药物杂质检查技术专家讲座

第三章药品杂质检验技术药物杂质检查技术专家讲座第1页（三）杂质限量计算L：杂质限量V：标准溶液体积S：供试品量C：标准溶液浓度药物杂质检查技术专家讲座第2页取本品2.0g，加水100ml，加热溶解后，冷却、滤过，取滤液25ml，依法检验，与标准硫酸钾溶液1.0ml（100µg/mlSO4）制成对照液比较，不得更浓。计算硫酸盐限量。对乙酰氨基酚中硫酸盐检验药物杂质检查技术专家讲座第3页取本品0.20g，置100ml量瓶中，加盐酸溶液(9→)溶解，并稀释至刻度，摇匀，在310nm处测定吸光度，不得超出0.05，E为453，求酮体限量。肾上腺素中肾上腺酮检验药物杂质检查技术专家讲座第4页1.药品中杂质主要由

和

引入2.杂质限量是指药品中所含杂质

。通惯用

或

来表示3.杂质限量检验方法主要有

、

、和

三种点滴积累药物杂质检查技术专家讲座第5页第二节普通杂质检验药物杂质检查技术专家讲座第6页温故知新简述以下概念药品杂质普通杂质特殊杂质药物杂质检查技术专家讲座第7页普通杂质：在自然界中分布较广，多数药品生产和贮存过程中轻易引入杂质方法：版药典将普通杂质检验方法收载于四部通则中。注意：遵照平行标准药物杂质检查技术专家讲座第8页（一）原理：对照法（比浊法）一、氯化物检验法药物杂质检查技术专家讲座第9页1.标准氯化钠溶液制备2.供试品溶液制备3.对照溶液制备4.比浊5.统计和结果判断（二）检验方法药物杂质检查技术专家讲座第10页（二）检验方法供试品稀HNO310mlH2OAgNO31ml标准溶液稀HNO310mlH2OAgNO31ml暗处放置5min(防止AgCl分解)药物杂质检查技术专家讲座第11页1.供试品管和对照液管操作需要注意什么问题？2.加入硝酸目标是什么？3.怎样观察？4.供试品溶液如带颜色怎么处理？5.供试液如不澄清怎么处理？（三）注意事项药物杂质检查技术专家讲座第12页（三）注意事项一、氯化物检验注意事项内容加入稀硝酸目标：加速氯化银混浊生成,防止产生碳酸银、氧化银、磷酸银沉淀。稀硝酸10ml为宜先中和为中性后再检验—防止硝酸银在碱性条件下生成氢氧化银和氧化银。反应，观察方式暗处反应，黑色背景，从上向下观察药物杂质检查技术专家讲座第13页（三）注意事项一、氯化物检验注意事项内容供试品处理药品不溶解：溶液有颜色：内消色法水或水，加热使所含氯化物溶解过滤除去不溶物药品取滤液检验药物杂质检查技术专家讲座第14页供试品2倍量½量½量样品过滤至澄清对照二者平行试验，比较对照与样品浑浊程度内消色法（倍量法）：20ml稀硝酸1ml硝酸银标准Cl-和1ml硝酸银1ml硝酸银一、氯化物检验（三）注意事项：药物杂质检查技术专家讲座第15页1mlAgNO3过滤对照管样品管2倍HNO31mlAgNO31mlAgNO32倍量样品1/21/2一、氯化物检验（三）注意事项：内消色法示意图标准Cl-药物杂质检查技术专家讲座第16页（三）注意事项一、氯化物检验注意事项内容碘（溴）化物中氯化物检验药物杂质检查技术专家讲座第17页A.所用比色管需配套B.稀硝酸酸性下(10ml/50ml)C.避光放置5分钟D.用硝酸银标准溶液做对照E.在白色背景下观察互动：以下哪些为药品中氯化物检验必要条件药物杂质检查技术专家讲座第18页（一）原理：对照法（比浊法）二、硫酸盐检验法药物杂质检查技术专家讲座第19页硫酸盐检验法操作流程与氯化物检验法相同，包含：标准硫酸钾溶液制备→供试品溶液和对照溶液制备→加入沉淀试剂25%氯化钡溶液→比浊→统计和结果判断等（二）检验方法药物杂质检查技术专家讲座第20页（二）检验方法P150二、硫酸盐检验供试品标准溶液稀HCl2ml稀HCl2mlH2OH2O25%BaCl21ml25%BaCl21mlH2OH2O摇匀，放置10min药物杂质检查技术专家讲座第21页试品管和对照液管操作应注意什么问题？2.加入盐酸目标是什么？3.怎样观察？4.供试品溶液如带颜色怎么处理？5.供试液如不澄清怎么处理？（三）注意事项药物杂质检查技术专家讲座第22页（三）注意事项注意事项内容标准硫酸钾溶液标准硫酸钾溶液：0.1mgSO42-/ml比浊范围：0.1-0.5mg/50ml标准硫酸钾溶液取量：1.0-5.0ml酸性条件加入盐酸，预防CO32-、PO43-与Ba2+生成沉淀干扰，以50ml中含稀盐酸2ml为宜，酸度超出，灵敏度会下降药物杂质检查技术专家讲座第23页A.标准氯化钡B.标准醋酸铅溶液C.标准硝酸银溶液D.标准硫酸钾溶液

E.以上都不对互动：药品中硫酸盐检验时，所用标准对照液药物杂质检查技术专家讲座第24页（一）原理：对照法（比色法）三、铁盐检验法药物杂质检查技术专家讲座第25页标准铁溶液制备→供试品溶液和对照溶液制备→加入显色剂30%硫氰酸铵溶液→比色→统计和结果判断等（二）检验方法药物杂质检查技术专家讲座第26页（二）检验方法三、铁盐检验供试品显色，马上与同法制成对照溶液比较加水溶解25ml稀HCl4ml过硫酸铵50mg加水稀释35ml30%硫氰酸铵溶液3ml加水定容药物杂质检查技术专家讲座第27页1.加入硫酸目标是什么？2.加入盐酸目标是什么？3.加入过硫酸铵目标是什么？过量目标又是什么？（三）注意事项药物杂质检查技术专家讲座第28页三、铁盐检验法HCl预防Fe3+水解氧化Fe2+

为Fe3+预防硫氰酸铁受光照还原或分解过量药物杂质检查技术专家讲座第29页（三）注意事项注意事项内容标准铁溶液用硫酸铁胺[FeNH4(SO4)2·12H2O]配制贮备液，加入硫酸预防水解。标准铁溶液：10μg/ml。10-50μgFe/50ml为宜，应取1.0-5.0ml。酸性条件盐酸4ml为宜，预防铁水解过硫酸胺将Fe2+氧化成Fe3+，预防硫氰酸铁光照还原或分解处理样品加硝酸不再加过硫酸胺，但必须加热除去一氧化氮药物杂质检查技术专家讲座第30页

A.使药品中铁盐都转变为Fe3+B.预防光线使硫氰酸铁还原或分解褪色

C.使产生红色产物颜色更深

D．预防干扰

E．便于观察、比较互动：中国药典要求，硫氰酸铵法检验铁盐时，加入过硫酸铵目标药物杂质检查技术专家讲座第31页重金属系指在试验条件下，能够与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色金属杂质。如银、锑、汞、铅、铜、铋、铬、锡、锌等重金属影响用药安全或药品稳定性，必须严格控制其限量四、重金属检验法药物杂质检查技术专家讲座第32页四、重金属检验重金属：在试验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠试液作用而显色金属杂质。以铅为代表方法适用范围硫代乙酰胺法无需有机破坏，在酸性条件下可溶解无色药品中重金属检验炽灼法含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸及乙醇有机药品中重金属检验硫化钠法溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中即生成沉淀药品中重金属杂质检验药物杂质检查技术专家讲座第33页四、重金属检验黄色至棕黑色混悬液（一）检验原理第一法和第二法：第三法：药物杂质检查技术专家讲座第34页《中国药典》年版采取比色法检验，共收载了3种检验方法。主要讲解第一法第一法：硫代乙酰胺法（一）原理：对照法（比色法）

第一法原理药物杂质检查技术专家讲座第35页1.标准铅溶液制备2.检验溶液制备对照溶液制备（甲管）供试品溶液制备（乙管）监控管溶液制备（丙管）3.比色4.结果判断（二）检验方法药物杂质检查技术专家讲座第36页第一法供试品标准溶液醋酸盐缓冲溶液2mlH2O硫代乙酰胺试液2ml供+标醋酸盐缓冲溶液2mlH2O醋酸盐缓冲溶液2mlH2O甲乙丙当丙管中显出颜色不浅于甲管时，乙管中显示颜色与甲管比较，不得更深。如丙管中显出颜色浅于甲管，应取样按第二法重新检验药物杂质检查技术专家讲座第37页1.重金属硫化物生成最正确pH是3.0～3.52.标准铅溶液应在临用前精密量取铅贮备液新鲜稀释配制，以预防硝酸铅水解而造成误差,配制与贮藏用玻璃容器均不得含铅3.第一法中丙管，也称为监控管，是为了预防出现假象（三）注意事项药物杂质检查技术专家讲座第38页第二法

缓缓炽灼放冷H2SO40.5-1.0ml供试品炭化

加热

HNO3500-600℃H2SO4

除尽放冷完全灰化

蒸干HCl2ml水15ml

中性按第一法检验蒸干氨试液注意：做空白试验

药物杂质检查技术专家讲座第39页第三法供试品标准溶液NaOH5ml20mlH2O5滴Na2S试液摇匀NaOH5ml20mlH2O5滴Na2S试液药物杂质检查技术专家讲座第40页（三）注意事项注意事项内容反应环境醋酸盐缓冲液(pH3.5)标准铅溶液Pb(NO3)210µg/ml炽灼温度在用第二法检验时,炽灼温度控制在500～600℃，温度太低灰化不完全，温度过高重金属挥发损失硫化钠临用现配第三法中，显色剂硫化钠试液对玻璃有一定腐蚀性，而且久置会产生絮状物，应临用前配制四、重金属检验药物杂质检查技术专家讲座第41页A.硫化氢试液B.硫代乙酰胺试液C.硫化钠试液D.氰化钾试液E.硫氰酸铵试液互动：重金属检验法中，所使用显色剂药物杂质检查技术专家讲座第42页A.用硫代乙酰胺为标准对照液B.用10ml稀硝酸/50ml酸化C.在pH3.5醋酸盐缓冲溶液中D.用硫化钠为试液E.结果需在黑色背景下比较互动：葡萄糖中进行重金属检验时，适宜条件药物杂质检查技术专家讲座第43页现有一药品为苯巴比妥，欲进行重金属检验，应采取《中国药典》上收载重金属检验哪种方法？互动：重金属检验方法选择药物杂质检查技术专家讲座第44页1、口服碳酸氢钠原料药中氯化物检验方法：取本品0.15g，加水溶解使成25ml滴加HNO3使成微酸性后，置水浴中加热除尽CO2，放冷依法检验，与对照标准氯化钠溶液3.0ml（10ug/ml）制成对照液比较，不得更浓，计算氯化物限量。药物杂质检查技术专家讲座第45页2、对乙酰氨基酚中硫酸盐检验方法：取本品2.0g加水100ml，加热溶解后冷却，滤过，取滤液25ml依法检验，与标准硫酸钾溶液1.0ml（100ug/ml）对照液比较，不得更浓，计算杂质限量。药物杂质检查技术专家讲座第46页取乙酰唑胺2g，加水100ml，加热溶解后，快速放冷，滤过，取续滤液25ml，依法检验氯化物，要求含氯化物不得超出0.014%，应取标准氯化钠溶液（每1ml相当于0.01mgCL）多少毫升？药物杂质检查技术专家讲座第47页砷危害五、砷盐检验法药物杂质检查技术专家讲座第48页第一法（古蔡氏法）检砷装置：五、砷盐检验法醋酸铅棉花药品防止硫化物干扰HgBr2试纸HCl+SnCl2+KI10min砷斑药物杂质检查技术专家讲座第49页As3+

＋3Zn＋3H+→3Zn2+

＋AsH3↑AsO33-

＋3Zn＋9H+→3Zn2+

＋3H2O＋AsH3↑AsO43-

＋4Zn＋11H+→4Zn2+

＋4H2O＋AsH3↑砷化氢与溴化汞试纸作用生成色斑：AsH3+2HgBr2→2HBr+AsH(HgBr)2

（黄色）AsH3+3HgBr2→3HBr+As(HgBr)3

（棕色）（一）原理：对照法（比较色斑颜色）1、原理：三价As五价AsZn+HClAsH3HgBr2试纸砷斑五价砷反应较慢，需先还原为三价砷黄棕色药物杂质检查技术专家讲座第50页1.标准砷溶液制备2.标准砷斑制备3.供试品砷斑制备4.比色5.结果判断（二）检验方法药物杂质检查技术专家讲座第51页1.在反应液中加入碘化钾和酸性氯化亚锡目标2.在检砷装置导气管中装入醋酸铅棉花目标3.醋酸铅棉花装填要求4.所用仪器和试液等照本法检验，均不应生成砷斑，或至多生成仅可识别斑痕（三）注意事项药物杂质检查技术专家讲座第52页（二）二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag-DDC法）1、原理：加入有机碱三乙胺有利于反应向右进行红色胶态银三价As五价AsZn+HClAsH3目视比色法510nm测定A值药物杂质检查技术专家讲座第53页（二）二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag-DDC法）

2.检验方法Ag(DDC)红色胶态银五、砷盐检验药物杂质检查技术专家讲座第54页（二）二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag-DDC法）

3.优点：（1）灵敏度高（2）Sb干扰小：试验条件下，500μg锑不干扰（3）可限量（对照法）、可定量（比较法）五、砷盐检验药物杂质检查技术专家讲座第55页A.除去I2

B.除去AsH3C.除去H2SD.除去HBrE.除去SbH3互动：在用古蔡法检验砷盐时，导气管中塞入醋酸铅棉花目标药物杂质检查技术专家讲座第56页A．将As5+还原为As3+B．有利于AsH3生成反应C．抑制SbH3生成D．形成Zn-Sn齐以均匀而连续地发生氢气E．催化加速生成AsH3互动：古蔡氏法检验砷盐时，加入碘化钾和酸性氯化亚锡作用药物杂质检查技术专家讲座第57页主要检验检验药品中酸性、碱性杂质（一）指示剂法在供试品溶液中加入要求指示液，依据指示液颜色改变来控制酸性、碱性杂质限量（二）酸碱滴定法在一定指示液条件下，以消耗一定量酸或碱滴定液来控制药品中碱性、酸性杂质限量六、酸碱度检验法药物杂质检查技术专家讲座第58页主要检验检验药品中酸性、碱性杂质（三）pH测定法按照《中国药典》年版通则中要求用电位法（使用酸度计）测定溶液pH，以控制其酸碱性杂质限量六、酸碱度检验法药物杂质检查技术专家讲座第59页干燥失重系指药品在要求条件下，经干燥后所减失重量百分率，该法主要检验吸湿水、结晶水及在该条件下能挥发减失物质(如乙醇等)七、干燥失重测定法药物杂质检查技术专家讲座第60页惯用干燥方法有：1.恒温常压干燥法（烘箱干燥法）2.干燥剂干燥法3.恒温减压干燥法

（一）操作方法药物杂质检查技术专家讲座第61页（一）常压恒温干燥法适用范围：受热较稳定药品操作方法：扁形称量瓶(W1)、干燥箱（烘箱）供试品（研细）平铺于扁形称量瓶中，厚度不超出5mm，精密称定(W2)。干燥温度普通为105℃，达指定温度后干燥2～4小时，取出置干燥器中放冷至室温,称重，再干燥（1h），直至恒重，称重W3。六、干燥失重测定法药物杂质检查技术专家讲座第62页（一）常压恒温干燥法六、干燥失重测定法干燥失重%=W2-W3W2-W1×100%药物杂质检查技术专家讲座第63页六、干燥失重测定法（一）常压恒温干燥法1.药品含有较大量水分，熔点又低硫代硫酸钠Na2S2O3·5H2O先在40℃～50℃加热，使结晶水缓缓释去；然后逐步升高温度，在105℃干燥至恒重，减失重量不得超出32.0～37.0%2.药品含有较大量水分，熔点较高枸橼酸钠（2个结晶水）：180℃干燥特殊情况药物杂质检查技术专家讲座第64页六、干燥失重测定法（二）干燥剂干燥法适用范围：受热易分解或易挥发药品操作方法：将供试品置于干燥器内，利用干燥器内干燥剂（变色硅胶，硫酸和五氧化二磷）吸收供试品中水分，干燥至恒重药物杂质检查技术专家讲座第65页六、干燥失重测定法（三）减压干燥法1.减压恒温干燥法适用范围：熔点低，受热不稳定、能耐受一定温度及水分难赶除药品2.减压室温干燥法适用范围：熔点低而且不能加热药品药物杂质检查技术专家讲座第66页六、干燥失重测定法（三）减压干燥法减压干燥器真空干燥箱药物杂质检查技术专家讲座第67页甲睾酮，熔点：163～167℃Ch.P要求取本品，在105干燥2h，减失重量不得超出1.0%。苯佐卡因，熔点：88～91℃Ch.P要求在五氧化二磷干燥器中干燥至恒重，减失重量不得超出0.5%。布洛芬，熔点：74.5～77.5℃Ch.P要求在五氧化二磷干燥器中减压干燥至恒重，减失重量不得超出0.5%。互动：干燥失重测定方法选择药物杂质检查技术专家讲座第68页六、干燥失重测定法（四）热重分析法热重法是在程序控制温度下，测量物质质量与温度关系一个技术统计质量改变对温度关系曲线即热重曲线。G药物杂质检查技术专家讲座第69页（二）统计和结果计算药物杂质检查技术专家讲座第70页1.供试品干燥时应注意问题2.从干燥器中取出供试品后应注意问题3.干燥器中惯用干燥剂为硅胶、五氧化二磷或无水氯化钙。干燥剂应及时更换,使其保持有效状态（三）注意事项药物杂质检查技术专家讲座第71页氯化物检验、硫酸盐检验、铁盐检验、重金属检验、砷盐检验惯用沉淀（显色）剂、标准溶液分别是什么？反应现象是什么？点滴积累药物杂质检查技术专家讲座第72页水分测定法干燥失重与水分测定区分项目概念对象干燥失重药品在要求条件下干燥至恒重后所减失重量百分率吸湿水、结晶水和挥发性物质水分测定测定供试品中水分水药物杂质检查技术专家讲座第73页（一）测定原理：费休法非水溶液中氧化还原滴定费休试液：碘、二氧化硫、吡啶和甲醇终点指示：本身指示法（I2浅黄色出现）

永停法

水分测定法药物杂质检查技术专家讲座第74页（二）操作方法

水分测定法A:供试品消耗滴定液体积，mlB:空白试验消耗滴定液体积，mlW:供试品取样量F:滴定度药物杂质检查技术专家讲座第75页（三）注意事项吡啶和甲醇作用：因为反应是可逆，为使反应向右进行完全，加入无水吡啶定量地吸收HI和SO3，形成氢碘酸吡啶（C5H5N·HI）和硫酸酐吡啶（C5H5N·SO3）但生成硫酸酐吡啶不够稳定，加入无水甲醇可使其转变成稳定甲基硫酸氢吡啶（C5H5N·HSO4CH3）水分测定法药物杂质检查技术专家讲座第76页精密称取本品0.7540g，置干燥具塞玻瓶中，加无水甲醇5ml充分振摇后，用费休试液滴至溶液由浅黄色变为红棕色，消花费休试液2.15ml；另取无水甲醇5ml，同法测定，消花费休试液0.15ml，求青霉素钠含水量（已知每1ml费休试液相当于3.52mg水）。互动：注射用青霉素钠水分测定药物杂质检查技术专家讲座第77页炽灼残渣：检验非金属有机药品中非挥发性无机杂质(主要是金属氧化物、无机盐)

八、炽灼残渣检验法炽灼至完全炭化加硫酸，700～800℃炽灼使完全灰化药物杂质检查技术专家讲座第78页八、炽灼残渣检验法注意事项：1.重金属在高温下易挥发，如供试品需将残渣留作重金属检验，则炽灼温度须控制在500～600℃2.含氟药品对瓷坩埚有腐蚀，需用铂坩埚0.1%～0.2%药物杂质检查技术专家讲座第79页检验药品中遇H2SO4易炭化或易被氧化呈色微量有机杂质方法：药品加H2SO4炭化后与对照液比较，同置白色背景前，平视观察比较对照液：“溶液颜色检验”项下标准比色液；由比色用氯化钴液，比色用重铬酸钾液，比色用硫酸铜液按要求方法配成对照液；高锰酸钾液九、易炭化物检验法药物杂质检查技术专家讲座第80页

控制药品在生产过程或贮藏过程中产生有色杂质限量方法（一）目视比色法K2CrO7、CoCl2、CuSO4溶液5种色调标准贮备液5种色调各10个色号标准比色液十、溶液颜色检验法不一样百分比不一样量水稀释药物杂质检查技术专家讲座第81页十、溶液颜色检验法对乙酰氨基酚乙醇溶液颜色检验取本品1.0g，加乙醇10ml溶解后，如显色，与棕红色2号或橙红色2号标准比色液比较