药品分析与检验3-1-1原料药质量检验-磺胺类药物的检验

原料药质量检验

——磺胺类药物的检验药品分析与检验项目背景磺胺类药是人工合成的应用最早的化学药品。由于抗菌谱广、价格低、化学性质稳定、使用方便。既可注射用又可内服。特别是高效、长效、广谱的磺胺药和增效剂使磺胺类药品在临床上的应用仅次于抗生素。但磺胺类药品同时也存在用量大、不良反应较多、细菌易产生耐药性等缺点。如使用不当会出现很多问题。项目背景

1932年，德国化学家合成了一种名为“白浪多息”的红色染料，因其中包含一些具有消毒作用的成分，所以曾被零星用于治疗丹毒等疾患。然而在实验中，它在试管内却无明显的杀菌作用，因此没有引起医学界的重视。同年，德国生物化学家格哈特·杜马克在试验过程中发现，“百浪多息”对于感染溶血性链球菌的小白鼠具有很高的疗效。后来，他又用兔、狗进行试验，都获得成功。这时，他的女儿得了链球菌败血病，奄奄一息，他在焦急不安中，决定使用“百浪多息”，结果女儿得救。令人奇怪的是“百浪多息”只有在体内才能杀死链球菌，而在试管内则不能。巴黎巴斯德研究所的特雷富埃尔和他的同事断定，“百浪多息”一定是在体内变成了对细菌有效的另一种东西。于是他们着手对“百浪多息”的有效成分进行分析，分解出“氨苯磺胺”。

1937年制出“磺胺吡啶”，1939年制出“磺胺噻唑”，1941年制出了“磺胺嘧啶”……这样，医生就可以在一个“人丁兴旺”的“磺胺家族”中挑选适用于治疗各种感染的药了。项目背景项目任务任务卡：磺胺嘧啶原料药的质量检验需要检查项目？采用什么方法？使用什么仪器？中国药典磺胺类药物基本结构——对氨基苯磺酰胺对氨基苯磺酰胺衍生物

N1取代物：母体结构中磺酰氨基上的一个氢原子被其它基团取代后的衍生物。N4取代物：母体结构中对位氨基上的一个氢原子被其他基团取代后的衍生物N1、N4取代物：母体结构中N1和N4上各有一个氢原子被取代的衍生物。磺胺类药物磺胺嘧啶

（sulfadiiazine；SD）

磺胺甲噁唑（sulfamethoxazoleSMZ）磺胺异噁唑（sulfafurazole；SIZ）磺胺醋酰钠（sulfacetamidesodium；SA-Na）

性状磺胺类药物一般为白色或微黄色结晶性粉末；无臭，无味。具有一定熔点。难溶于水，可溶于丙酮或乙醇。

鉴别酸碱两性酸碱两性化合物弱碱性：芳香第一胺弱酸性：磺酰胺基芳伯氨基磺酰胺基问题：此性质可用于哪些分析项目？

鉴别芳香第一胺：芳香第一胺类化合物是指苯环上连接有胺基这种基团的化合物。芳香第一胺类化合物具有还原性、弱碱性、重氮化偶合反应。其中重氮化偶合反应可对其进行鉴别。含氮杂环具有较强的紫外吸收和红外吸收特征在酸性条件下，还可与生物碱沉淀剂发生沉淀反应取代杂环的特性鉴别不同磺胺类药物的铜盐颜色及颜色变化磺胺类药物铜盐颜色及颜色变化磺胺甲噁唑草绿色磺胺嘧啶黄绿色→紫色

磺胺异噁唑淡棕色→暗绿色

磺胺醋酰钠蓝绿色

磺胺多辛黄绿色→淡蓝色

铜盐反应检查供试品1.0g氢氧化钠试液5ml水20ml比浊：1号浊度标准液—不得更深比色：黄色3号标准比色液—不得更浓比浊：控制溶液中不溶于碱的杂质限量比色：控制有色杂质（芳香第一胺的氧化产物偶氮化合物）的限量碱性溶液的澄清度与颜色含量测定磺胺类药物的测定项目及方法药物测定项目测定方法磺胺甲噁唑含量测定亚硝酸钠滴定法磺胺甲噁唑片含量测定亚硝酸钠滴定法磺胺嘧啶含量测定亚硝酸钠滴定法磺胺嘧啶片含量测定高效液相色谱法磺胺类复方制剂含量测定高效液相色谱法复方磺胺甲噁唑片溶出度测定高效液相色谱法磺胺嘧啶片溶出度测定紫外-可见分光光度法芳香第一胺基①碱性②重氮化反应③偶合反应④与芳醛缩合磺酰胺基①弱酸性②H可被金属离子取代取代基特性典型药物：磺胺嘧啶磺胺嘧啶典型药物：磺胺嘧啶白色或类白色结晶性粉末在乙醇或丙酮中微溶，在水中几乎不溶；在氢氧化钠试液或氨试液中易溶在稀盐酸中溶解。性状典型药物：磺胺嘧啶鉴别芳香第一胺的反应（重氮化-偶合芳醛缩合）与硫酸铜试液的反应（铜盐反应）取代基的反应（生物碱沉淀反应）红外光谱法（红外分光光度法）（1）芳香第一胺的反应鉴别方法：

取供试品约50mg，加稀盐酸1ml，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mol/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴，生成橙黄到猩红色沉淀。（1）芳香第一胺的反应（2）与硫酸铜试液的反应解析：磺胺类药物磺酰胺基上的氢原子被金属离子（银、铜、钴）取代，生成不同颜色的难溶性的金属盐沉淀。与硫酸铜的反应常用于本类药物的鉴别。（2）与硫酸铜试液的反应鉴别方法：取本品约0.1g，加水与0.4%氢氧化钠溶液各3ml，振摇使溶解，滤过，取滤液，加硫酸铜试液1滴，即生成黄绿色沉淀，放置后变为紫色。磺酰胺、芳胺、嘧啶环及苯环红外光谱中的特征峰图

磺胺嘧啶的红外吸收光谱（3）红外光谱法检查典型药物：磺胺嘧啶（1）溶液的澄清度与颜色有色的氧化产物——偶氮苯化合物方法：比色法要求：澄清无色；如显色，与黄色3号标准比色液比较，不得更深。（2）酸度取本品2.0g，加水100mL，置水浴中振摇加热10分钟，立即放冷，滤过；分取滤液25mL，加酚酞指示液2滴与氢氧化钠滴定(0.1mol/L)0.20mL，应显粉红色。（3）炽灼残渣

不得过0.1％。（4）重金属

不得过百万分之十。测定原理：利用磺胺类药物的N1取代物分子中含有芳伯氨基，在0~5℃低温状态下、盐酸介质中可与亚硝酸盐发生重氮化反应，测定磺胺类药物的含量。含量测定——亚硝酸钠法典型药物：磺胺嘧啶外指示剂——指示终点方法

亚硝基化滴定时可采用电位法或永停法指示终点，也可以使用指示剂。

通常以碘化钾与淀粉一起制成的指示剂最为常用。当滴定达到等计量后，稍微过量一点的HNO2，可将KI氧化成I2：

2NO2-＋2I-＋4H+→I2＋2NO＋2H2O

I2遇淀粉，即显蓝色。使用这种指示剂时不能把它直接加到滴定液中，因为这将使加入的NO2-在与芳伯胺作用之前先与KI作用，无法观察终点。为此，只能在滴定临近终点时，用玻棒蘸出少许滴定液，在外面与指示剂接触，看是否有蓝色立即出现以确定终点是否到达。这种使用指示剂的方法叫做外指示剂法。亚硝酸钠溶液的配制和标定【配制】取亚硝酸钠7.2g，加无水碳酸钠（Na2CO3)0.10g，加水适量使溶解成1000ml，摇匀。【标定】取在120°C干燥至恒重的基准对氨基苯磺酸约0.5g，精密称定，加水30ml与浓氨试液3ml，溶解后，加盐酸(1+2)20ml，搅拌，在30°C以下用本液迅速滴定，滴定时将滴定管尖端插入液面下约2/3处，随滴随搅拌；至近终点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水将尖端洗涤，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至用玻璃棒蘸取溶液少许，点于碘化钾淀粉试纸上，即显蓝色，停止滴定，3分钟后，再蘸取溶液少许，点一次，如仍显蓝色，即为终点。（需做一份预实验）每lml亚硝酸钠滴定液(0.1mol/L)相当于17.32mg的对氨基苯磺酸。亚硝酸钠溶液的配制和标定项

目1#2#3#倾样前称量瓶+对氨基苯磺酸

质量/g

倾样后称量瓶+对氨基苯磺酸质量/g

m(对氨基苯磺酸)/g

标定用V

(NaNO2)/mL

c(NaNO2)/mol·L-1

(NaNO2)

/mol·L-1

取供试品约0.5g，精密称定，置烧杯中，加水40mL与盐酸溶液(1+2)15mL，然后置于电磁搅拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾2g，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，用亚硝酸钠液滴定液迅速滴定，随滴随搅拌。至近终点时，用淀粉碘化钾试纸作为指示剂，继续缓缓滴定，直到试纸变蓝，即为滴定终点。每