微生物学实验

试验一细菌形态观察

目标要求：见试验教程P.16试验二-1基本原理：见试验教程P.16试验二-1微生物学实验第1页试验内容1.试验室环境及体表微生物检验(检验手指、头发、钱币等携带微生物情况4人一个培养皿)2.统计三种细菌菌落特征3.绘制三种细菌个体形态图，并对革蓝氏染色结果小结4．思索题：试验2-(一)、（二）题微生物学实验第2页三种细菌菌落特征微生物名称大小形状含水程度颜色与培养基结合程度嗅味枯草芽孢杆菌金黄色葡萄球菌大肠杆菌微生物学实验第3页绘制三种细菌个体形态图，并对革蓝氏染色结果小结

微生物名称

革蓝氏染色总结枯草芽孢杆菌

金黄色葡萄球菌

大肠杆菌

微生物学实验第4页试验二放线菌形态观察

目标要求：见试验教程P.24试验二-3

基本原理：见试验教程P.24试验二-3微生物学实验第5页试验内容

1.统计三种放线菌菌落特征

2.统计并绘制三种放线菌个体形态及生殖方式图

3.思索题：在平板上怎样识别细菌和放线菌菌落？

微生物学实验第6页三种放线菌菌落特征

微生物名称

大小

含水程度

菌落颜色

与培养基结合程度

嗅味

灰色链霉菌

正面后面淡紫灰链霉菌

正面后面地中海诺卡氏菌

正面后面微生物学实验第7页绘制三种放线菌个体形态及生殖方式图

微生物名称

制片法

生殖方式观察

灰色链霉菌

印片法或直接观察法

示气生菌丝、孢子丝(直)及孢子(球形)淡紫灰链霉菌

印片法或直接观察法

示气生菌丝、孢子丝(螺旋状)及孢子(椭圆形)地中海诺卡氏菌

印片法或直接观察法

示菌丝断裂、柱形或球形孢子

微生物学实验第8页试验三酵母菌形态观察及细胞计数

目标要求：观察并掌握酵母菌菌落特征、个体形态及生殖方式。基本原理：见试验教程P.26试验3-1,P.97试验8-1微生物学实验第9页试验内容1.统计两种酵母菌菌落特征2.统计并绘制二种酵母菌个体形态及生殖方式图3.

(1)用血球计数板计算酵母菌悬液细胞数(2)用显微镜测微尺测量酵母菌细胞大小4.思索题：在同一平板上怎样识别细菌和酵母菌菌落？微生物学实验第10页两种酵母菌菌落特征微生物名称大小

含水程度菌落颜色与培养基结合程度嗅味酿酒酵母红酵母微生物学实验第11页二种酵母菌个体形态及生殖方式图

微生物名称

制片法

生殖方式观察

酿酒酵母水浸法制片示芽殖热带假丝酵母压片法制片示假菌丝微生物学实验第12页试验四

霉菌形态观察

目标要求：1.观察霉菌菌落特征。2.掌握霉菌制片方法，观察霉菌个体形态及各种无性和有性孢子。基本原理：见试验教程P.29,试验三-2微生物学实验第13页试验内容

1.统计三种霉菌菌落特征

2.对三种霉菌制片、观察、统计并绘制三张霉菌个体形态及生殖方式图3.四大类微生物形态特征总结微生物学实验第14页三种霉菌菌落特征

微生物名称

大小

表面形状

颜色

与培养基结合程度

嗅味

黑根霉(产糖化酶,酿酒)

上部(孢子)下部(菌丝)产黄青霉(产青霉素)

中心(孢子头)边缘(菌丝)黄曲霉(产蛋白酶,制酱油)中心(孢子头)边缘(菌丝)微生物学实验第15页三种霉菌个体形态及生殖方式微生物名称菌丝结构(分化结构)孢子

黑根霉示无隔菌丝、假根、匍匐枝、孢子囊梗产黄青霉示有隔菌丝、分生孢子梗、小梗黄曲霉示有隔菌丝、足细胞、顶囊、小梗微生物学实验第16页试验考查(1)怎样从菌落特征上识别四类菌?

(2)四类菌在制片上有何特点?微生物学实验第17页试验五

培养基配制与灭菌

目标要求：1.

学习和掌握分离四类菌惯用培养基配制方法。2.

学会四类菌稀释分离和计数时所用物品灭菌前后准备工作。3.

了解试验室惯用消毒灭菌方法，掌握高压蒸汽灭菌技术。

基本原理：见试验5-1、5-2、5-3、5-5及附录三

微生物学实验第18页试验内容

配制四类菌分离用培养基(注意调pH)、分装。(按卡片每三人一组配制其中一个培养基，但要求四种都会配)2.

准备大小枪头、小离心管、玻璃刮刀、无菌水等，培养基配制量及分装方法见试验台上卡片。3.

高压蒸汽灭菌，灭菌后摆放斜面。先检验高压锅内水量，关闭高压锅盖时用力要均匀，放气2-3分钟后关闭放气阀，待压力靠近0.1Mpa时调整成小火并计时,保持20分钟后关火,自然冷却待压力降为0时打开放气阀后再打开高压锅。4.

试验室惯用消毒灭菌方法(示范)干热灭菌、紫外灭菌、过滤除菌、化学消毒法等。

微生物学实验第19页试验统计

1.

统计你所配培养基名称、成份、pH及配制分装方法。

2.注意高压蒸汽灭菌操作过程及关键

微生物学实验第20页试验六

土壤中微生物分离与培养

目标要求：见P.66试验6-1

基本原理：见P.66试验6-1微生物学实验第21页试验内容

1.先按卡片配制生理生化、噬菌体效价测定用培养基，灭菌2．稀释分离：

3.

划线分离：取10-2菌悬液做划线分离（每人做四块平皿:三种稀释度各一块、划线分离一块）4．菌落计数：（下周做）只数可认定菌落，三人结果取平均。5.斜面接种及培养：（下周做）每人自不一样平板上分别各接一支四类菌斜面，培养后检验接种结果。6.

菌种保藏(示范)：斜面转接法、低温保藏法、沙土管保藏法、冷冻干燥保藏法。

微生物学实验第22页稀释分离分离对象取样稀释度分离方法细菌1克土10-4、10-5、10-6

0．2ml菌悬液，倾注法分离放线菌1克土10-2、10-3、10-4

0．2ml菌悬液，倾注法分离酵母菌1克酵母粉10-5、10-6、10-7

0.1ml菌悬液，涂布法分离霉菌5克土10-2、10-3、10-4

0．2ml菌悬液，倾注法分离微生物学实验第23页注意事项分离放线菌在99ml无菌水中加10滴10%苯酚(抑制细菌生长)分离霉菌在马丁培养基熔化冷却后加入2ml去氧胆酸钠(2%)和0.4ml链霉素(1万单位/ml)微生物学实验第24页试验统计

P.73试验6-1表(二)、(三)、(五).思索题：P.74试验6-1（二）、（四）、

(五)微生物学实验第25页试验七几个细菌生理生化反应试验

目标要求：见试验教程P85,P88基本原理：见试验教程P85,P88微生物学实验第26页试验内容（按下表接种）

试验试验菌种试验菌种试验菌种接种方式

分工

淀粉水解

枯草芽孢杆菌

大肠杆菌

产气杆菌

平板划点

每人一皿接两种菌

油脂水解

金黄色葡萄球菌

大肠杆菌

产气杆菌

平板划线

每人一皿接两种菌

EMB大肠杆菌

产气杆菌

平板划线

每人一皿接两种菌

葡萄糖发酵

大肠杆菌

产气杆菌

液体一环

两人1组每人1支试管各接一个菌甘露醇发酵

金黄色葡萄球菌

产气杆菌

半固体穿刺

两人1组每人1支试管各接一个菌H2S大肠杆菌

变形杆菌

半固体穿刺

两人1组每人1支试管各接一个菌柠檬酸盐

大肠杆菌

产气杆菌

斜面划线

两人1组每人1支试管各接一个菌M.R大肠杆菌

产气杆菌

液体一环

两人1组每人1支试管各接一个菌V.P大肠杆菌

产气杆菌

液体一环

两人1组每人1支试管各接一个菌吲哚

大肠杆菌

产气杆菌

液体一环

两人1组每人1支试管各接一个菌微生物学实验第27页生理生化试验结果观察

试验名称反应物

代谢产物

枯草金黄大肠产气变形淀粉水解油脂水解EMB葡萄糖发酵甘露醇发酵H2S柠檬酸盐M.RV.P吲哚微生物学实验第28页

试验八噬菌体效价测定

目标要求：见试验教程P36基本原理：见试验教程P36微生物学实验第29页试验内容

培养敏感细菌T6-13至对数生长久熔化下层培养基每人倒三块平版（约10ml/块）用蛋白胨水稀释噬菌体原液（10‑6pfa/ml）至10‑710‑810-9三个稀释度备用取0.2ml噬菌体稀释液于小离心管中加入0.