微生物学消毒与灭菌

关于微生物学消毒与灭菌1第一页，共三十一页，编辑于2023年，星期一2消毒（disinfection）杀死物体上病原微生物的方法，并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物。灭菌（sterilization）

杀死物体上所有微生物（包括病原菌和非病原菌及其芽胞）的方法。抑菌（bacteriostasis）抑制细菌生长繁殖的方法防腐（antisepsis）

防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。无菌（asepsis）

不存在活菌的意思。无菌技术是指在进行外科手术或分离、转种及培养时防止其他微生物污染实验材料的操作方法。

基本概念:第二页，共三十一页，编辑于2023年，星期一3第一节物理消毒灭菌法热力灭菌法辐射灭菌法滤过除菌法超声波灭菌法干燥与低温抑菌法第三页，共三十一页，编辑于2023年，星期一4一、热力灭菌法原理高温使菌体蛋白质、核酸、酶等凝固或变性失活。方法

湿热灭菌

干热灭菌第四页，共三十一页，编辑于2023年，星期一51.干热灭菌法（Dryheat）第五页，共三十一页，编辑于2023年，星期一6电热干烤箱

第六页，共三十一页，编辑于2023年，星期一7巴氏消毒法(pasteurization)

61.1~62.8℃30min/71.7℃15~30s,用于牛奶、酒类的消毒.煮沸法

一般细菌100℃5min,芽孢1~2h，加入2％碳酸钠可用于消毒食具、刀剪、注射器。流动蒸汽消毒法

100℃蒸汽15~30min芽孢不能全部杀灭。间歇蒸汽消毒法

100℃蒸汽15~30min,37℃过夜,100℃蒸汽15~30min，如此连续三次以上.适于不耐高热的含糖、牛奶等培养基。高压蒸汽消毒法

103.4kPa蒸汽压,121.3℃,15~20min，适于培养基、生理盐水、手术敷料等耐高温、耐湿热物品的灭菌。2.湿热灭菌法（Moistheat）第七页，共三十一页，编辑于2023年，星期一8手提式高压蒸汽灭菌器立式高压蒸汽灭菌器第八页，共三十一页，编辑于2023年，星期一9立式智能高压蒸汽灭菌器第九页，共三十一页，编辑于2023年，星期一10干热灭菌与湿热灭菌穿透力的比较加热方式传导

介质温度（℃）加热时间（h）透过布层温度（℃）结果20层40层100层干热空气130～1404867270以下灭菌不完全湿热饱和

蒸汽105.3310110l10l灭菌完全第十页，共三十一页，编辑于2023年，星期一11二、辐射杀菌法（Radiation）（一）紫外线：波长265～266nm杀菌原理：主要作用于细菌DNA，使相邻两个胸腺嘧啶共价结合形成二聚体，从而干扰DNA复制和转录，导致细菌变异和死亡。用途与缺陷：穿透力弱，只能用于手术室、传染病房、细菌实验室的空气消毒和不耐热的物品表面消毒。第十一页，共三十一页，编辑于2023年，星期一12（二）电离辐射：包括x射线和γ射线，有较高的能量与穿透力。用于食品、一次性医用塑料制品的消毒。（三）微波：可穿透玻璃、塑料薄膜和陶瓷等介质，但不能穿透金属。常用于非金属器械消毒，实验室用品、食品餐具、药杯等消毒。第十二页，共三十一页，编辑于2023年，星期一13三、过滤除菌法是用物理阻留的方法除去液体和气体的微生物。主要适合于不耐高温的血清、抗生素、抗毒素、药液以及空气除菌。不能去除病毒、支原体、衣原体等。第十三页，共三十一页，编辑于2023年，星期一14滤菌器

杯式过滤器圆筒式过滤器第十四页，共三十一页，编辑于2023年，星期一15第十五页，共三十一页，编辑于2023年，星期一16四、超声波杀菌法

目前主要用于粉碎细胞，以提取细胞组分或制备抗原等。第十六页，共三十一页，编辑于2023年，星期一17五、干燥与低温抑菌法

干燥法常用于保存食物低温可使细菌的新陈代谢减慢，故常用作保存细菌菌种，冷冻真空干燥法是目前保存菌种的最好方法。第十七页，共三十一页，编辑于2023年，星期一18第二节化学消毒灭菌法第十八页，共三十一页，编辑于2023年，星期一19一、消毒剂的主要种类根据杀灭微生物作用的能力高效消毒剂：戊二醛、甲醛中效消毒剂：乙醇、碘伏低效消毒剂：新洁尔灭、洗必泰

第十九页，共三十一页，编辑于2023年，星期一20根据杀菌机制促进菌体蛋白质变性或凝固

酚类(高浓度)、醇类等干扰细菌的酶系统和代谢

某些氧化剂、重金属盐类等损伤细菌细胞膜

酚类(低浓度)、表面活性剂等第二十页，共三十一页，编辑于2023年，星期一21根据化学结构与性质酚类－－石炭酸（苯酚）、来苏（甲酚皂）、洗必泰（氯已定）等醇类－－70%~75%乙醇杀菌力最强重金属盐类－－红汞等氧化剂－－过氧化氢、过氧乙酸等表面活性剂－－增加菌细胞表面张力，并增加其通透性使细菌破裂，如新洁尔灭（苯扎溴铵）等烷化剂－－甲醛等，杀菌力强，但毒性大第二十一页，共三十一页，编辑于2023年，星期一22二、消毒剂的应用第二十二页，共三十一页，编辑于2023年，星期一231.患者排泄物与分泌物

粪、尿、脓、痰等，多用等量的20%漂白粉、5%石炭酸或2%来苏儿搅拌均匀，作用2h再倾去。厕所、阴沟的消毒多采用生石灰。第二十三页，共三十一页，编辑于2023年，星期一24

2.皮肤（手）外科手术常采用0.1%新洁而灭、0.01%洗必泰泡手。传染科医护人员手的消毒常用0.2%-0.4%过氧乙酸浸泡,可以杀灭乙肝病毒。注射或手术部位局部消毒用2.5%碘酒、70%酒精。皮肤浅表创伤可用2%红汞。第二十四页，共三十一页，编辑于2023年，星期一25

3.粘膜预防新生儿淋球菌性眼结膜炎：1%硝酸银滴眼口腔粘膜消毒：3%过氧化氢冲洗尿道、阴道、膀胱：0.1%高锰酸钾或0.01%洗必泰等。第二十五页，共三十一页，编辑于2023年，星期一26

4.水

煮沸法自来水用氯气消毒漂白粉第二十六页，共三十一页，编辑于2023年，星期一275.空气常用甲醛加热或甲醛混合高锰酸钾熏蒸：甲醛40ml加高锰酸钾30g/m3，熏蒸12～24h。居室空气消毒可用5-10ml醋酸/m3加等量水加热蒸发。肝炎病房可用3g/m3过氧乙酸熏蒸90min。第二十七页，共三十一页，编辑于2023年，星期一28

6.食具的消毒

煮沸15-30min

0.5%~1%漂白粉或过氧乙酸液浸泡30~60min。7.蔬菜、瓜果采用0.1%高锰酸钾浸泡15min。第二十八页，共三十一页，编辑于2023年，星期一298.温度计70%～75％酒精浸泡30min。肝炎者用2%碘酒浸泡