血小板血型系统和检测技术专家讲座

五、交叉配血

(MatchcrossBlood)血小板血型系统和检测技术第1页交叉配血(MatchcrossBlood)一、交叉配血概念交叉配血试验也称配合性试验，实际上是检验不配合性。检验患者和献血员之间是否有对应抗原、抗体存在。1.主侧交叉配血供血者红细胞与受血者血清反应2.次侧交叉配血受血者红细胞与供血者血清反应3.本身对照受血者红细胞与本身血清反应，排除本身抗体，DAT+，假凝集等干扰血小板血型系统和检测技术第2页血小板血型系统和检测技术第3页交叉配血(MatchcrossBlood)二，交叉配血方法

1.只能检出不配合完全抗体盐水介质法2.可检出不配合不完全抗体抗人球蛋白法蛋白酶法低离子介质法等3.改良交叉配血方法血小板血型系统和检测技术第4页交叉配血(MatchcrossBlood)聚凝胺（Polybrene)配血法利用高价阳离子多聚季氨盐溶解后产生大量正电荷可中和红细胞表面负电荷缩小其之间距离微柱凝胶配血法（卡式配血法）

血小板血型系统和检测技术第5页几个交叉配血试验方法学评价配血方法

缺点

优点

盐水配血试验简单、快速检不出IgG酶介质试验

简便、经济准确性、稳定性差抗球蛋白试验准确、可靠复杂、费时、贵凝聚胺试验快速、准确需特殊试剂微柱凝胶试验灵敏成本高血小板血型系统和检测技术第6页交叉配血(MatchcrossBlood)三，交叉配血不合原因（一）主侧不合：Rs+Dc1.不规则抗体有同种抗体或本身抗体2.冷凝集3.假凝集4.A2抗A1(1%-8%A2,22%A2B个体有抗-A1)5.DcDAT+血小板血型系统和检测技术第7页交叉配血(MatchcrossBlood)（二）次侧不合：Pc+Ds1.Pc做DAT：阳性见于本身抗体，输血反应2.Ds中有不规则抗体3.忽略ABO亚型误定血型4.冷凝集素吸附于Pc5.异型输血血小板血型系统和检测技术第8页四，交叉配血注意事项1.离心时间与速度2.水温箱温度37℃3.水质，离子影响4.用新鲜标本5.做抗人球试验时最好用血清6.注意输血史，妊娠史7.注意溶血结果，被检血清中含有溶血性抗体，红细胞抗原+血小板血型系统和检测技术第9页SoundOfColors我们何其幸运无法确知自己生活在什么样世界we’reextremelyfortunatenottoknowpreciselythekindofworldwelivein.—辛波丝卡《we’reextremelyfortunate我们何其幸运》血小板血型系统和检测技术第10页血小板血型系统及检测技术血小板血型系统和检测技术第11页一、血小板血型抗原定义:

指用同种免疫抗体检测出血小板表面抗原分类：血小板相关抗原血小板特异性抗原血小板血型系统和检测技术第12页（一）血小板相关抗原

（platelet-associatedantigen）血小板表面存在与其它细胞或组织共有抗原包含：红细胞血型系统（ABO等）人类白细胞抗原（HLA）血小板血型系统和检测技术第13页血小板HLA系统血型抗原Chromosome6DPDQDRBCAClassIIClassI存在HLA-A和B位点抗原HLA-C位点抗原未发觉HLA-DP、DQ和DR等位点抗原P67血小板血型系统和检测技术第14页（二）血小板特异性抗原人类血小板抗原（humanplateletantigen，HPA）血小板特有,其它组织细胞没有表现血小板独特遗传多态性均存在于血小板膜糖蛋白（GP）上被国际输血协会组织确认血小板特异性抗原已经有6个系统，12个抗原，正式命名为HPA-1~HPA-5和HPA-15。血小板血型系统和检测技术第15页命名要求以下：在系统前冠以HPA，即人类血小板抗原（humanplateletantigen）英文缩写按发觉次序用数字编号只有在共显性双等位基因全被检测出来后，才能被称为系统，对偶抗原按其在人群中频率由高到低，用字母命名，高为a，低为b还未发觉对偶抗原，给予暂时命名，在等位基因数字后加后缀w表示P98血小板血型系统和检测技术第16页血型系以往命名糖蛋白(GP)定位抗原以往抗原命名表现型频率白人日本人中国人HPA-1ZwPLAGPIIIaHPA-1aZwaPLA189>99>99.99HPA-1bZwbPLA2113.7n.t.HPA-2KoSibGPIbHPA-2aKob99.3n.t.n.t.HPA-2bKoaSiba14.625.49.1HPA-3BakLekGPIibHPA-3aBakaLeka87.778.979.1HPA-3bBakb64.1n.t.70.5HPA-4PenYukGPIIIaHPA-4aPenaYukb>99.999.999.9HPA-4bPenbYuka<0.21.71.8HPA-5BrHcZavGPIaHPA-5aBrbZavb99.2n.t.n.t.HPA-5bBraZavaHca20.6n.tn.tDUZOPLFNek血小板血型系统和检测技术第17页二、血小板抗体产生机理：机体对血小板表面或相关抗原免疫临床分类：血循环中游离抗体结合于血小板上抗体(PAIgG)血型学分类：血小板同种抗体：抗体不是针对本身抗原，而是与同种异基因红细胞发生反应

本身抗体：受血者体内产生抗体，针对自己本身红细胞抗原。见于：血小板输注治疗无效；同种免疫血小板降低症；本身免疫血小板降低症；药品、病毒、细菌引发血小板降低症血小板血型系统和检测技术第18页血小板表面存在众多复杂抗原，所以重复大量输注血小板患者约50%以上产生血小板同种抗体据报道HLA抗体占多数，约80%左右HPA抗体单独存在频率较低（2%-3%）HPA抗体与HLA抗体共存（18%左右）必须首先识别并去除血清中存在HLA抗体，才能分析血小板抗体特异性血小板血型系统和检测技术第19页判别有没有HLA抗体存在方法淋巴细胞毒试验:抗原抗体反应在补体参加下破坏LC，活OR死细胞染色判别混合淋巴细胞培养：两个无关LC体外培养，MHC不一样，刺激增殖。计数转化后母细胞或者被摄取DNA量判定除去血小板表面HLA抗原方法0℃氯喹或酸溶液处理血小板P79P83血小板血型系统和检测技术第20页血小板血型临床意义血小板输注无效输血后紫癜新生儿同种免疫性血小板降低性紫癜血小板本身免疫作用P100血小板血型系统和检测技术第21页

一、血小板输注无效

（platelettransfusionrefractoriness，PTR）血小板血型系统和检测技术第22页1、PTR定义指患者在输注适当剂量血小板后没有产生“适当反应”，即连续两次输注足量随机供者血小板后，没有到达适当校正血小板计数增加值（CCI），临床出血表现亦未见改进血小板血型系统和检测技术第23页2、PTR原因免疫原因（17.5%）：重复输注血小板或有妊娠史妇女，血清中产生血小板同种抗体，再次输注，发生免疫反应，血小板被巨噬细胞吞噬HLA抗体、HPA抗体、ABO抗体、本身抗体、药品抗体、循环免疫复合物等非免疫原因（67.5%）：发烧、败血症、脾肿大、骨髓移植、DIC、静注抗菌素等；血小板质量非免疫+免疫原因（15%）血小板血型系统和检测技术第24页二者区分

同种异体免疫输入血小板很快破坏，输注后1小时和24小时均不见计数增高非免疫原因

输注后1小时血小板计数增高，但24小时计数不增高或受影响血小板血型系统和检测技术第25页3、PTR判定指标临床:出血趋势不减轻，或出现输血性紫癜，出血加重。血小板计数较输注前不但不增高，有时还会下降。判定血小板输注效果可经过1.校正血小板计数增加值（correctedcountincrement,CCI）:CCI=(输注后血小板计数-输注前血小板计数)×体表面积(m2)输入血小板总数（×1011）PTR判定标准:1小时CCI﹤7.5×109／L20-24小时CCI﹤4.5×109／L

2，血小板回收率（percentageplateletrecovery,PPR）:PPR=(输注后血小板数－输注前血小板数)×血容量(L)输入血小板总数×2/3PTR判定标准：1hPPR﹤30%20-24hPPR﹤20%血小板血型系统和检测技术第26页一个体表面积为1.5患者接收了4×1011血小板后，其24h血小板上升了25×109/L。计算CCI一个体重80Kg患者，输注了4×1011血小板后，其24小时血小板上升了25×109/L血容量按照75ml/kg计算。计算PPR。血小板血型系统和检测技术第27页5、PTR处理流程首先考虑血小板质量问题，可输注ABO同型非库存血小板，以排除ABO系统抗体或血小板质量方面影响原因若有发烧、感染、DIC等造成血小板消耗增加原因存在，主动治疗原发病，并增加输注剂量若有同种抗体存在，则挑选HLA、HPA相合供者血小板，或使用激素、免疫抑制剂或静脉注射免疫球蛋白。若病人连续输注血小板效果不佳而又找不到明确原因，则应考虑药品性抗体存在，停用或换用相关药品血小板血型系统和检测技术第28页二、输血后紫癜

（posttransfusionpurpura,PTP）定义：指输注全血或血小板后引发急性、暂时性同种免疫性血小板降低综合征.临床表现：在输血后1周左右突然发生瘀点、瘀斑和黏膜出血，严重者有内脏和颅内出血大多数患者是女性，有输血或妊娠史P102血小板血型系统和检测技术第29页PTP预防和治疗办法血小板抗体筛选血小板交叉配血试验，选择配合型血小板供体输注大量静脉注射免疫球蛋白血小板血型系统和检测技术第30页新生儿同种免疫血小板降低性紫癜

（neonatalalloimmunethrombocytopenia,NAITP）血小板血型系统和检测技术第31页病因：胎儿和母亲血小板血型不合，使母亲产生同种抗体，经过胎盘进入胎儿体内，与胎儿血小板反应而造成胎儿和新生儿血小板降低症状：内脏和中枢神经系统出血，脑水肿，婴儿出生时(12~24小时)有严重、广泛瘀点和瘀斑。最严重并发症是颅内出血。或出生时正常,于二、三天后出现血小板降低症诊疗：母体血小板抗体检测，抗原检定 患儿血小板抗体(表面、游离)检测预后：死亡率13%P104血小板血型系统和检测技术第32页治疗办法给患儿输入与母体血清中同种抗体无反应性血小板对患儿进行换血治疗，纠正患儿血小板降低。对新生儿治疗普通选取静脉内注射免疫球蛋白

预防对血浆中含有高效价血小板同种抗体孕妇做血浆置换治疗，降低孕妇血浆中同种抗体含量，以降低对胎儿和新生儿危害。血小板血型系统和检测技术第33页血小板本身免疫作用

——特发性血小板降低性紫癜

（idiopathicthrombocytopenicpurpura，ITP）定义：免疫系统失调，患者体内存在抗血小板本身抗体，使血小板大量破坏，是一个本身免疫疾病临床表现：