骨髓造血专题知识讲座

骨髓造血专题知识讲座骨髓造血专题知识讲座第1页基础知识介绍骨髓是主要造血组织。骨髓组织由网状组织，基质，血管系统和神经等组成造血微环境，以及充满其间血细胞所组成。是红细胞，粒细胞和血小板生成唯一场所，同时也产生淋巴细胞和单核细胞。故观察骨髓中血细胞数量和质量改变，对造血系统疾病诊疗和防治都有主要意义。骨髓造血专题知识讲座第2页

骨髓细胞学检验

适应证确定诊疗一些造血系统或非造血系统疾病辅助诊疗一些造血系统疾病作为判别诊疗应用禁忌症严重出血倾向者如血友病等。骨髓造血专题知识讲座第3页

确定诊疗一些造血系统或

非造血系统疾病这类疾病多数为含有特征性细胞形态学改变者，骨髓检验对这些疾病就有决定性诊疗意义。骨髓造血专题知识讲座第4页辅助诊疗一些造血系统疾病这些疾病多数是以骨髓造血功效改变为主疾病，骨髓检验结果尚需结合其它临床资料综合分析后才能作出诊疗骨髓造血专题知识讲座第5页作为判别诊疗应用

临床上遇有原因未明发烧、淋巴结、脾或肝肿大、骨痛或关节痛时，骨髓检验有利于判别是否由造血系统疾病所引发。另外，一些疾病能够有血液学改变但非造血系统疾病，故骨髓检验可作判别诊疗。骨髓造血专题知识讲座第6页骨髓细胞形态学检验

注意事项一些疾病骨髓中病理改变呈局灶性改变，一次穿刺只能反应穿刺部位骨髓功效或病理情况，不能反应骨髓全方面情况。一些疾病诊疗除骨髓细胞学改变外，尚需了解骨髓组织结构改变等。另外，骨髓干抽等情况须结合骨髓活检进行病理学检验。骨髓造血专题知识讲座第7页常见取材部位髂后上棘（较易掌握分寸）髂前上棘（较易掌握分寸）胸骨（对向心性病变阳性率高，有一定危险性）胫骨粗隆（2岁以下小儿）骨髓造血专题知识讲座第8页造血干细胞功效特点造血干细胞是造血组织中一类当前尚无形态学特征描述功效细胞。特点有：1。含有高度自我更新能力，可维持干细胞数量恒定。2。含有多向分化能力，即可向各系列祖细胞分化，然后增殖分化为各系血细胞。生成阶段：干细胞，祖细胞，各系列原始幼稚细胞阶段，然后继续分化成熟。骨髓造血专题知识讲座第9页造血干细胞分化及增殖示意图T，B淋巴系祖细胞↓↓红系，巨核系，嗜酸，嗜碱系，粒-单核系祖细胞↓向下分化↓向下分化骨髓造血专题知识讲座第10页骨髓造血专题知识讲座第11页血细胞发育过程中形态学改变普通规律细胞体积:大小与外形核质百分比:细胞核：大小，核形，核位置，核染色质，核膜，核仁细胞质：胞质量，着色，颗粒，空泡骨髓造血专题知识讲座第12页大小改变与外形改变从原始细胞到成熟细胞，胞体由大变小，但巨核细胞相反，早幼粒细胞可比原始细胞稍大。红细胞一直圆形，粒细胞及淋巴细胞保持圆形或椭圆形，单核细胞及巨核细胞由圆形或椭圆形变不规则型。骨髓造血专题知识讲座第13页核/质百分比（N/C）细胞成熟过程中，胞核逐步缩小（巨核细胞例外）胞质量逐步增多，由核大质少，改变为核小质多，即由高N/C变为低N/C。骨髓造血专题知识讲座第14页细胞核大小：由大到小（巨核细胞例外）核型：红细胞核圆形，逐步缩小消失，淋巴细胞一直圆形，粒细胞由圆形变为分叶状，浆细胞一直呈圆形，单核细胞核变为不规则型，巨核细胞核增大并分叶不规则。核位置：红细胞希一直居中，粒、单核、浆细胞、巨核细胞常偏位，淋巴细胞核一侧着边，仅一边有胞质。骨髓造血专题知识讲座第15页细胞核核染色质：结构由疏松逐步变为紧密粗糙，颜色由浅到深。核膜：由不显著变显著。核仁：由清楚可见到消失。骨髓造血专题知识讲座第16页细胞质量：由少到多。颗粒：有没有到有。空泡：有没有到有（浆细胞）。着色：红细胞、粒细胞、巨核细胞由嗜碱性到嗜酸性，由蓝到红。淋巴细胞呈天蓝色，单细胞呈灰蓝色。浆细胞由浅灰蓝色变为深蓝色。骨髓造血专题知识讲座第17页骨髓造血专题知识讲座第18页骨髓细胞学检验内容和方法低倍镜检验：观察骨髓标本取材和涂片制作是否满意。判断骨髓增生程度。以有核细胞量来反应。普通低倍镜观察有核细胞与成熟红细胞之间百分比，正常为1：20。（详细见P.54表）观察巨核细胞。注意有没有异常细胞。骨髓造血专题知识讲座第19页怎样观察骨髓标本取材和涂片制作是否满意？制成骨髓液涂片后，肉眼观察，满意涂片尾部有约粟粒大小呈浅肉色半透明骨髓小粒及少许脂肪小滴，显微镜下见到较多骨髓中特有细胞如幼稚细胞及巨核细胞等。骨髓造血专题知识讲座第20页怎样判断骨髓增生程度？以有核细胞量来反应。普通低倍镜观察有核细胞与成熟红细胞之间百分比，并结合观察骨髓小粒结构及其内细胞数量与成份来判断。正常为1:20。通常分为五级。增生极度活跃、显著活跃、活跃、减低、显著减低。（详细见P.54表）骨髓造血专题知识讲座第21页增生程度示意图骨髓造血专题知识讲座第22页怎样观察巨核细胞？观察以下方面：数量、成熟程度、产血小板功效及其形态（包含血小板形态）。骨髓造血专题知识讲座第23页怎样观察有没有异常细胞？因为异常细胞体积较大、形态特殊，故应观察涂片尾部、边缘、骨髓小粒周围。如恶性组织细胞病异常组织细胞、转移癌细胞、高雪细胞、尼曼—皮克细胞等。骨髓造血专题知识讲座第24页油镜检验内容有核细胞分类计数：连续分类计数200个或500个有核细胞，按细胞不一样系列和不一样发育阶段分别计数，计算各阶段细胞所占百分比。再累计粒细胞系总数和幼红细胞总数，计算粒红百分比（G:E），正常为2~4:1。观察细胞形态：进行分类计数时，同时观察形态是否正常，有没有异常细胞，寄生虫等。骨髓造血专题知识讲座第25页检验结果分析1.骨髓增生程度：分增生极度活跃，增生显著活跃，增生活跃，增生减低，增生显著减低。2.

骨髓中各系列细胞及其各发育阶段细胞百分比。普通符合正常参考值。骨髓造血专题知识讲座第26页骨髓增生程度临床意义增生极度活跃：反应骨髓造血功效亢进，常见于白血病。增生显著活跃：反应骨髓造血功效旺盛，见于各种增生性贫血，白血病、骨髓增殖性疾病等，以及正常儿童及青年骨髓象。骨髓造血专题知识讲座第27页骨髓增生程度临床意义增生活跃：反应骨髓造血功效基础正常，见于正常人骨髓象等。增生减低：反应骨髓造血功效减低，见于再障等。增生显著减低:

反应骨髓造血功效衰竭，见再障（急性型）、骨髓坏死等。骨髓造血专题知识讲座第28页骨髓中各系列细胞百分比粒细胞系统：有核细胞40%~60%红细胞系统：有核细胞20%淋巴细胞系统：有核细胞20%单核细胞系统：﹤4%浆细胞系统：﹤2%巨核细胞：7~35个/1.5㎝3㎝血片骨髓造血专题知识讲座第29页各系列细胞百分比改变临床意义粒/红百分比：百分比正常：1.正常骨髓象2.粒红两系细胞平行增多或降低疾病:

如红白血病、再障3.两系细胞基础不变疾病如多发性骨髓瘤、骨髓转移癌、ITP。骨髓造血专题知识讲座第30页各系列细胞百分比改变临床意义

百分比增高：1.粒细胞白血病2.急性化脓菌感染、中性粒细胞类白血病反应等3.纯红细胞性再障贫血。骨髓造血专题知识讲座第31页各系列细胞百分比改变临床意义

百分比减低：1.粒细胞系降低如:粒细胞缺乏症2.红细胞系增多如:各种增生性贫血,

红细胞增多症等。骨髓造血专题知识讲座第32页各系列细胞百分比改变临床意义粒系统增多：1.各型粒细胞白血病2.急性炎症，感染性疾病等。粒系统降低：再障,粒细胞缺乏、降低症。红系统增多：1.各类增生性贫血2.巨幼细胞贫血3.急性红白血病。红系统降低：再障骨髓造血专题知识讲座第33页

骨髓细胞形态学检验

华中科技大学同济医学院协和医院检验科骨髓造血专题知识讲座第34页

血涂片观察骨髓涂片送检时需同时送检外周血涂片。观察以下内容：白细胞分类计数：需注意白细胞形态。注意成熟红细胞形态有没有异常，如有有核红细胞，以与计数100个白细胞所占数值表示。预计血小板数量及形态有没有异常。注意有没有寄生虫等异常情况。骨髓造血专题知识讲座第35页

血细胞细胞化学染色细胞化学染色是以细胞形态学为基础，依据化学反应原理，应用骨髓涂片进行固定、化学反应显色、复染等程序染色，然后在光学显微镜下观察细胞化学成份及其改变一项检验方法。骨髓造血专题知识讲座第36页

血细胞细胞化学染色作用：研究血细胞在生理或病理情况下细胞化学成份改变，有利于了解各种血细胞化学组成及病理生理改变，可用作血细胞类型判别，以及对一些血液病诊疗和判别诊疗、疗效观察、发病机制探讨等都有一定价值。骨髓造血专题知识讲座第37页

过氧化物酶(POX)染色原理：POX能分解试剂中底物H2O2，释放新生态氧，使无色联苯胺氧化为蓝色联苯胺，后者与亚硝基铁氰化钠结合形成蓝黑色颗粒，从容于细胞质中。骨髓造血专题知识讲座第38页

POX染色临床意义：主要用于急性白血病类型判别:急性粒细胞白血病时，白血病细胞多呈强阳性反应，急性单核细胞白血病时,呈弱阳性或阴性反应，急性淋巴细胞白血病呈阴性反应。骨髓造血专题知识讲座第39页中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色原理：（偶氮偶联法）血细胞中碱性磷酸酶在pH为9.4～9.6条件下将基质中α磷酸萘酚钠水解，产生α—萘酚与重氮盐偶联形成棕黑色沉淀，定位于细胞质内酶活性所在之处。骨髓造血专题知识讲座第40页中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色原理：（钙钴法）：碱性磷酸酶在碱性条件下将基质液中β甘油磷酸钠水解，产生磷酸钠。再依次与硝酸钙、硝酸钴、硫化胺发生一系列反应，形成不溶性棕黑色硫化钴，定位于酶活性之处。骨髓造血专题知识讲座第41页中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色临床意义感染性疾病：作细菌性感染与病毒性感染判别。慢性粒细胞白血病NAP严重减低，类白血病反应NAP极度增高。急性粒细胞白血病时NAP积分减低，急性淋巴细胞白血病NAP积分多增高，急性单核细胞白血病时普通正常或减低。再障时NAP活性增高，PNH时活性减低可判别。其它血液病:恶组减低。腺垂体或肾上腺皮质功效亢进等NAP积分可增高。骨髓造血专题知识讲座第42页糖原染色（PAS）原理：过碘酸能将血细胞内糖原氧化，生成醛基，醛基与Schiff液中无色品红结合，形成紫红色化合物，定位与细胞质中。骨髓造血专题知识讲座第43页

PAS染色临床意义：幼红细胞出现PAS强阳性反应可见于红血病和红白血病，有利于与其它红细胞系统疾病判别。也可见于个别严重缺铁性贫血，重型地中海及巨幼细胞贫血。急性粒细胞白血病细胞PAS反应阴性或弱阳性反应，常呈细颗粒状或均匀淡红色；急性单核细胞白血病细胞PAS反应呈弥漫性阳性而胞质边缘或伪足处阳性颗粒稍粗；急性淋巴细胞白血病PAS反应呈粗颗粒，甚至大块状。

其它可识别不经典巨核细胞、区分高雪细胞（阳性）与尼曼—皮克细胞、判别腺癌细胞等。骨髓造血专题知识讲座第44页

铁染色原理：细胞中铁在酸性条件下与低铁氰化钾溶液反应，生成蓝色铁氰化钾(普鲁士蓝)，定位与含铁部位。

骨髓造血专题知识讲座第45页铁染色临床意义：缺铁性贫血时，细胞外、内铁依次降低非缺铁性贫血时，细胞外铁多增高铁粒幼贫血时，铁粒幼细胞增多，出现环状铁粒幼细胞。骨髓造血专题知识讲座第46页常见血液病血液学特征概念：单位容积循环血液中红细胞数、血红蛋白量及（或）血细胞比容低于参考值。按骨髓增生情况可分为增生性贫血和增生不良性贫血。贫血而骨髓造血功效增生者称增生性贫血。依据幼红细胞类型分为正常幼红细胞增生及巨幼红细胞增生。增生不良性贫血是指贫血而骨髓造血功效显示减低或衰竭者。骨髓造血专题知识讲座第47页缺铁性贫血：因体内储存铁缺乏而使血红蛋白合成不足所致。为小细胞低色素性贫血。骨髓造血专题知识讲座第48页溶血性贫血：是因为各种原因使红细胞寿命缩短，破坏增加，而骨髓代偿造血功效不足以赔偿其耗损时所引发一组贫血。血液学改变特征为红细胞系显著代偿性增生。骨髓造血专题知识讲座第49页失血性贫血急性失血性贫血血液学改变同溶血性贫血，慢性失血性贫血血液学改变同缺铁性贫血。骨髓造血专题知识讲座第50页

巨幼细胞贫血是因为缺乏叶酸及（和）VitB12致使DNA合成障碍所引发贫血。血液学特征除出现巨幼红细胞外，粒细胞系也出现巨幼特征及分叶过多。严重时巨核细胞和其它系统血细胞及粘膜细胞也可发生改变。骨髓造血专题知识讲座第51页再生障碍性贫血（AA）各种原因所造成骨髓造血干细胞降低和（或）功效异常及造血微环境损伤造成全血细胞降低一组综合征。骨髓造血专题知识讲座第52页再生障碍性贫血（AA）急性型血象：红细胞、血红蛋白、网织红细胞、白细胞、血小板均降低。骨髓造血专题知识讲座第53页再生障碍性贫血（AA）急性型骨髓象：骨髓增生显著减低，粒、红两系细胞极度降低，淋巴细胞相对增高。巨核细胞显著降低。浆细胞分类比率增高。骨髓造血专题知识讲座第54页再生障碍性贫血（AA）慢性型血象：红细胞、血红蛋白、网织红细胞、白细胞、血小板均降低（均较急性型轻）骨髓造血专题知识讲座第55页再生障碍性贫血（AA）慢性型骨髓象：因为有局灶性代偿性造血灶，故不一样部位骨髓穿刺结果可有一定差异，有时需多部位穿刺及配合进行骨髓活检。骨髓造血专题知识讲座第56页

再生障碍性贫血（AA）慢性型骨髓象特点：1.增生程度减低，2.巨核细胞，粒细胞，红细胞三系细胞均降低。巨核细胞改变最早出现。3.淋巴细胞相对增多。4.有时有中性粒细胞核左移等改变。5.淋巴细胞相对增多、非造血细胞增加。骨髓造血专题知识讲座第57页

淋巴细胞系统绝对性增多：急性和慢性白血病，恶性淋巴瘤，传染性淋巴细胞，单核细胞增多症，其它病毒感染，淋巴细胞性类白血病反应等。相对性增多：再障，粒细胞缺乏症或粒细胞降低症。骨髓造血专题知识讲座第58页单核细胞系统增多见于：1.血液系统疾病如急性单核细胞白血病等，2.一些感染性疾病如结核病，原虫感染等。3.风湿性疾病如系统性红斑狼疮，类风湿性关节炎等。4.其它如恶性肿瘤，肝硬化等。骨髓造血专题知识讲座第59页浆细胞系统浆细胞增多见于：1.多发性骨髓瘤，浆细胞白血病等2.反应性浆细胞增多见于慢性炎症及感染性疾病，过敏性疾病等3.再生障碍性贫血等骨髓造血专题知识讲座第60页巨核细胞系统：巨核细胞增多见于：

ITP，骨髓增殖性疾病如慢粒等，脾功效亢进，巨核细胞白血病等巨核细胞降低见于：再生障碍性贫血，急性白血病等。骨髓造血专题知识讲座第61页

骨髓细胞形态学检验华中科技大学同济医学院协和医院检验科骨髓造血专题知识讲座第62页白血病是造血系统一个恶性肿瘤。特点为造血组织中白血病细胞呈过分异常增生与分化成熟障碍，并浸润其它器官和组织，而正常造血功效则受抑制。分为急性和慢性两大类。急性分急淋（L1~L3）及急非淋（M1~M7），慢性分慢淋及慢粒。骨髓造血专题知识讲座第63页急性白血病血液学特征共同点骨髓增生活跃或显著活跃。一系或两系原始细胞增多。因白血病类型不一样，其它系列血细胞均受抑制而降低。涂片中分裂型细胞和退化细胞增多。骨髓造血专题知识讲座第64页急性白血病血液学特征共同点血象：红细胞及血红蛋白中度或重度降低，呈正常细胞正常色素性贫血。白细胞计数不定