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文档简介
离体蛙类心脏灌注及药物的影响第1页/共27页第六次实验离体蛙类心脏灌注及药物的影响第2页/共27页
实验原理
注意事项
实验后处理
实验步骤
实验目的主要内容第3页/共27页
制备离体蛙心
取蛙,破坏脑和脊髓剪开胸腔和心包膜,辨认蛙心结构
结扎右主动脉,结扎静脉(避开静脉窦)左主动脉处结扎、切口、插管、固定、
剪断,蛙心离体
实验步骤:第4页/共27页
连接实验装置
实验装置参数设置
给予处理因素第5页/共27页离子影响:0.65%NaCl;2%CaCl2;1%KCl递质影响:1:10000NA;1:100000Ach;
1:2000阿托品+1:100000Ach药物影响:0.025%毒毛旋花子甙K温度影响:4℃林格液酸碱影响:2.5%NaHCO3;
3%乳酸+2.5%NaHCO3第6页/共27页记录正常收缩曲线幅度:心脏收缩的强弱疏密度:心搏频率规律性:心搏的节律性基线:心室舒张的程度记录第7页/共27页制备离体蛙心标本不要伤及静脉窦;插管插入左心室后要及时将血液吸出,以防堵塞。2.保持蛙心的活性,注意滴加林格液。3.每次换液时蛙心内的液面应保持大致相同的高度(负荷相同)。4.吸管要分开使用。注意事项:第8页/共27页5.加药时先加1滴,出现效应后应及时更换为林格液。6.每次施加处理因素前应先记录一端正常曲线,做好标记,要有恢复曲线。7.注意保护换能器,不要过度牵拉,液体不要滴在上面。第9页/共27页
1.截取各种处理因素具有代表性的蛙心收缩曲线,制成单页图打印出来。2.分析各处理因素对蛙心收缩曲线影响及其原理,写出实验报告。实验结果处理第10页/共27页第11页/共27页0.65%NaCl渗透压与林格液相同但缺K+,Ca2+Ca2+减少,收缩力减弱
K+减少,膜对K+通透性降低,静息电位绝对值减少
K+外流减少,Na+内流增加,4期If增强1.等量0.65%NaCl,收缩力减弱,心率加快第12页/共27页
胞外Ca2+浓度升高,内流增多,心肌收缩力增加,幅度增大;但胞内Ca2+过多,肌钙蛋白与Ca2+结合不能解离发生,导致心肌舒张不完全,严重者可发生钙僵,图中表现为收缩曲线上移。
Ca2+浓度升高,抑制Na+内流2.2%CaCl2收缩力增加,心率减慢第13页/共27页
胞外K+浓度升高,Ca2+内流减少(竞争)胞外K+浓度升高,静息电位绝对值减少,低于-55~-60mV时,快Na+通透失活,兴奋性下降,心率减慢,甚至停止在舒张期3.1%KCl,收缩力减弱,心率减慢第14页/共27页NA与心肌β受体结合后,激活AC,Ca2+通道开放增加,正性变力、变时、变传导4.NA收缩力增加,心率加快第15页/共27页
Ach与心肌细胞膜上M-R结合,抑制AC,抑制钙通道,同时激活GK蛋白,K+外流增加,负性变力、变时、变传导5.Ach收缩力减弱,心率减慢第16页/共27页
阿托品为M胆碱受体拮抗剂,但离体蛙心无神经支配,无ACh释放,加入阿托品后无明显作用;再加入Ach,由于阿托品已将M胆碱受体阻断,故Ach无作用。6.阿托品+Ach,无明显变化第17页/共27页
抑制Na+-K+-ATP酶使细胞内Na+量升高,K+下降,胞内Na+升高,可促进细胞内外Na+-Ca2+交换,使细胞内Ca2+增多,从而加强心肌细胞收缩力。(毒K的作用有赖于胞外Ca2+的存在)7.毒K收缩力增加第18页/共27页
温度过低时,肌凝蛋白头部ATP酶活性降低酶活性降低,代谢水平降低,各离子通道蛋白活性降低,心脏收缩活动减弱,心率减慢。8.4℃冷林格液收缩力减弱,心率减慢第19页/共27页NaHCO3可使细胞内H+外逸,与胞外K+进行H+-K+交换,K+外流减少,细胞的膜电位减小甚至兴奋性完全丧失。另外,NaHCO3也使林格液中游离的Ca2+浓度降低(如形成CaCO3沉淀),内流Ca2+减少,心肌收缩力降低。9.2.5%NaHCO3收缩力减弱第20页/共27页H+可竞争性抑制Ca2+与肌钙蛋白结合亚单位的结合,使肌凝球蛋白ATP酶活性降低;H+使钙从肌浆网释放量减少,抑制Ca2+释放;胞外H+升高还能降低钙通道的活性,使Ca2+内流降低,心脏的收缩活动减弱。加入NaHCO3后中和酸,心脏活性逐渐恢复。10.乳酸收缩力降低,再加入NaHCO3,逐渐恢复第21页/共27页下次内容家兔呼吸运动的调节呼吸节律的形成呼吸运动的调节方式实验步骤、注意事项实验结果的处理、打印、分析第22页/共27页心室左心房右心房动脉圆锥左主动脉弓右主动脉弓第23页/共27
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