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文档简介
生长快、肉质好的转基因鱼(中国)乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷)过程分析编辑ppt1.1DNA重组技术的基本工具编辑pptDNA重组技术的基本工具准确切割DNA的工具(“分子手术刀”)DNA片段的连接工具(“分子缝合针”)基因转移工具(“分子运输车”)基因的大小以纳米计算,要对它进行剪切、拼接等操作,没有非常精细的工具是不行的。进行基因操作最少需要以下三种工具:编辑ppt识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。主要是从原核生物中分离纯化出来的一种酶。能将外来的DNA切断,由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的,故名限制性核酸内切酶。4000种。1、来源:2、种类:3、作用:4、结果:形成两种末端一、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶黏性末端平末端编辑ppt大肠杆菌的一种限制酶(EcoRⅠ)能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开形成黏性末端。SmaⅠ能识别CCCGGG序列,并在C和G之间切割形成平末端。编辑ppt编辑ppt重播编辑ppt编辑ppt限制酶切割DNA后形成的末端——黏性末端、平末端是如何形成的?编辑ppt什么叫黏性末端?当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时,被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。编辑ppt什么叫平末端?
当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时,切开的DNA两条单链的切口,是平整的,这样的切口叫平末端。编辑ppt基因的针线──DNA连接酶切断的DNA片段要与受体细胞的DNA连接,你觉得可以用什么酶?DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同点和不同点?编辑pptDNA连接酶DNA聚合酶连接DNA链双链单链连接部位在两DNA片段之间形成磷酸二酯键将单个核苷酸加到已存在的核酸片段的3’末端的羟基上,形成磷酸二酯键编辑ppt
限制酶切割后有两种不同的结果,一种产生黏性末端,一种产生平末端。那么恢复它们的连接时,所用DNA连接酶是否可以不加选择?E.coliDNA连接酶:连接黏性末端T4DNA连接酶:连接黏性末端和平末端编辑ppt基因进入受体细胞的载体
要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达,首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去!能将外源基因送入细胞的工具就是载体。编辑ppt载体必须具备的条件如果载体对受体细胞有害将怎样?目的基因是否进入受体细胞,没有标记基因我们能否鉴定?假如目的基因导入受体细胞后不能复制将怎样?作为载体没有切割位点将怎样?编辑ppt作为载体的必要条件1、能够在宿主细胞中复制并稳定地保存;2、具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接;3、具有某些标记基因,便于进行筛选。(如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等)4、对受体细胞无害编辑ppt作为载体的必要条件能自我复制有切割位点能与目的基因结合能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制并表达;有遗传标记基因对受体细胞无害比较容易得到编辑ppt3、基因的运输工具——运载体能复制并带着插入的目的基因一起复制有切割位点有标记基因的存在,将来可用含青霉素的培养基鉴别。编辑ppt练习在基因工程中,切割运载体和含有目的基因的DNA片段,需使用()同种限制酶B.两种限制酶同种连接酶D.两种连接酶编辑ppt不属于质粒被选为基因运载体的理由是
A、能复制()
B、有多个限制酶切点
C、具有标记基因
D、它是环状DNAD练习编辑ppt不属于质粒被选为基因运载体的理由是
A、能复制()
B、有多个限制酶切点
C、具有标记基因
D、它是环状DNAD补救练习编辑ppt3)基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中,不进行碱基互补配对的步骤是()
A、人工合成目的基因
B、目的基因与运载体结合
C、将目的基因导入受体细胞
D、目的基因的检测和表达C练习编辑ppt达标练习在基因工程中,切割运载体和含有目的基因的DNA片段,需使用()同种限制酶B.两种限制酶同种连接酶D.两种连接酶基因工程常用的受体细胞有()(1)大肠杆菌(2)枯草杆菌(3)支原体(4)动植物细胞A.(3)(4)B.(1)(2)(4)C.(2)(3)(4)D.(1)(2)(3)编辑pptA、BamHI和EcoRI;末端互补序列—AATT—B、BamHI和HindⅢ;末端互补序列—GATC—C、EcoRI和HindⅢ;末端互补序列—AATT—D、BamHI和BglII;末端互补序列—GATC—限制酶是一种核酸切割酶,可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列。下图为四种限制酶BamHI,EcoRI,HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位,其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合?其正确的末端互补序列为何?()
编辑ppt基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中,不进行碱基互补配对的步骤是()
A、人工合成目的基因
B、目的基因与运载体结合
C、将目的基因导入受体细胞
D、目的基因的检测和表达C编辑ppt一、DNA重组技术
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