉支加入溉0.1ml杜按最大有效霜稀释倍数稀火释的供试品消溶液作为供忍试品管飘，柏1时支加入嘉0.1ml负用科BE穴T柱水储将飞WS挣E浮制成寿的欧2桨λ芬浓度的内毒仅素溶液作为抛阳性对照赶，福1漏支加入溪0.1ml胡BE抽T省水作为阴性枣对变照勉，涉1栽支加入平0.1ml将供试品阳性信对照溶液（额相当于用被关测供试品溶到液妖将挪WS饮T州制快成舱2除λ垦浓度的内毒腿素溶液）作会为供试品阳年性对照管。边4.4淋.4.6自逃将试管中溶母液轻轻混匀置后，用封口您膜闭管口，搂垂直放会入蜘3暖7蝶℃夜±咏1景℃兔水浴或适宜稀恒温器中，李试管保持水哀平状态保别温留60聪±壤2旧分钟。保温结和拿取试管合过程应避免源受到震动，炎造成假阴性设结果。榜4.4探.4.7逐番将试管从水处浴中轻轻取有出，缓缓倒文转堂180外°科时，管内凝列胶不变形，竞不从管壁滑另脱者为阳性织，记录为（旁＋）；凝胶咱不能保持完膊整并从管壁缴滑脱者为阴锄性，记录为客（－）。在4异.5傻知实验记录与胃计算摘六丹马记录格式如掀下询：真阻鲎试剂灵敏洞度垫复核试验记丘录渴（一～三综帐合记录）一、鲎试剂麻批筐狂棚号：慨灵敏度虏：秒抢EU慢/饼ml妈供样单位：虾规格给：意诱集舍绪ml烈/泡支（瓶）闻生产单位：后失效日期药：舟雅芳箭年据嗓踢月樱虹胆日劲检验目的：嫩灵敏度复核团室温属：沿悲转篇湾℃联检验依据：柴中国兽药样典谷芳席年版席检验日期惹：蒸掌状参年熄怜疑月衣担桂日液检验数量弱：给皂利岗支（瓶）二、标准品荣NS浙E助批号：货效价饿：年汇EU奸摆袄来源：堆WS听E鉴批号：片效价豆：牺碧彼EU嘉忘和来源：匹BE贸T芦水批号锦栗伟ml/乔支盐立化来源：糕内毒素标准砍品复溶时的午体积为拥撒矿帝ml架；稀释方法平为：辜三、反应结根果（反应起售止时间耐：然爬御寄～饭购深取）贤内沾庆毒冠泄素方际浓佣蛮度寄2待λ屈夹门λ眼珍0.5横λ具跳0.25事λ蜘贷徒（柱算葱）泡胸（垫雨逗）松厅（伤菠喇）秋反（耀撤翁）自阴性对照答反应终点浓喉度逆重铲1动复圾2其管牌3漠数锅4崭结果是否有测效肾计算结果：蜂结果判断体检验人员签佛名缺校对人员签结名馋干扰试验记胃录摘（一～五综初合记录）一、供试品瑞检品名称：缠检品数量洗：寄子径卫支（瓶）生批舞太拍号：阔规口蛙球格：曲生产砌单位：妄供样单位：熟检验目的：苹干扰试验短检验依据：勒中国兽药炮典桶奔损陵年版冻供试品溶液痕的制备：二、鲎试剂源批祥饺剃号：书灵敏度棕：棵嫌E粉U/尸ml交供样单位：躲规键迷冬格朽：呈腹仔ml幅/倘支（瓶）毫生产单位爪失效日期名：鸽幻钞掉年屑状歉月烈僚由日泥灵敏度复核贷日期；则结果刑：呼捧颗呼棚E落U/询ml三、标准品荡NS哗E输批轰号：喊效价肥：魂冶EU夏券药来源：妖WS粘E细批号：胡效价霸：君主EU更刮帅来源：品BE轿T隐水批拾号：躺使戒黎ml/行支奉转舒来源：是内毒素标准叫品复溶时的芬体积为均量巧ml吨；稀释方法期为：酷四、含供试冲品内毒素溶脊液的制备躺五、反应结碌果（反应起屡止时间获：央原巧渗～扭滥喇厦）翼内晚哑毒捧磨素袭润浓抵挡度方2饿λ颠鼠出λ粱救0.5动λ双耽0.25控λ盟贞皇（韵半扣）丸首（找愚己）损丸（队艘皆）孟交（腰圣状）贿阴性对照卵反应终点浓争度帅重谢纵1胳标准吨复叠题2厕对照互管殊3招数迅4独重岛趴1织供试诚复梦怪2笨品阳原管登眼3恳性对蹦数乞棒4掏照选结果是否有削效剥计交算结果：寨结果判断既检验人员签债名徒校对人员签边名伴供试品细菌度内毒素检查班（一～五综探合记录）一、供试品毁检品名称：产检品数量应：堤袜尺笨支（瓶）拿批职掏直号：柿规降燥候格：截生产单位：随供样单位：歪检验目的：锹内毒素检查哭闪检验依据：期中国兽药蔑典趣绝饰吼年版填检验人员：差校对人员傲供试品溶液肢的制备：二、鲎试剂爽批阔舅件箩号：但标示灵敏度谁：孤滚惯EU/脊ml露供样单位：舰规门问隐格偷：击咽使ml命/斥支（瓶）消生产单位：袭失效日期睬：即短披庄年警悼民月年种使日汁灵敏度复核树日期：覆复核结果掌：侮辅上岛颈EU/虑ml三、标准品艳NS临E饱批号：喉效价买：款有EU见启窃来源：饺WS胆E改批号：卧效价困：缝士EU类神枝来源：投BE雪T巷水批号：驴冰哪镇ml/鸦支质誓捷来源：爽内毒素标准寿品复溶时的祝体积为推饥所ml墓；稀释场方法为：戏四、供试品眉阳性对照溶寨液的制备限五、反应结帮果（反应起划止时间祸：还匆聋矛～忍傅功称）扯供住逗醋试废节印品斤那毕管渗供试品管大阴性对照呜2.0辉λ室供试品阳性茫对照听结果是否有萄效捕结榜脑锦果旨结果判断厅检验人员签序名拜校对人员胆4.混5.2前截鲎试剂灵敏阳度复核涝如最大浓差度椅2.拜0燕λ瑞4绝管均为阳性春，最低浓度岛0.25洲λ烟4葬管均为阴性抄，阴性对照滤为阴性，按屠下式计算反桌应终点浓度糖的几何平均践值即为鲎试章剂灵敏度的任复核结果违（借λ阁C参）。湿λ勺c御＝延lg凤－恳1衫（吐∑缩X/溉4蛮）肉式源中拜X邀为反应终点专浓度阳的对数值（嫩lg疫）。反应终拌点浓度是刃系列浓度递茂减的内毒素荣溶液中最后蹦一个呈阳性竭结果的浓度宜。握4.难5.3到续干扰实验房如标准溶液汤最大浓度蹦2.0凶λ咳4虚管均为阳性碧，返最低浓度旷0.25南λ墓4帽管均为阴性故，阴性对照恶为阴性，按位下式计算伙用醋BE疫T议水制成的内括毒素标准溶或液的反应终扛点浓度的几傲何平均值趁（京E盖s眼）和用供试稳品溶液或稀骆释液制成的海内毒素溶液紫的反应终点拘浓度的几何斧平均值膛（霸E粉t女）。葱E陶s运＝脂lg相－辰1顾（琴∑败X恰s过/特4懂）沿E枪t砍＝恭lg狡－衬1采（鼓∑艇X传t坚/拔4筐）葵式烧中各X耀s奔、冤X放t哥分别糕为磨BE湿T委水和供试品堂溶液或稀释脆液制成的内斯毒素溶液的顷反应终点浓秃度的对数值寸（已lg社）。咸4.6破故耍结果判定查4.6霸.1黑成鲎试报剂灵敏度复坡核弦当窗λ翠c架在筋0.5沫λ饺～布2.0梨λ南（包括极0.5争λ低和炭2.0政λ占）时，方可介用于干扰实贯验和供试品辛细菌内毒素妈检查，并李以挨λ背（踢标示灵敏度妈）为该批鲎扇试剂的灵敏牙度。老4.6貌.2宪干扰实验鸦当伐E昏s逮在吼0.5孟λ咬～尸2.0奖λ宜（包括麻0.5闻λ视和漆2.0阻λ倾）时，且而当砌E冲t额在葛0.5痕E霉s协～惹2.0矿E抹s羡（包括姨0.5街E晃s贸～偶2.0躺E射s阁）时，则认蚊为供试品在夜该浓度下不撞干扰实验，捷否则使用更炼灵敏的鲎试侄剂，对供试坟品进行更大景倍数稀释，优这是排除干犹扰因素的简菜单有效的方朱法（也可采途用过滤法，亡干扰因素去瓶除法等其他骗方法）。建航立新品种细熊菌内毒舞素检查方法仙时，每个厂堆家至少取三鞭个则批号（不包奸括亚批）的礼供试品，用么两个以上生服产厂家的鲎章试剂进行干址扰试验。若触各批供试品量干扰实验结司果差别较大仪时应考虑供馒试品内毒狸素的影响。葱若鲎试剂的玩来源、供试喉品的配方或境生产工艺有常变化时，须腔重复进行干座扰实验。猴4.6员.3加块供试品细菌箱内毒素检查鹅供试施品衫2除管均为等（传–心），应认为来符合规定。惑如吗2猪管均为袋（盲+咳），应认为塌不符合规定林；送如势2薄管肃中寺1条管为敌（龙+企）映，桐1崭管为腔（醋–岔），按上述赴方法另筑取朝4投支供试品复风试沃，映4私管缩中带1磁管为施（击+茎），即认为太不符合规定房。若第一次森实验时供试寨品的稀释倍河数小重于趋MV磁D锹而结果出话现匹2埋管为眼（不+节）市或胆2伐管纯中址1玉管为淘（筝+返）晴，粒1王管为白（腾–欧）时，恼按同样方法陆复试和判定关，复试时要敬求将其稀释孙至扁MV教D均。阳性对照避为佣（哪–须）或供试品绑阳性对照为毙（贴–谣）或阴性对区照为竿（斩+滋），试验无喇效柱。修4.7界民结果计算和疼判断举例谱4.7防.1