第8章分子遗传与基因工程

第八章分子遗传第八章分子遗传 2 ： ；。4大肠杆菌（E.coli） 5噬菌体（2）（2）.DNAE.7 超级螺 螺旋8 ：：9（OlinsA.（KornbergR.D.，1974,（Chambon核小体：核小体：由H2A、H2B、H3和H44种组蛋白构成。连接丝：DNA双链+H1组蛋白。H153个氨基酸H2A129 H2B125个氨基H3133个氨基酸H41021个核小体（绕有1.75圈DNA）约200bpDNA。 12条染色单体（即1条染色单体由1四级螺旋结构（BakA. DNA双螺旋 ↓H2A、H2B、H3、1/7一 1/6二 1/40三 1/5四级 真核生物:每条 末端 第二节第二节 提出中心法则，确定遗传信息由遗传信息在核酸中，遗传信息由核酸流向蛋白质遗传信息DNAmRNA遗传信息从DNADNA RNADNA大部分 可把 （WatsonJ.D.）等DNA半保 方式 生物遗传的稳定性非常重要。⑴ 是单 子：在同一 起点控制下的一段DNA序列 ①在整个生物界中， 到人类，遗 4个基本碱基符号所有氨基酸所有蛋白质 有多 RNARNARNA链的终止及⑵⑵三种RNA转移RNA反子 ①.41=4种：缺16②.42=16种：缺4③.43=64种：由三个碱基一起组成的 2.2.遗 遗传 的主要特性：自 和相对稳定性 时有规律地进行分配 ∴经典遗传学认为： ⑴.揭示遗 具体性状 DNA分子上一定区段，携带有特殊遗传信息转录成RNA翻译成多肽链，或对其 不是最小 位更复杂的遗传和变异单位 lac调 子 半乳糖苷酶渗透酶转乙酰酶因E. 指在同一段DNA顺序上，由于阅读框架不同或终止早晚不同同时编码两个以上 的现象。在一些细菌和动 中，最早由Sanger于 AEBCDF 卵清蛋白转 拼接除去2个或内含子的转录物 卵清蛋白 前体；； ；； 段某 组上可以转移 实质：能够转移位置的 断之间移动引起入突变、DNA结构变异（如重复、缺失、畸变） 的30多年后，McClintock于1983获与重组有关⑹.⑹. rRNA。直接影响蛋白质红血球碟形HbA HbA第6位为谷氨酸（GAG、GAA）HbS第6位为缬氨酸（GUG、GUA） HbS（镰刀形HbC（镰刀形圆粒（RR）皱粒（rr）F1圆粒（Rr）F21/4R∴ – 工程：在分子水平上，采取工程建设方式 组转移到另一生物中去使后者定。浙学19711971年（SmithH.O.）等人从细菌中分离出的一种限制性酶酶切DNA分子，标志着DNA重组1972年（BergP.）等用限制性酶分别酶切猿猴 （CohenS.）等进一质粒转入E.cloi细胞中1982 1983年 1994年延熟保鲜的转 32142263总 为抗除草剂大豆）、玉米17（2520万hm2，约25%）、棉花（1340万hm2，约13%）、油菜9（480万hm2，约6%）。 0 食品价值已达到 1996199719981999200020012002200320042005（5460万hm2，53%）、阿根廷、巴西、加拿 德国、斯洛伐克等22个国家近1030万农户种植了转 性状 油菜，5860万hm2，约占全世界 作物的抗虫：主要为 玉米、棉花，1560抗除草剂抗虫：主要为转 番木瓜等5种已批准商业化种植的 植物浙江大国家中长期科学和技术发展规划纲要（2006国家中长期科学和技术发展规划纲要（2006200年中，把生物技术列在今后15年八大前沿技术领域之首，视为21世纪新科技的重要推动力量。我国生物技术发展的基本思路：加强 为“农业 创新等领域有密切关系，希望和前途加快生物技术在作物育种中的应用范围但生物技术只是传统与技术的延伸和补充，而是用于提高常规技术的效率、促使利用常规技术方法不能达到的目标的实现。 .. ⑶.将酶切的DN ⑷.将重组DNA分子导入宿主细胞，在细胞内 ⑸.重组DNA随宿主细胞 . ㈠、限制性内切酶（restrictionEcoRI、Hind 浙江大EcoR1.限制性内切 ①.EcoRI来自大肠杆菌（Escherichia②.HindIII来 杆菌（Haemophilusinfluenzae）2.EcoRI（大肠杆菌）、HindIII（ (1).切割产生平齐末端（bluntends），如Sma(2).切割产生产生粘性末端，如BamHI、PstI、EcoRIHindIII部部学 段适合的载体DNA重组DNA ①①.具 ③选择时的遗传标记；④.易从宿主细胞中回收pUC19 是编码一条多肽链的一个DN 1. 将 库可选择特异 库 库（genomiclibrary）：将某生物全部 以mRNA为模板反转录酶合成互补DNA构 的mRNA序列仅 (2).筛 相关信息确定筛选方法和条件 或非放射性同位素标记探针筛选 聚合酶链式反应（polymerasechainreaction 2720起始目标双链

用下，72℃下合成模板 扩充一倍。与引物2互

延 3.人工合3.人工合 酶促合成DNA的方法结合起来人工合成 技术可扩增出完整的 遗传学基础（ 三、工程的应用:目前，工程研究发展迅速，已取得一系列重大广泛用于工业、农业、畜牧业、医学、法学等领域，为人类创造了巨大的。 ： 最早应 插入E. 肝炎工程等。工程应用大肠杆菌生产人类生长激素 枪转化法应用最多 开始 1.1.植物 小2.的直接导入植物细胞整合到枪的金属颗粒将目的到 单价抗虫棉：Bt（苏云金杆菌）杀虫晶体蛋白 双价抗虫棉：CryIACpTI（豇豆胰蛋白酶抑制剂 转 E.coli中分离克隆的EPSP ，已培育出高抗除草剂 通过转通过转技术已育成稻米胚含2000，287(14)）。 >60%）、 番木瓜等5种已批准商业化 动物：目的 载体重组DNA微量 羊“Polly”Nature385,转转移有人类生长激素转移有人类生长激素 ：： 水平进行诊断准确度高，速度快 治疗（genetherapy）。 （8个月和11个月） 1995年 研制成功具有自主知 导入载体系统 B型血友病、梗塞性外周血管病等阶段；20多个具有自主知识2004年1月 市塞百的治疗方案治疗方案于首个重组 （）治疗药物“今又生” ⒈构 ⒉构 ⒊测 ⒋绘 组计划”， 础（第八章 日美中 工作我国参与第3研究，计3000人 组全部序列1%（1999年9月加入这一研究） 组计划”。类类《Science》登中国独立完成组草图序列（总数：4.6亿），组 ” 组序列进行