【doc】大鼠肝移植麻醉与无肝期补液的研究

大鼠肝移植麻醉与无肝期补液的研究?2O?亍Fe叭tgO一一;大鼠肝移植麻醉与无肝期补液的研究陈岩v,徐冠南王孟龙吕随峰付志仁王元和.,摘要目的:研究大鼠肝移植最适麻醉方法和现察各种输注液体对肝移植受体无肝期中,后阶段血液动力学的影响方珐:300只雄性SD大鼠进行3.50例肝移植,观察供受体麻醉过程,麻醉药物剂量及其效果;8o其雄性SD大鼠,分为供受体两组,受体组再随机分为对照组c,生理盐水组G-NaHCOs组G,丹参组G.,每组10只.无肝期开始补渡,观察各生理指标变化结杀:供体氯胺酮麻醉的剂量以l[)()～15Omg/kg为宜.从上腔静脉给予生理盐水,NaHCO.和丹参8m[/h均对体温无显着影响,但均明显改善无肝期血液动力学NaHCO可使无肝期末pH值较对照组有较大的提高+对PO.,PC0:及SatO.无明显的影响,但使术后再灌注期的肝功能有较显着改善丹参能提高无肝期末动脉PO,并相应降低PC0,使再灌注后肝功能有显着改善.拮论:受体麻醉术前使用阿托品可显着降低术后肺部并发症发生率.无肝期补液能纠正该期血液动力学紊乱.丹参液可作为首选.关键词原!兰苎;鎏;芝!!;型塑;液体治疗中国图书资料分类法分类号R657.3补Experimentalstudyofratorthotopiclivertransplantati0n:anesthesiaandinfusioninanhepaticperiodWuJianying,ChenYan,XuGuannan,WangMenglong,LuSuifeng,FuZhiren,WangYuanhe(DepartmentofGeneralSurgery,ChangzhengHospital,SecondMilitaryMedicalnivey,Sha"ghai,200003)●AbstractObjective:ThisexperimentfocusedONthechoiceofproperanesthesiadruganditsdosage,andthestudyoftheeffectofinfusioninrecipientanhepaticperiodONvariousphysiologicalindexes.Methods:Weanalyseddonorandrecipientanesthesiaprocedure,dosageandeffectafterhavingperformed150trans—plantsusing300rats.EightySDspeciesratsweredividedintotwogroups,donorandrecipient.Thelatterwasdividedintofoursubgroups.controlgroupCwithNOinfusioninanhepaticperiod,physicalsalinegroupG1,NaHCO3solutiongroupG2andsalviamihiorrhizasolutiongroupG3indosageof8ml/hviasupe—riotvenacavacatheterinanhepaticperiod,Infusionbeganatanhepaticperiodtoobservechangesofphysiologicalindex.Results:Ketaminedosageofdonoranalgesiawas100～150mg/kgofchoice.Infusionofsaline,NaHCO3andsalviamiltiorrhizasolutionindosageof8ml/hviasuperiorvenacavacatheterinan—hepaticperiodcouldmarkedlyamelioratehemokineticsattheendofthisperiodwithNOsignificantaffectiontobodytemperature.NaHCOacouldraisepHvaluecomparedwithcontrolandameliorateliverfunctioneveninpostoperativereperfusionperiodwhilehavenoobviouseffectONPO2,PCO2andSatO2.Salviamil—tiorrhizasolutioncouldmakePO.higherandPCO2lowerrelativelyattheendofanhepaticperiodaswellasimproveliverfunctionafterreperfusion.Conclusion:Atropineimbeforerecipientoperationcanmarkedlyreducethemorbidityoflunginfection.Infusioninanhepaticperiodcg.ncorrecthemodynamicaldisorders.Salviamiltiorrhizasolutionisofchoice.Keywordsorthotopiclivertransplantation;anesthesia;administrationdosage;anhepaticperiod;infusiontherapy大鼠原位肝移植模型在研究肝移植时缺血再灌注损伤,免疫排斥与耐受及多脏器联合移植中是应用较广的技术,具有复制性好,成活率高等优点….维持有效稳定的麻醉和肝移植无肝期(Anhepatic?作者单位第二军医大学长征医院普通外科,上海,200003第二军医太学1鲫7Feb;18(1)?21?period)血液动力学平稳的重要陛已引起广泛重视r.但尚少见有关研究的报道本实验总结150例大鼠原位肝移植麻醉过程,和在无肝期使用不同种液体进行补液治疗的效果,以期寻找维持无肝期血液动力学平稳,减轻无肝期后酸血症的方法1材料和方法1.1麻醉实验动物及分组雄性SD大鼠300只,体重15o～250g(上海医科大学动物部),随机分为供,受体2组.每组150只,供体组选用氯胺酮麻醉.再将动物分为3组(c.C:,C),每组各5o只,分别为Cl组30～50mg/kg;C2组10O～150mg/kg;C3组2∞～250mg/kg.受体均采用乙醚开放麻醉.分为A,A组,每组75只,A组为术前30min给予阿托品0.2～0.3mg.A组为不给阿托品者.1.2无肝期补液实验动物及分组雄性SD大鼠8o只,均使用麻醉成功的动物.随机分为供,受体2组(各40只).受体组随机分为4组,各组1o只大鼠,c组作对照,不给予任何液体;G组给予生理盐水8ml/h;G组给予2.5碳酸氢钠8ml/h;G.组给予5丹参液(V/V)8ml/h.1.3实验方法移植手术参照Kamada法.}].离体肝均在4℃平衡液中保存1h左右.各组均行右颈内静脉穿刺置管,朴液均通过微电脑输液泵(YBDS—l1,上海电表厂生产)从无肝期开始时进行;经尾动脉插管连接四道生理记录仪(RM一6200C,成都仪器厂生产)记录血压;在无肝期0及15min经腹主动脉抽血0.3ml行血气分析,对存活动物在再灌注后60rain及24h抽静脉血查肝功.手术期间动态监测血压及体温的变化.1.4数据处理数值均用土s表达.组问比较采用成对资料t检验,记数资料用检验2结果2.1麻醉研究2.1.1供体组各组氯胺酮麻醉效果见表1."好"为动物角膜反射消失,无躁动;"一般"为动物稍有躁动,但不影响手术;"差"为动物躁动明显,勉强完成手术;"极差"为动物无法固定,很难手术.表1氯胺酮麻醉效果的比较Tab1Comparisonofketamineanesthesiaeffectindonorgop(…50±)供体C,C组死亡3例,均在给药后1min内发生,可能为氯胺酮超敏反应.C组死亡15例,均在给药5mln后发生,考虑与氯胺酮毒性蓄积有关2.1.2受体手术使用乙醚开放麻醉效果满意,成功率94(141/150),死亡6.0(9/150).A组与A组对麻醉诱导期影响不大,分别为(2.2土0.3)和(2.3土0.2)min(P>0.05);但对术后肺部并发症发生率有统计学差异.分别为5.0和26.7(P<0.05).2.2无肝期补液研究2.2.1体温在无肝期0,5.10,15min测定,组间比较无显着差异(P>0.05).2.2.2动脉压无肝期以门静脉,肝上上腔静脉阻断作为开始,18min后结束.动脉压分别在距无肝期始0,5,10,15,2O,45,75rain测定,变化见表22.2,3无肝期动脉血气的变化见表3.2.2.4再灌注后肝功能开放门静脉及肝上上腔静脉开始再灌注,再灌注后肝功的变化见表4.3讨论氯胺酮具有对呼吸,循环抑制较轻,对氧和二氧化碳分压影响较小及肝毒性小等优点,符合大鼠肝移植的麻醉要求.本组资料显示当氯胺酮剂量达200～250mg/kg时,实验动物麻醉死亡率明显上升.因此推荐剂量为10o～150mg/kg,可产生最好的效果和最少的并发症.?22?第二军医大学I9g7Feb:18(I)表2各组无肝期爰无肝期后动脉血压的变化Tab2Changeofarterialbloodpressureinandafteranhepaticperiod(…10士i,p/kPa)BeginningofanhepaficperiodEndofanhepaticperiodPOz(p/kPa)PCOz(p/kPa)pHSatO2PO2(p/kPa)PCO!(p/kPa)pHSatO表4各组再灌注后不同时间肝功能的变化Tab4Changeofliverfunctionatvarioustimeafterreperfusion("=IO.土./U,L目前国内,外均以乙醚作受体麻醉,具有易控制麻醉深度,追加剂量方便,易于苏醒等优点.但由于其具有刺激呼吸道产生大量分泌物的副作用,因而术后易发生肺部感染.本实验中A,A组肺部并发症的发生率为5.0和26.7(尸<0.05)说明阿托品可明显抑制腺体分泌.减少肺部并发症.因此应在肝移植前0.5h给予阿托品0.2～0.3mg是必要的.无肝期由于回心血容量急剧减少引起心泵功能及心输出量明显下降,乳酸及氢离子堆积.跨膜H一/Na交换增加导致细胞内水钠潴留,线粒体水肿.进一步影响细胞功能.此外Ca.与H均可影响肌动蛋白动力学,引发细胞骨架的变构,因而对肝移植预后影响颇太.因此,无肝期通过上腔静脉系统补液以期纠正酸中毒与休克就显得十分重要生理盐水具有扩容及降低血液粘滞度的特点;NaHCO.能够中和无肝期时乏氧代谢所产生的H.是临床治疗酸中毒的有效手段;而丹参具有明确的活血化瘀,增加心肌正性肌力作用的功效.已广泛应用于临床.本实验资料显示无肝期从上腔静脉给予生理盐水,NaCHO.和丹参8ml/h均对体温无显着影响,但均明显改善无肝期血液动力学.同时尚可见补液与否对无肝期前期血压影响均不显着,考虑这与初期补液速度不够快及心脏功能失代偿有关.补充生理盐水及NaHCO.在无肝期结柬后只能使血压恢复到无肝期前的80左右.肝功能检查提示单纯补第一医学1997Feb;l8(1j艿研伽吁?23?充生理盐水不能改善术后肝功能.NaHCO.可使得无肝期末pH值有较大的提高,对PO,PCO及SatO:则无明显的影响.对术后再灌注期的肝功能有较显着改善.证明H在术后再灌注损伤中确实发挥了一定的作用,拮抗H可明显减轻缺血再灌注损伤.丹参除对无肝期血压有较大的改善外尚对无肝期后期有一定的作用.并且能提高无肝期末动脉PO.并相应降低PCO.肝功能检查也表明无肝期给予丹参可使肝功能有显着改善,再次证明丹参的强心作用及对肝移植和无肝期的支持作用.此外尚具有拮抗后继损伤因子如氧自由基的功效此作用已在肝缺血再灌注损伤的研究中见诸报道,可见其不仅对热缺血具有拮抗氧自由基的保护功效,而且对冷缺血后再灌注损伤亦可起到同样显着的作用,故可作为补液首选第二军医大学l997Feb18(1):23参考文献lKobayashiE,KamadaN.EnnosaqaSetalComparisnnofpotentialitytoinducegraft}r…hostreactionwithsmallbowe1.pancreas/spleenandlivertransplantationintherat.CIirlExplmmunol19§3l92(2#5272WaynforthHBExperimenlalandsurgical~echniqueintheya1.London:AcademicPressl980101～l213吴剑英.棣冠南.Et随峰等150倒大鼠原位肝移植手术方法比较第二军医大学,l996l17f3)2234KamadaN,CalneRY.AsurgicalexperiencewithfivehundredthirtylivertransplantsintheyalSurgery一1983l93(1)}645G0sGJINieminenAIIFleishmanKEelallntraeeIluIarpHdur.mgchemicalhyp~xiamruhuredratIpatoy1es】ClinInvest,l980{83(2):386(1990—05—10收穑?1996—11一l0修回)(车文编辑沈忐超)创亩侵袭性感染组织病理制片方法的改进/李全华孙家毒富克远葛绳德焦痴下细菌计数方法不能准确反映细菌入侵的深度我们经过大量的动物实验,建立了系列涂片和病理制片方法.取得了较好的实用教果1材料和方法11组织标本采集完成动物烧伤感染模型后.先取感部位渗液涂片.革兰染色.再取正常组织作对照.1.2固定方法切取烧伤动物背部约1,5crft×1.5Crft深至肌层的环形组织.平整铺于木板上,边缘用大头针固定,表面用纱布覆盖.置于窖器内,15甲醛液固定24h.1,3取材切取上述组织,厚度为0.3cm.再用甲醛液复固定5h.1.4脱水,包埋和切片将所取组织块置于75己醇中24h,85己醇24h,95乙醇2